芪英汤和子甘汤中药复方促进母猪繁殖性能和断奶仔猪生长性能的临床研究

郭大伟，侯思鲁，池宇佳，于非可，尉啸涵，邓 倩，肖传明，刘晓晔*，董 虹*

(1. 北京农学院 兽医学(中医药)北京市重点实验室，北京102206； 2. 北京农学院 北京市中兽药工程技术研究中心，北京 102206；3. 北京康华远景股份有限公司，北京 101509)

母猪繁殖性能以及断奶仔猪的生长性能与养殖效益密切相关，因此培育优良的后备母猪以及预防断奶仔猪腹泻是提高养猪业利润的重要策略。由于母猪产仔数量增多，导致产程和产后仔猪的死亡率增加。目前，我国集约化养殖母猪平均每只每胎产仔后存活数量在8～12头，丹麦集约化养殖场母猪的产仔存活数能达到15头以上，我国母猪健康水平未能达到高水平阶段。断奶仔猪通过母乳中免疫球蛋白获得免疫力，并随着时间呈下降趋势，免疫球蛋白在仔猪出生后1周达到峰值，第3周降到最低值，而仔猪免疫系统发挥作用为出生后第4周。通常来说，仔猪哺乳期一般为3～5周，应该控制在35 d，由于仔猪早期断奶缩短母猪哺乳期一定程度提高母猪生产力，采取21～25 d断奶，甚至在18～20 d断奶手段，可能会引起仔猪腹泻，严重造成仔猪死亡。

母猪繁殖性能低下以及断奶仔猪腹泻严重影响养猪业的发展。引起母猪产死胎的原因有多种，如繁殖障碍性疾病、氧化应激状况、母猪的年龄因素、营养状况、新生仔猪体重、出生状况以及饲喂管理以及环境因素等。母猪哺乳期结束后，对新生仔猪进行断奶，由于仔猪肠道等消化系统发育还不够健全，加上仔猪断奶为了适应环境会出现氧化应激造成肠道结构功能以及肠道菌群改变等，表现为食欲降低、生长迟缓、抵抗免疫力下降、腹泻以及水肿等症状，严重会导致仔猪死亡。由于抗生素的药物残留，目前，非特异性免疫刺激剂、天然植物以及植物提取物被作为饲料添加剂添加到基础日粮中提高母猪繁殖性能以及断奶仔猪生长性能。集约化养殖生产中，添加饲料添加剂后导致养殖成本升高，而中药资源广泛、价格低廉，并且根据中兽医理论临床辩证添加到基础日粮当中能够极大降低饲喂成本，因此可以通过生产植物提取物饲料添加剂以减少病原微生物的侵入以及增强机体免疫，已然成为动物营养学研究的热点。

芪英汤和子甘汤为中药复方，因此本研究以芪英汤、子甘汤作为饲料添加剂探究对母猪生产性能的影响，为中草药饲料添加剂的开发提供参考。

1 材料与方法

1.1 试剂

芪英汤中药复方提取物粉剂(黄芪、蒲公英、金银花、白术、知母、女贞子、甘草中药提取物，北京康华远景科技股份有限公司)，子甘汤中药复方提取物粉剂(苦木、诃子、甘草中药提取物，北京康华远景科技股份有限公司)；基础日粮购自北京正大饲料有限公司(表1、2)；猪IgA(货号：MM-0905O1)IgM (MM-0402O1)、IgG (货号：MM-0403O1)、IL-6(货号：MM-0418O1)、IL-1β(货号:MM-0422O1)、TNF-α(货号：MM-0383O1) ELISA 试剂盒购自上海酶联生物科技有限公司；猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体ELISA检测试剂盒(生产批号：PRRSV20201021E)、猪圆环病毒Ⅱ型抗体酶免检测试剂盒(生产批号：PCV20210517E)购自哈尔滨元亨生物药业有限公司; IDEXX、IDEXX PRV/ADV gB抗体检测试剂盒(货号：99-09732)；IDEXX PRV/ADV gE 抗体检测试剂盒(货号：99-09836)

1.2 主要仪器

离心机(Sigma，型号: 6-16K)；酶联免疫分析仪(杭州奥盛仪器有限公司，型号：AMR-100)；实时荧光定量PCR系统(德国Roche公司，型号：LightCycler480II)

1.3 试验分组

采取随机分组试验设计，选择同期发情的大长及长大二元/三元母猪35头，用同一头公猪的精液人工授精，两日内间隔12 h重复3次。随机分为两个处理组，分别为芪英汤组(=16)和空白组(=19)，芪英汤组于母猪妊娠开始饲喂，分娩结束后完成饲喂。当新生仔猪断奶后，将饲喂芪英汤母猪组的断奶仔猪作为子甘汤组，空白母猪组的断奶仔猪为仔猪空白对照组，各组均分为7个平行重复组(=10)， 于新生仔猪断奶后开始饲喂，试验周期为30 d。空白处理组饲喂母猪或断奶仔猪基础日粮，芪英汤组、子甘汤组分别以1.0、0.5 g·kg将芪英汤粉剂和子甘汤粉剂混入基础日粮中。

表1 母猪日粮中营养成分

1.4 饲喂管理

试验开始之前对猪舍进行清洗、消毒、空置，对母猪常规免疫以及驱虫处理。控制猪舍不同围栏内的温湿度、通风状况一致。根据猪场饲喂程序正常饲喂，母猪妊娠期前84 d，给料量为(2.0±0.5) kg·d；妊娠期85～112 d，给料量为 (3.5±0.5) kg·d；产前 2 d，给料量为 2.0 kg·d；产仔当天，给料量为 1.0 kg；哺乳期1周内，除第1天不给料外，其余每头每天从1.0 kg 依次递增，一周后恢复自由采食。每日4:30—5:00、16:20—16:50饲喂两次，均为自由采食和饮水。将各组断奶仔猪分于同一仔猪猪舍，并且各组重复分在同一栏。每天早上7:00—8:00、13:00—14:00、18：00—19:00以1.5 kg饲料·d饲喂仔猪3次，仔猪体重10 kg后更换基础日粮(图1)。

1.5 样品采集与分析

母猪妊娠期全过程检测猪舍温度、湿度以及猪舍空气的氨气含量，维持试验过程中适宜的环境条件。每个处理组选取7头母猪，在妊娠期30、60、90 d和分娩当天进行颈前腔静脉采血，每头次母猪采血5 mL， 于5 mL采血管中；每个处理组选取2头断奶仔猪，在10、20、30 d进行颈前腔静脉采血10 mL，分别于5 mL EDTA采血管和5 mL采血管， 4 ℃3 000 r·min离心10 min后，取上清分装于1 mL离心管中，于-80 ℃保存。

表2 断奶仔猪日粮中营养成分

图1 芪英汤和子甘汤组试验流程Fig.1 Qiying decoction and Zigan decoction group test process

样品用酶联免疫吸附法(ELISA)测定IgA、IgM、IgG、IL-6、IL-1β、TNF-α，各项操作均按照ELISA试剂盒说明书进行；用qPCR方法检测母猪圆环病毒2型、伪狂犬病病毒GB、伪狂犬病病毒GE、猪繁殖与呼吸综合征病毒以及酶联免疫吸附法(ELISA)检测病毒抗体，检测时间为妊娠期90 d。

分娩过程中，详细记录好分娩参数，包括分娩持续时间、出生间隔、产仔数、新生仔猪重量、死胎数以及死胎出生顺序、弱胎数等指标。分别在仔猪断奶前和仔猪断奶后称重，同时每天记录各组动物采食量、腹泻率。

1.6 数据处理与分析

2 结 果

2.1 芪英汤作为饲料添加剂对妊娠母猪繁殖性能的影响

妊娠舍面积、空间大，保持猪舍内的良好的通风条件，温度波动较大，差异显著，同时较大程度上受季节因素的影响，温度保持在15～25 ℃水平。与妊娠舍相比，分娩舍面积、空间小且猪舍环境相对封闭，温度则稳定在10～24 ℃，较高于妊娠舍最低温度(图2A)。本试验母猪整个妊娠期作为试验周期，贯穿夏、秋、冬3个季节，由于试验初期位于夏末，猪舍配有水帘，湿度相比其他时间段湿度较高，妊娠期20～60 d湿度变化显著，60 d后湿度趋于稳定，湿度相对较高，妊娠舍湿度稳定在36%～82%；分娩舍湿度稳定在57%～75%，整体湿度适中(图2B)。猪舍空气中的氨气检测值，妊娠舍氨气值≤5×10，分娩舍氨气值≥2×10且≤7×10。环境温度、湿度适宜母猪生产，空白对照组和芪英汤处理组均在相同猪舍环境条件下开展试验，排除环境对母猪繁殖性能的影响。

仔猪出生顺序显著影响仔猪死亡率，试验中仔猪出生顺序主要集中在25%之前以及90%之后，出生顺序集中于50%的仔猪存活率高，与芪英汤处理组对比，空白对照组死胎出生顺序比较集中，差异不显著(图2C)。芪英汤处理组死胎体重低于空白对照组，差异不显著，并且两种死胎性状之间不存在差异(图2D)。母猪妊娠周期长度平均为114 d，芪英汤处理组母猪的妊娠周期长度增加(图2E))。低胎次母猪(2～6胎)，与对照组相比，芪英汤处理组仔猪出生均重增加0.02 kg，死胎率下降1.96%，弱仔率下降5.38%，仔猪死亡率下降8.25%，断奶后仔猪均重增加0.37 kg。与对照组相比，高胎次母猪在窝均死胎数、死胎率结果刚好相反(表3)。

A. 母猪妊娠舍和分娩舍温度曲线；B.母猪妊娠舍和分娩舍湿度曲线；C.母猪死胎出现顺序；D. 新生仔猪死胎体重；E. 母猪妊娠周期A. Temperature curve of sow gestation house and farrowing house; B. Humidity curve of sow gestation house and farrowing house; C. The order of sow stillbirth; D.Stillbirth weight of newborn piglets; E. Sow gestation cycle length图2 妊娠母猪繁殖性能Fig.2 Reproductive performance of pregnant sow

2.2 芪英汤对妊娠母猪炎性因子、免疫球蛋白、病毒性疾病抗体的影响

血清中TNF-α含量在芪英汤处理组和空白处理组之间，妊娠30 d差异不显著，60、90 d、分娩当天显著低于空白处理组(图3A)，血清中IL-6含量在妊娠期30、60 d显著低于空白处理组，芪英汤处理组IL-6含量呈上升趋势，且分娩当天显著低于空白处理组 (图3B)，IL-1β含量在妊娠期30、90 d均显著低于空白处理组，分娩当天差异不显著，低于空白处理组(图3C)。不同阶段妊娠母猪血清中，芪英汤处理组在整个妊娠周期母猪血清中的IgA含量呈下降趋势，分娩当天血清中IgA含量显著低于空白处理组(图3D)。芪英汤处理组与空白处理组血清中IgG含量均呈上升趋势，妊娠期30、60 d、分娩当天血清中IgG含量显著低于空白对照组(图3E)。IgM含量与空白处理组对比，在妊娠期30、60 d差异显著，妊娠期90 d、分娩当天差异不显著，整体呈上升趋势(图3F)。

母猪血清中未检出病毒阳性，但血清中检测到病毒抗体，在正常免疫程序免疫后的病毒性疾病抗体水平表现为芪英汤处理后圆环病毒Ⅱ型抗体、伪狂犬病病毒GB 抗体、繁殖与呼吸综合征抗体水平均呈现阳性，同时其中出现伪狂犬病病毒GE抗体阳性(表4)。

表3 妊娠母猪分娩数据

2.3 子甘汤对断奶仔猪生长性能的影响

断奶仔猪断奶时体重和断奶30 d后体重均差异不显著(图4A、4B)，与空白处理组对比，断奶仔猪头均增重、头均采食量，子甘汤处理组分别下降6%、9%，差异不显著(图4C、D)。子甘汤处理组，料肉比显著低于空白处理组(图4E)，同时能够预防断奶仔猪腹泻的发生，腹泻率显著低于空白处理组(图4F)。

2.4 子甘汤对断奶仔猪血常规、免疫球蛋白IgA的影响

空白处理组断奶仔猪在断奶30 d白细胞数量超过最高限水平，存在炎症，子甘汤处理后，白细胞降到正常水平，炎症消失(图5A)。空白处理组和子甘汤处理组在断奶10、20 d血液中红细胞数量、血红蛋白数量、红细胞比积低于最低限，断奶30 d，子甘汤处理组恢复到正常水平(图5B～D)。血小板数量空白处理组与子甘汤处理组差异不显著(图5E)。另外断奶仔猪血清中IgA含量30 d子甘汤处理组显著高于空白处理组(图5F)。

3 讨 论

母猪繁殖性能和断奶仔猪腹泻严重影响着集约化养殖场利润，目前，我国母猪产仔存活数以及仔猪断奶后腹泻仍然是有待解决的问题。抗生素的药物残留量大，加上抗生素的禁用，动物营养学领域把特异性免疫刺激剂、天然植物以及植物提取物作为饲料添加剂研究热点。李雁冰研究发现饲喂不同纤维素、蛋白质能够降低断奶仔猪腹泻。在研究高温对母猪繁殖性能的研究中发现添加不同营养水平日粮能够缓解高温对母猪繁殖性能的影响。另外，陈敏霞等研究发现，在基础日粮中添加淀粉、油脂能提高妊娠母猪糖代谢以及母猪繁殖性能。中医辩证认为“气为血之帅，血为气之母”，二者相辅相成，妊娠母猪由于气血不足，阴阳失衡，免疫力低下，妊娠母猪自身气虚导致母猪血液不能运送至乳腺，影响乳腺的正常发育，最终导致产死胎、弱胎等繁殖性能问题。断奶仔猪脾胃虚弱，脾阳不振，致使脾胃运化失职，水谷不能腐熟，精微不能运化，清浊不分，致成泻症。芪英汤中药复方主要组成由黄芪、蒲公英、金银花、白术、知母、女贞子、甘草等中药，其中，黄芪、女贞子、甘草、白术为补中益气类中药，金银花、蒲公英、知母为清热解毒类中药，芪英汤中药复方具有补气固表、益气健脾、解毒清热功效。子甘汤主要成分有诃子、苦木、甘草等中药，具有涩肠止泻、清热解毒、健脾的功效。

A.不同阶段妊娠母猪血清中TNF-α含量; B.不同阶段妊娠母猪血清中IL-6含量；C.不同阶段妊娠母猪血清中IL-1β含量；D.不同阶段妊娠母猪血清中IgA含量; E.不同阶段妊娠母猪血清中IgG含量；F.不同阶段妊娠母猪血清中IgM含量A. TNF-αcontent in the serum of pregnant sows at different stages; B. IL-6 content in the serum of pregnant sows at different stages; C. IL-1β content in the serum of pregnant sows at different stages; D. IgA content in the serum of pregnant sows at different stages; E. IgG content in the serum of pregnant sows at different stages; F. IgM content in the serum of pregnant sows at different stages图3 妊娠母猪血清中炎性因子、免疫球蛋白含量Fig.3 Sow pregnancy inflammatory cytokines, immunoglobulin content

本试验以芪英汤、子甘汤分别作为母猪妊娠期、仔猪断奶期的饲料添加剂，在基础日粮中添加芪英汤粉剂具有降低炎性因子的作用，提高母猪的繁殖性能以及对病毒疾病性抗体具有一定的保护作用；子甘汤能降低仔猪腹泻率、料肉比，从而提高断奶仔猪的生长性能，同时在断奶后期增加IgA的含量提高仔猪免疫力水平。这与相关文献报道结果一致。

由于芪英汤和子甘汤都是复方制剂，成分多，对机体的作用靶点多，因此有关芪英汤降低炎性因子的机制以及子甘汤提高机体免疫力预防断奶仔猪腹泻和提高其生长性能的机制需要进一步研究。

4 结 论

芪英汤能够提高母猪繁殖性能，子甘汤能够提高断奶仔猪的生长性能，为生产应用提供了依据。

表4 病毒性疾病抗体检测结果

A.断奶仔猪初重; B.断奶仔猪末重；C.断奶仔猪头均增重;D. 断奶仔猪头均吃料；E.断奶仔猪料肉比；F.断奶仔猪腹泻率A. Weaned piglet initial weight; B. Weaned piglet weight; C. Weaned piglet’s average daily weight gain; D. Weaned piglet’s head feed; E. Weaned piglet’s feed and meat ratio; F. Weaned piglet’s diarrhea rate图4 断奶仔猪生长性能Fig.4 Growth performance of weaned piglets

A. 断奶仔猪血液中白细胞数量；B. 断奶仔猪血液中红细胞数量；C.断奶仔猪血液中血红蛋白数量;D. 断奶仔猪血液中红细胞比容；E.断奶仔猪血液中血小板数量；F.断奶仔猪血液中IgA的含量A. The number of WBC in the blood of weaned piglets; B. The number of RBC in the blood of weaned piglets; C. The number of HGB in the blood of weaned piglets; D. HTC in the blood of weaned piglets; E.PLT in the blood of weaned piglets;F. The content of IgA in the blood of weaned piglets图5 断奶仔猪血常规、IgAFig.5 Weaned piglet blood routine, IgA