不同蛋白补充水平对中国美利奴（新疆军垦型）细毛羊种公羊精液品质的影响

2022-07-06刘宏涛彭丙旭王晶晶白佳琛刘昱成郝冠英黄海珍倪建宏石国庆杨具田徐红伟高丹丹郭鹏辉万鹏程

黑龙江动物繁殖 2022年3期

刘宏涛，彭丙旭，王晶晶，白佳琛，刘昱成，郝冠英，黄海珍，倪建宏，石国庆，杨具田，蔡勇，徐红伟，高丹丹，郭鹏辉，曹忻*，万鹏程*

（1.西北民族大学生命科学与工程学院，兰州 730030；2.新疆农垦科学院畜牧兽医研究所，新疆石河子 832000；3.省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室，新疆石河子 832000；4.西北民族大学实验教学部，兰州 730030）

日粮营养水平是家畜充分发挥其繁殖性能的基本保障，其中蛋白质含量对雄性家畜的精子质量有一定的调节的作用，饲料中蛋白质含量偏低，会降低种公羊精液质量，进而影响配种效果。精液的主要组成成分为蛋白质，日粮中充足的蛋白质供应可维持雄性动物正常的生殖机能，尤其对于处在配种阶段的种公畜来说蛋白质的补充更为重要。在生产实践中，人工授精方法得以大规模应用，一只优秀种公羊的精液稀释后可配多只母羊，大幅度提升了优良种公羊的繁殖效率。很多养殖户凭经验，在配种前给种公羊额外添加鸡蛋或其他蛋白质饲料替代品，既不明确具体添加时间，也不明确添加量，无法保证补充效果。进入2022年3月份，每吨豆粕比年初涨价1 000元，直至3月9日，43%豆粕价格已经突破5 000元／t。如何充分利用蛋白质饲料，既能保证提升羊只繁殖性能和生产性能，又能有效控制养殖成本，对养殖户来说尤其重要。近年来许多学者对中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊进行了多方面研究，但有关种公羊配种前进行蛋白补充方面的研究并无报道。本试验通过探究不同蛋白补充水平对中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊精液品质的影响，明确配种前适宜的蛋白质补充量和补充时间，以期对中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊的合理高效利用提供参考。

1 材料与方法

1.1 试验动物

2021年11月份—2022年1月份，试验选择新疆农垦科学院种羊场的12只中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊进行试验。种公羊均为3周岁，体格健壮，膘情较好，体型外貌和生产性能符合种用标准，且体重和精液品质相近。

1.2 试验动物饲养管理

试验开始前对羊舍、食槽、水槽及过道等进行全面消毒，试验羊入舍前进行编号、防疫和驱虫。每只种公羊每日早晚共饲喂基础日粮2.5 kg，种公羊于每日早晨饲喂基础日粮前0.5 h饲喂豆粕。饲喂期间对羊舍进行打扫和消毒，保证羊舍卫生。

1.3 主要仪器及试剂

迈朗精子分析仪（型号为SJ-TMDI608）、迈朗一次性精子计数板（型号为ML-CASA 20），购自购自南宁松景天伦生物科技有限公司；水浴锅（型号为HWS24），购自上海恒科宇公司。以上仪器均来源于新疆农垦科学院省部共建绵羊遗传改良与健康养殖国家重点实验室。

1.4 试验设计及分组

将选用的12只中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊随机分为空白对照组、低蛋白补充组、中蛋白补充组、高蛋白补充组，以饲喂基础日粮（苜蓿干草＋棉籽壳）为空白对照组；在基础日粮基础上，以豆粕自配料作为蛋白补充饲料，测定所使用的基础日粮及补充的豆粕自配料粗蛋白含量，并根据各组补充蛋白水平计算需补充的豆粕饲喂量，见表1。

表1 不同蛋白补充水平饲喂方案（干物质基础）Tab.1 Feeding regimens with different protein supplementation levels（dry matter basis）

1.5 测定项目

试验持续86 d，其中预饲期为30 d，正试期为56 d。试验期间每个星期日上午采集精液，共采集8次。采集精液后立即测定射精量、精液密度、精子活率和精子活力指标。

射精量：用1 mL注射器采集精液，读取射精量数据。

精液密度、精子活率、精子活力测定使用麦朗精子分析仪进行检测，将采集的精液用生理盐水按照1∶40进行稀释，混匀后取10μL精液滴于迈朗一次性精子计数板内，置于迈朗精子分析仪载物台上，在10×10倍镜下检测。每份精液样品扫描10个视野，每个视野不少于200个精子。

1.6 数据的统计分析

采用SPSS 21.0软件进行组间差异性检验，检验方法采用单因素方差分析，数值表示为“平均值±标准误”。

2 结果与分析

2.1 射精量

见表2、图1。

结合表2和图1可知：种公羊射精量随饲喂天数增长呈现动态变化。从第28天起，各试验组种公羊射精量均高于空白对照组，从第35天起显著高于空白对照组（＜0.05）。3个试验组种公羊射精量均在第42天达到最高值，其中中蛋白补充组从第21天开始一直持续在较高水平，但在第42，49天低于高蛋白补充组。说明补充蛋白质可以显著提高种公羊射精量。

图1 不同蛋白质补充水平对中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊射精量的影响Fig.1 Effect of different protein supplementation levels on ejaculate volume of Chinese Merino（Xinjiang Junken type）fine hair sheep breed rams

表2 中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊射精量测定结果Tab.2 Measurement results of ejaculate volume of Chinese Merino sheep（Xinjiang Junken type）fine hair sheep breeding rams mL

2.2 精液密度

见表3、图2。

结合表3和图2可知：从第21天起，各试验组种公羊精液密度均高于空白对照组，第42天中蛋白补充组精液密度显著高于低蛋白补充组和空白对照组（＜0.05）；从第49天起，3个试验组精液密度均显著高于空白对照组组（＜0.05）。高蛋白补充组和中蛋白补充组均在第49天达到最高值，低蛋白补充组在第56天达到最高值，其中中蛋白补充组从第28天起均保持较高水平，在第49天开始，略低于高蛋白补充组。说明补充蛋白质可以显著提高种公羊精液密度。

表3 中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊精液密度测定结果Tab.3 Results of semen density determination of Chinese Merino sheep（Xinjiang Junken type）fine hair sheep breeding rams 1×108·mL-1

图2 不同蛋白质补充水平对中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊精液密度的影响Fig.2 Effect of different protein supplementation levels on semen density of fine hair rams of Chinese Merino sheep（Xinjiang Junken type）breed

2.3 精子活率

见表4、图3。

表4 中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊精子活率测定结果Tab.4 Results of sperm viability determination of Chinese Merino sheep（Xinjiang Junken type）fine hair ram breeders %

图3 不同蛋白质补充水平对中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊精子活率的影响Fig.3 Effect of different protein supplementation levels on sperm viability of fine hair rams of Chinese Merino sheep（Xinjiang Junken type）breed

结合表4和图3可知：低蛋白补充组种公羊精子活率在整个试验阶段均保持较高水平，始终高于空白对照组、高蛋白补充组和中蛋白补充组。低蛋白补充组种公羊精子活率仅在第42天显著高于空白对照组、高蛋白补充组和中蛋白补充组（＜0.05），其他时间组间均差异不显著（＞0.05）。中蛋白补充组和低蛋白补充组均于第42天达到最高值，高蛋白补充组于第49天达到最高值。说明补充蛋白质未显著影响精子活率，但低蛋白补充组精子活率水平最优。

2.4 精子活力

见表5、图4。

表5 中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊精子活力测定结果Tab.5 Results of sperm viability determination of Chinese Merino sheep（Xinjiang Junken type）fine hair ram breeders %

由表5结合图4可知：低蛋白补充种公羊精子活力在第42，49天均显著高于其他3组（＜0.05）。在整个试验期间，低蛋白补充组组种公羊精子活力均大于其他3组，并于第42天达到最高值，在第49天也维持在较高水平。说明补充蛋白未显著影响精子活力，但低蛋白补充组精子活力水平最优。

图4 不同蛋白补充水平对中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊精子活力的影响Fig.4 Effect of different protein supplementation levels on sperm viability of Chinese Merino（Xinjiang Junken type）fine hair sheep breeding rams

3 讨论

3.1 不同蛋白补充水平对射精量的影响

在本试验中，从第35天开始，3个试验组种公羊射精量均显著高于空白对照组种公羊（＜0.05）。说明补充蛋白质对中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊的射精量产生了显著影响。与任婉丽等研究报道的“饲喂不同蛋白质水平饲料后绒山羊种公羊射精量表现出显著差异”的结果一致。马呈图等研究发现，饲喂高蛋白饲料的公羊比饲喂低蛋白饲料的公羊射精量高约0.2 mL。在本试验中，在第35天以后，3个试验组种公羊射精量均显著高于空白对照组，与马呈图等的研究结果相近。与李静等所得“饲料能量水平保持在一定水平下，公羊粗蛋白摄入量每天减少约40 g时，射精量受影响”的结果也一致。在试验的前期阶段，4组种公羊的射精量均未表现出差异，分析其原因可能是由于精子在体内形成至排出体外所需时间较长所致。本试验结果表明，短时间内补充蛋白并不能显著影响到射精量，补饲天数至少要达到65 d以上（预饲期30 d＋正试期35 d）；此时3个试验组间射精量虽差异不显著，但低蛋白补充水平已经能达到提高射精量的营养需要。

3.2 不同蛋白补充水平对精液密度的影响

在本试验中，种公羊精液密度变化规律与射精量类似，从第28天以后，3个试验组种公羊精液密度均高于空白对照组，在第49，56天显著高于空白对照组（＜0.05）。由此可知，补充蛋白显著影响中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊的精液密度。任婉丽等报道，绒山羊种公羊在饲喂不同蛋白水平的饲料后，精液密度等精液品质指标有显著差异，这与本试验结果一致。雷耀庚等发现，提高饲料蛋白水平可增加辽宁绒山羊公羊精子密度，亦与本试验结果一致。本试验中，中蛋白补充水平组整体一直处于较高水平，直到第49天以后略低于高蛋白补充水平组。

3.3 不同蛋白补充水平对精子活率的影响

在本试验中，低蛋白补充组种公羊的精子活率在第42天显著高于其余3组种公羊（＜0.05），在其他阶段4组种公羊的精子活率并无显著差异（＞0.05）。由此可知，补充不同蛋白水平并未对中国美利奴羊（新疆军垦型）细毛羊种公羊的精子活率产生显著影响。在整个试验期间，3个试验组精子活率虽然无显著差异，但低蛋白补充组的精子活率始终在数值上高于其他3个组。这与刘素洁等报道的“日粮粗蛋白水平对种公鸡精液品质均没有显著影响”的结果一致。蛋白质缺乏会影响精子的发生和发育，而饲喂过量的蛋白质，机体内易产生过多的有机酸，会阻碍精子的形成发育，降低精子活率，因此蛋白质水平并非越高越好。本试验结果表明，低蛋白补充水平可以满足其精子发生和发育营养需要。

3.4 不同蛋白补充水平对精子活力的影响

在本试验中，低蛋白补充组种公羊的精子活力在第42天和第49天显著高于其他3组（＜0.05），在试验其他阶段4组种公羊的精子活力均无显著差异（＞0.05）。说明补充不同蛋白水平未对种公羊的精子活力产生显著影响。雷耀庚等研究发现，提高营养水平不会对精子活力造成影响，与本试验结果一致。杨文凯等报道，辽宁绒山羊公羊处于-15.8℃环境中，鲜精活力和鲜精活率大幅下降。董卓云报道，冷刺激可显著降低大鼠精子活力和精子活率，影响精子功能。在本试验中，种公羊的精子活率和精子活力在49～56 d均表现出下降趋势，分析原因可能是试验后期已经处于1月份，新疆地区气候寒冷，错过种公羊最佳配种时间，导致其精子活力下降。