六种杀菌剂对哈茨木霉菌丝生长影响研究

曹秀荣 董照锋 任 岗 熊潇垚 邵 鹏 徐 艳

木霉 (Trichoderma spp.) 是广泛分布于土壤、植物残体、植物根围和叶围、海洋以及空气等环境中的一类真菌， 对多种细菌和病原真菌有拮抗作用， 已被作为生防制剂广泛应用于农业生产。 但木霉也因具有适应性强、 繁殖速度快、为害期长等特性，极易侵染香菇、平菇、双孢菇、杏鲍菇、茶树菇、毛木耳和灵芝等多种食用菌的培养基质、菌种、菌丝和子实体，造成减产甚至绝收， 为食用菌生产中的第一大竞争性杂菌。 其中，绿色木霉（Trichoderma viride）与哈茨木霉（Trichoderma harzianum）是相对优势菌种。

我们研究了戊唑醇、 枯草芽孢杆菌、 四霉素、 春雷霉素、 多抗霉素、 多菌灵6 种杀菌剂对哈茨木霉菌丝生长的影响， 以期为哈茨木霉作为生防菌应用于农业生产时如何协调与生物防治、 化学防治的矛盾， 以及其作为食用菌生产中的竞争性杂菌时如何选择防治药剂提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验材料

1）供试药剂。 430 g/L 戊唑醇悬浮剂，盐城利民农化有限公司生产；100 亿芽孢/g 枯草芽孢杆菌粉剂，陕西绿顿作物科技有限公司生产；0.15%四霉素水剂，辽宁微科生物工程股份有限公司生产；2%春雷霉素水剂， 绩溪农华生物科技有限公司生产； 3%多抗霉素水剂， 绩溪农华生物科技有限公司生产； 40%多菌灵悬浮剂，江苏剑牌农化股份有限公司。以上材料均为市售。

2）供试培养基。 马铃薯葡萄糖琼脂培养基(PDA)：无菌水1 000 mL，马铃薯200 g，葡萄糖20 g，琼脂15 g。

3）供试菌种。 供试的哈茨木霉菌株 （Trichoderma harzianum）， 来源于2021 年3 月3日从商洛盛泽农林科技发展有限公司香菇基地采回的染病香菇菌棒， 经实验室分离鉴定后，接种到PDA 试管斜面培养基， 于4 ℃条件下保存。

1.2 试验方法

1）试验设计。 采用菌丝生长速率法，测定6种供试药剂对哈茨木霉菌丝的抑制作用。 试验设7 个处理，每个处理4 次重复，各处理浓度依据使用说明推荐用量确定，无菌水作对照。如表1 所示。

表1 6 种供试杀菌剂的试验设计浓度

2）含药PDA 平板制备。将供试药剂用灭菌水稀释至设计浓度的10 倍， 编号后备用。 取6 mL 稀释好的药液注入100 mL 经过灭菌处理的烧杯中， 再加入经高压蒸汽灭菌并冷却至50 ℃左右的PDA 培养基54 mL， 充分混匀，制成60 mL 设计浓度的含药培养基（为防止培养基过快冷凝而影响试验进程， 每个处理多配制20 mL），然后取10 mL 注入经过灭菌处理的9 cm 培养皿中， 制成试验设计浓度的PDA 平板。 以无菌水替代药液， 同上述方法制作空白对照。

3）菌丝接种。 将哈茨木霉菌接种于马铃薯葡萄糖琼脂培养基，在温度28 ℃、湿度90%条件下培养4 天，活化菌种。在一培养皿内菌落生长均匀、 旺盛的同一半径处用打孔器制作直径6 mm 的菌饼，用接种针挑取菌饼正面向下转接种到各处理PDA 平板培养基中心位置，置于温度28 ℃、 湿度90%条件下培养， 分别于48 小时、72 小时、96 小时用十字交叉法测量各皿菌落直径，并按下试计算菌丝生长抑制率：

2 结果与分析

从表2、图1 可知：依据使用说明推荐的田间剂量浓度下，6 种杀菌剂对哈茨木霉菌丝96小时抑制率由大到小排序为：戊唑醇＞枯草芽孢杆菌＞四霉素＞多菌灵＞春雷霉素＞多抗霉素。 戊唑醇抑制效果最好，48 小时、72 小时、96 小时抑制率均达到98%以上，呈逐渐增大趋势；枯草芽孢杆菌抑制率略低于戊唑醇，48 小时、72 小时、96 小时抑制率均达到92%以上，72 小时达到最高，72～96 小时基本稳定；春雷霉素和多抗霉素48 小时、72 小时、96 小时抑制率均低于20%，96 小时抑制率分别为6.3%和4.4%；多菌灵和四霉素抑制率处于中等水平，96 小时抑制率分别为58.4%和50.1%。

表2 6 种杀菌剂对哈茨木霉菌丝的抑制作用

图1 6 种杀菌剂对哈茨木霉菌丝96 小时抑制效果

3 小结与讨论

试验结果表明，在推荐的田间剂量下，春雷霉素和多抗霉素对哈茨木霉菌菌丝生长抑制作用较小，96 小时抑制率分别为6.3%、4.4%；四霉素和多菌灵对哈茨木霉菌丝96 小时抑制率分别为58.4%、50.1%，抑制作用明显；戊唑醇和枯草芽孢杆菌对哈茨木霉菌丝有显著的抑制作用，96 小时抑制率分别达到99.4%、94.6%。

由以上结果得出，6 种杀菌剂中，能与哈茨木霉配伍， 增强防治效果的药剂为春雷霉素和多抗霉素， 不建议与哈茨木霉配伍的药剂为四霉素和多菌灵， 坚决禁止与哈茨木霉配伍的药剂为戊唑醇和枯草芽孢杆菌。 由于戊唑醇和枯草芽孢杆菌对哈茨木霉抑制作用显著， 可在进一步研究其对食用菌菌丝生长影响的基础上，确定其可否适用于食用菌木霉病害防治。