光叶巴豆中的西松烷型二萜

2022-07-26罗兴礼张金凤陈业高

海南师范大学学报（自然科学版） 2022年2期

张静，罗兴礼，张金凤，高澜，陈业高

（云南师范大学化学化工学院，云南昆明 650500）

光叶巴豆（Croton laevigatusVahl）是大戟科（Euphorbiaceae）巴豆属（Croton）植物，主要分布于印度、斯里兰卡以及我国海南省和云南省南部。生长于海拔50～600 m的密林、疏林、溪边或灌木丛中[1]。其根和叶均可入药，有活血通络、解热镇痛的功效，可用于治疗疟疾、胃痛等。中外学者对光叶巴豆的研究表明，光叶巴豆中的化学成分丰富，主要包括二萜、三萜、倍半萜、黄酮和甾体等。其中西松烷型（cembrane-type）、半日花烷型（labdane-type）、克罗烷型（clerodane-type）等多种类型的二萜类化合物是光叶巴豆的主要活性成分[2-5]。这些成分的生物活性主要表现为细胞毒、抗肿瘤、抗HIV和抗炎镇痛等[6-9]。为了进一步地从光叶巴豆中分离出更多活性良好的二萜成分，本文对采自云南西双版纳的光叶巴豆枝叶部分进行了研究，采用多种色谱技术对其化学成分进行分离纯化，从中分离并鉴定出5个西松烷型二萜（图1）。分别为：sublylactones A（1），B（2），laevigatlactones C（3），E（4），F（5）。

图1 光叶巴豆中的西松烷型二萜Figure 1 Cembrane-type diterpenes from Croton laevigatus Vahl

1 实验仪器、试剂与材料

1.1 仪器

核磁共振波谱仪DRX 500，BRUKER；N-1100型旋转蒸发仪，东京理化器械独资工厂；ZF-1型三用紫外分析仪，杭州齐威仪器有限公司。

1.2 试剂

层析硅胶：80～100 目，200～300 目；H 硅胶，青岛海洋化工厂；Sephadex LH-20 凝胶；薄层层析硅胶板HSGF254，烟台江友硅胶开发有限公司；显色剂为10%硫酸乙醇溶液，所用溶剂均为工业纯（重蒸）；其它试剂为分析纯或化学纯。

1.3 植物材料

光叶巴豆枝叶采自云南省西双版纳，由中国医学科学院药用植物开发研究所云南分所彭朝中老师鉴定为Croton laevigatusVahl。

2 化合物的提取与分离

光叶巴豆枝叶部分（11.5 kg）晾干粉碎，工业甲醇（50 L）浸泡提取5次，将浸出液减压浓缩得到甲醇提取物（1.8 kg）。用乙酸乙酯-水对甲醇浸提物萃取10次，减压浓缩后得到乙酸乙酯萃取物（760 g）。乙酸乙酯萃取物用硅胶（80～100目）拌样，进行硅胶柱层析，以石油醚/乙酸乙（0∶1→1∶0）进行梯度洗脱，经TCL检验，得到8个组分（F1-F8）。利用硅胶柱层析和Sephadex LH-20凝胶柱层析对F5（石油醚/乙酸乙酯5∶1）部分进行反复分离纯化得到sublylactone A（1，15.1 mg），sublylactone B（2，10.0 mg），laevigatlactones C（3，8.1 mg），E（4，6.3 mg）和F（5，6.7 mg）。

3 结构鉴定

化合物1：sublylactone A，无色油状物，10%硫酸乙醇溶液加热呈深紫色，MF：C20H30O4，MW：334;1H NMR（500 MHz，CDCl3）δH：6.93（1H，m，H-11），5.47（1H，d，J= 15.6 Hz，H-7），5.42（1H，m，H-3），5.42（1H，d，J= 15.6 Hz，H-6），5.38（1H，m，H-2），2.34（2H，d，J= 7.3 Hz，H-5），2.17（2H，d，J=14.1，6.3 Hz，H-13），2.13（2H，m，H-10），1.94（1H，dd，J= 14.1，14.1，6.3 Hz，H-14b），1.88（1H，m，H-9b），1.86（1H，m，H-15），1.84（1H，m，H-9a），1.78（1H，dd，J=14.1，6.3 Hz，H-14a），1.39（3H，s，H-18），1.27（3H，s，H-19），0.96（3H，d，J= 7.1 Hz，H-17），0.94（3H，d，J= 7.1 Hz，H-16）。13C NMR（125 MHz，CDCl3）δC：168.1（s，C-20），146.3（d，C-11），138.6（d，C-3），137.9（d，C-7），127.1（d，C-2），124.3（s，C-12），124.0（d，C-6），85.7（s，C-1），72.6（s，C-4），72.5（s，C-8），46.7（t，C-5），41.2（t，C-9），37.2（d，C-15），26.9（t，C-14），26.5（q，C-19），25.6（t，C-10），25.2（q，C-18），21.0（t，C-13），17.3（q，C-16），16.8（q，C-17）。与文献报道的sublylactone A的1H NMR和13C NMR数据基本一致，因此化合物1确定为sublylactone A[10]。

化合物2：sublylactone B，无色油状物，10%硫酸乙醇溶液加热呈深紫色，MF：C20H30O4，MW：334;1H NMR（500 MHz，CDCl3）δH：6.04（1H，m，H-11），5.60（1H，d，J= 15.8 Hz，H-2），5.58（1H，d，J= 15.8 Hz，H-3），5.46（1H，m，H-6），5.33（1H，dd，J= 15.8，2.5 Hz，H-7），2.98（1H，m，H-10b），2.50（2H，m，H-13），2.44（1H，ddd，J= 14.5，2.8，2.3 Hz，H-5b），2.19（1H，m，H-10a），2.15（1H，dd，J= 14.5，2.8 Hz，H-5a），1.91（1H，m，H-9b），1.86（1H，m，H-14b），1.82（1H，m，H-15），1.80（1H，m，H-14a），1.76（1H，dd，J=5.9，2.9 Hz，H-9a），1.30（3H，s，H-18），1.25（3H，s，H-19），0.94（3H，d，J=7.3 Hz，H-17），0.92（3H，d，J= 7.3Hz，H-16）。13C NMR（125 MHz，CDCl3）δC：167.3（s，C-20），149.3（d，C-11），138.5（d，C-7），137.4（d，C-3），125.5（d，C-2），124.0（s，C-12），123.0（d，C-6），86.0（s，C-1），73.5（s，C-4），73.4（s，C-8），47.3（t，C-5），42.4（t，C-9），37.5（d，C-15），31.0（q，C-19），28.6（q，C-18），28.5（t，C-14），26.8（t，C-10），24.4（t，C-13），17.5（q，C-16），17.5（q，C-17）。与文献报道的sub⁃lylactone B的1H NMR和13C NMR数据基本一致，因此化合物2确定为sublylactone B[10]。

化合物3：laevigatlactone C，无色油状物，10%硫酸乙醇溶液加热呈粉紫色，MF：C20H30O3，MW：318，1H NMR（500 MHz，CDCl3）δH：6.98（1H，dd，J= 11.1，2.5 Hz，H-11），5.71（1H，d，J= 16.0 Hz，H-2），5.64（1H，d，J=16.0 Hz，H-3），4.66（1H，t，J=8.5 Hz，H-7），2.71（1H，m，H-13a），2.31（1H，dd，J=13.5，11.1 Hz，H-10a），2.24（1H，dd，J=13.5，6.4 Hz，H-9a），2.20（1H，d，J=13.5 Hz，H-10b），2.13（1H，m，H-13b），2.10（1H，m，H-6a），2.04（1H，m，H-6b），1.99（1H，t，J= 6.4 Hz，H-9b），1.94（1H，m，H-14a），1.83（1H，d，J=8.0 Hz，H-5a），1.80（1H，t，J=7.3 Hz，H-15），1.65（1H，m，H-14b），1.54（1H，m，H-5b），1.54（3H，s，H-19），1.22（3H，s，H-18），0.97（3H，d，J= 7.3 Hz，H-16），0.97（3H，d，J=7.3 Hz，H-17）。13C NMR（125 MHz，CDCl3）δC：169.1（s，C-20），148.3（d，C-11），138.3（d，C-3），132.6（s，C-8），130.6（d，C-7），126.7（s，C-12），126.0（d，C-2），88.3（s，C-1），74.1（s，C-4），43.6（t，C-5），39.3（d，C-15），38.6（t，C-9），32.1（q，C-18），28.8（t，C-14），27.1（t，C-10），24.0（d，C-6），22.0（t，C-13），17.7（q，C-17），17.6（q，C-19），16.9（q，C-16）。与文献报道的laevigatlactone C 的1H NMR和13C NMR数据基本一致，因此化合物3确定为laevigatlactone C[11]。

化合物4：laevigatlactone E，无色油状物，10%硫酸乙醇溶液加热呈深紫色，MF：C20H30O4，MW：334;1H NMR（500 MHz，CDCl3）δH：6.84（1H，m，H-11），5.60（1H，m，H-6），5.48（1H，d，J= 15.9 Hz，H-2），5.35（1H，dd，J=15.3，1.7 Hz，H-7），5.31（1H，d，J=15.9 Hz，H-3），2.43（1H，m，H-13a），2.33（1H，m，H-5a），2.23（1H，m，H-13b），2.20（1H，m，H-10a），2.18（1H，m，H-5b），2.14（1H，m，H-10b），2.05（1H，dd，J=12.2，6.0 Hz，H-14a），1.88（1H，m，H-9），1.85（1H，m，H-15），1.77（1H，dd，J=12.2，6.0 Hz，H-14b），1.33（3H，s，H-19），1.26（3H，s，H-18），0.94（3H，d，J=7.0 Hz，H-16），0.94（3H，d，J= 7.0 Hz，H-17），13C NMR（125 MHz，CDCl3）δC：168.9（s，C-20），146.3（d，C-11），138.6（d，C-3），137.9（d，C-7），127.1（d，C-2），124.3（s，C-12），124.0（d，C-6），85.7（s，C-1），72.7（s，C-4），72.5（s，C-8），46.7（t，C-5），41.2（t，C-9），37.2（d，C-15），29.8（q，C-18），29.4（t，C-14），26.9（t，C-10），26.6（q，C-19），21.0（t，C-13），17.3（q，C-16），16.9（q，C-17）。与文献报道的laevigatlactone E 的1H NMR和13C NMR数据基本一致，因此化合物4确定为laevigatlactone E[11]。

化合物5：laevigatlactone F，无色油状物，10%硫酸乙醇溶液显色为紫色，MF：C20H30O5，MW：350;1H NMR（500 MHz，CDCl3）δH：6.80（1H，dd，J=11.4，2.3 Hz，H-11），5.62（1H，ddd，J=15.8，10.7，3.4 Hz，H-6），5.51（1H，d，J= 15.8 Hz，H-2），5.31（1H，dd，J= 15.7，2.1 Hz，H-7），5.20（1H，d，J= 15.8 Hz，H-3），2.41（1H，m，H-13a），2.29（1H，dd，J=14.9，3.1 Hz，H-5a），2.23（1H，m，H-13b），2.19（1H，m，H-10a），2.15（1H，m，H-10b），2.13（1H，m，H-5b），1.99（1H，dd，J=13.7，6.2 Hz，H-14a），1.84（1H，d，J= 14.1，3.0 Hz，H-9a），1.82（1H，s，H-15），1.78（1H，dd，J= 14.1，3.0 Hz，H-9b），1.72（1H，dd，J=13.7，6.2 Hz，H-14b），1.29（3H，s，H-19），1.22（3H，s，H-18），0.95（3H，d，J=7.3 Hz，H-17），0.94（3H，d，J=7.3 Hz，H-16）。13C NMR（125 MHz，CDCl3）δC：170.7（s，C-20），148.5（d，C-11），140.2（d，C-3），133.3（d，C-7），128.2（d，C-6），125.7（d，C-2），125.5（s，C-12），87.7（s，C-1），84.2（s，C-8），73.0（s，C-4），47.5（t，C-5），38.5（t，C-9），38.1（d，C-15），30.8（t，C-14），29.9（q，C-18），25.9（t，C-10），24.6（t，C-13），22.0（q，C-19），17.7（q，C-16），16.8（q，C-17）。与文献报道的laevigatlactone F的1H NMR和13C NMR数据基本一致，因此化合物5确定为laevigatlactone F[12]。