黑色素瘤相关抗原A10 对非肌层浸润性膀胱癌术后复发的评估价值

王祥宇 蔡龙俊 施 龙 蔡维奇 张建军

1.徐州医科大学附属宿迁医院 南京鼓楼医院集团宿迁医院泌尿外科，江苏宿迁 223800；2.江苏师范大学科文学院，江苏徐州 221116

膀胱癌是泌尿系统中常见的恶性肿瘤。目前，全球每年约有165 000 人死于该疾病[1]。在中国，近年来膀胱癌的发病率和病死率均呈逐步上升态势[2-3]。约75%的膀胱癌为非肌层浸润膀胱癌[4]，经尿道膀胱肿瘤电切术及术后膀胱灌注是其主要治疗方式[5-6]，但其术后5 年内有78%的患者会复发，且复发后肿瘤多进一步进展[7-8]，给患者带来了严重的身心损害。因此，寻找评估非肌层浸润性膀胱癌（non-muscle-invasive bladder cancer，NMIBC）复发的指标具有重要意义。

黑色素瘤相关抗原A10（melanoma associated antigen A10，MAGE-A10）是一种肿瘤相关抗原，能引起细胞、体液免疫应答[9]，其在非肌层浸润膀胱癌中有阳性表达[10]。本课题组前期发现，MAGE-A10 阳性与非肌层浸润膀胱癌术后复发存在相关性[9]。为进一步了解MAGE-A10 与非肌层浸润膀胱癌术后复发的关系，本课题组扩大了样本量，并应用Cox 回归分析、受试者操作特征（receiver operating characteristic，ROC）曲线等方法进行本研究。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾性分析2016 年3 月至2020 年6 月徐州医科大学附属宿迁医院泌尿外科行经尿道膀胱肿瘤电切术的NMIBC 患者106 例，均经术后病理确诊。106 例患者均进行MAGE-A10 的免疫组化检测。记录并分析患者年龄、性别、MAGE-A10 表达阳性、肿瘤大小、肿瘤分级、肿瘤分期、是否即刻膀胱灌注、术后肿瘤是否复发及复发时间等资料。所有患者术前均未行放化疗。膀胱癌复发：初发膀胱癌电切后3 个月以上，经再一次病理组织学诊断为膀胱癌。随访起点为手术日期，随访终点为2020 年6 月30 日，随访12～51 个月，平均（25.2±6.6）个月。该研究通过徐州医科大学附属宿迁医院伦理委员会的审批，并取得患者知情同意。

1.2 肿瘤标本的MAGE-A10 免疫组织化学检测

肿瘤标本切片行HE 染色明确诊断后作MAGEA10 染色观察。采用SP 法行免疫组织化学检测。MAGE-A10 抗体购于美国ProteinTechGroup 公司，操作步骤按试剂盒说明进行。以显微镜下呈现棕黄色，染色于细胞核，判定为MAGE-A10 的阳性表达。

1.3 随访

通过查阅住院病历、电话询问、患者来院复诊检查等方式获得随访资料。终点事件为术后首次复发或患者死亡，复发定义为膀胱内出现新的尿路上皮癌。截至随访结束，患者仍然无复发，未出现终点事件，视为数据删失。

1.4 统计学方法

采用SPSS 22.0 软件对数据进行统计分析。相关性分析采用χ2检验；无复发生存时间使用Kaplan-Meier 分析，采用log-rank 检验；应用Cox 回归分析进行单因素及多因素分析；应用ROC 曲线法分析MAGE-A10 评估非肌层浸润膀胱癌患者术后复发的准确性。以P ＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 MAGE-A10 表达情况及随访患者的复发情况

106 例患者中MAGE-A10 阳性者为41 例，阴性者为65 例，其阳性表达率为38.68%。截至随访终点，其中46 例患者肿瘤复发，复发率为43.40%。

2.2 Kaplan-Meier 分析

患者MAGE-A10 阳性、肿瘤数目、肿瘤大小、肿瘤分级及肿瘤分期对患者术后肿瘤复发有影响，差异有高度统计学意义（P ＜0.01）。见表1。

表1 临床病理特征对肿瘤复发的Kaplan-Meier 分析

2.3 Cox 回归分析

经单因素Cox 回归分析，MAGE-A10 阳性、肿瘤多发、肿瘤≥3 cm、肿瘤分级高及肿瘤分期高是非肌层浸润膀胱癌患者肿瘤复发的独立危险因素（P <0.05）。经多因素Cox 回归分析，MAGE-A10 阳性、肿瘤分级高及肿瘤分期高是非肌层浸润膀胱癌患者肿瘤复发的独立危险因素（P <0.05）。见表2。

表2 临床病理特征对肿瘤复发的单因素及多因素Cox 回归分析

2.4 MAGE-A10 对患者无复发生存时间的影响

MAGE-A10 阳性组中位无复发生存时间为20 个月，MAGE-A10 阴性组中位无复发生存时间为41 个月，两组比较差异有高度统计学意义（χ2=28.537，P ＜0.001）。见图1。

图1 NMIBC 患者的无复发生存曲线

2.5 MAGE-A10 评估NMIBC 患者术后复发的准确性检验

MAGE-A10 评估NMIBC 患者术后复发的的灵敏度为69.57%，特异度为85.00%，约登指数为0.5457。ROC 曲线的曲线下面积（area under the curve，AUC）为0.773，95%CI 为0.678～0.868（P ＜0.001）。见图2。

图2 MAGE-A10 评估NMIBC 患者术后复发的ROC曲线

3 讨论

膀胱肿瘤的发病率居于我国泌尿系肿瘤的首位，发生率占全身恶性肿瘤的0.032%[11]。约75%患者为NMIBC，通过经尿道膀胱肿瘤电切术及膀胱灌注治疗后仍有40%～80%患者会复发，且有15%的初始病例进展为肌层浸润性膀胱癌[12-13]，是导致治疗失败和患者死亡的重要原因，困扰着我们对膀胱癌的治疗。因此，研究评估膀胱癌的复发的影响因素有重要的意义。

欧洲癌症治疗研究组织评分系统和风险表于2006 年发布[14]，是目前预测NMIBC 术后是否复发最有效的模型。该模型包括欧洲7 个癌症研究中心2596 例NMIBC 患者数据，其结果为肿瘤数目、大小及既往有复发病史是影响肿瘤复发的最重要因素。研究发现膀胱癌的临床分期、病理分级、大小、数目、手术方式、术后辅助放化疗、术后膀胱灌注等因素与膀胱癌的复发有关[14-17]。亦有文献表明，术前外周血中性粒细胞与淋巴细胞比值（NLR）≥3.0 及术前全身免疫炎症指数是影响NMIBC患者TURBT 术后肿瘤复发的独立危险因素[18-20]。本研究显示，MAGE-A10 阳性、肿瘤高分级、肿瘤分期高是膀胱癌患者复发的独立危险因素。

到目前为止，膀胱肿瘤缺乏敏感、特异的生物学标志物来预测膀胱肿瘤术后复发及预后[21]。寻找新的生物学标志物对于改善NMIBC 患者风险分类和进展预测具有重要意义[14]。MAGE-A10 是肿瘤和睾丸抗原家族的一个成员，其在黑色素瘤、膀胱癌和肺癌等肿瘤组织中有阳性表达，可作为监测病情变化和免疫治疗的潜在靶点[10]。而MAGE-A10 在NMIBC 中有较高表达，同肿瘤等级相关，并且与患者肿瘤进展有关[22]。本课题组前期研究发现，MAGE-A10 阳性与NMIBC术后高复发率相关[9]。本研究进一步发现，MAGE-A10的阳性表达是NMIBC 患者术后复发的独立危险因素。

ROC 曲线广泛应用于医学诊断及机器学习等领域。AUC 被广泛的应用于ROC 曲线的比较[23]，其取值范围为0.5～1.0[24]。一般认为，AUC 在0.7～0.9 表示诊断价值中度，而0.9 以上表示诊断价值较高[25]。本研究中MAGE-A10 预测NMIBC 术后复发的AUC 值为0.773，提示其具有较好的预测价值。

综上所述，MAGE-A10 阳性表达是NMIBC 术后复发的独立危险因素，可考虑作为评估NMIBC 复发的一个新的潜在指标。但本研究样本量较小，且为回顾性研究，其结论有待于大样本病例及前瞻性研究进一步验证。