慢性咳嗽儿童血清百日咳抗体水平的分析

吴丹遐，李岚，万彩红，王文杏，邱在军，陈强

(1.江西省儿童医院呼吸科，南昌 330006；2.上饶市人民医院儿科，上饶 334000)

百日咳是一种由百日咳鲍特菌感染引起的呼吸道传染病， 其发病率和病死率曾因百日咳疫苗的广泛覆盖在全球范围内大幅下降，但是近20 余年来在一些疫苗接种覆盖率高的国家陆续又发生了百日咳，该病在全球范围内再次备受关注[1]。 临床对百日咳缺乏较深入的认识， 接种过疫苗的患儿再次感染百日咳的临床表现常不典型， 一部分只表现为慢性咳嗽[2-3]。 目前国内对慢性咳嗽儿童百日咳毒素抗体水平调查的数据有限， 而疾控监测到的百日咳感染数据往往无法反应真实的流行情况，本研究拟检测血清PT-IgG 抗体，评估慢性咳嗽儿童百日咳感染状况， 协助临床工作者更全面地认识百日咳。

1 资料与方法

1.1 研究对象 本研究纳入江西省儿童医院呼吸科2019 年10 月至2020 年12 月诊治的年龄≤14岁的慢性咳嗽儿童。儿童慢性咳嗽定义[4]：病程> 4周，咳嗽是主要或唯一临床表现，胸部X 线片无明显异常。 所有研究对象均按照2013 年修订的中国儿童慢性咳嗽诊断与治疗指南推荐的诊断流程进行诊断，收集患儿的一般临床信息，包括年龄、咳嗽病史、咳嗽患者接触史和百白破疫苗接种史等；采集患儿血清， 离心分离取上层血清，-80 ℃保存备测， 用酶联免疫吸附试验检测血清百日咳毒素抗体水平。 本研究获得江西省儿童医院伦理委员会批准。

1.2 检测方法与结果判读 抽取静脉血2 mL，离心分离取上层血清，置于-80 ℃冰箱保存备测。 本研究采用ELISA 法检测血清PT-IgG 抗体，试剂盒购自欧蒙公司。

结果判读: PT-IgG ≥100 IU/mL 判定为近期接种疫苗或百日咳近期或现症感染，40＜PT-IgG＜100 IU/mL 判定为近期接种疫苗或可疑百日咳近期或现症感染，PT-IgG＜40 IU/mL 提示无百日咳近期或现症感染，PT-IgG＜5 IU/mL 表示百日咳毒素抗体水平在试剂盒检测限以下。 本研究认为PTIgG≥100 IU/mL 且1 年内未接种疫苗的病例为近期或现症百日咳感染[5]；40＜PT-IgG＜100 IU/mL 且1 年内未接种疫苗，考虑为可疑百日咳近期或现症感染。

1.3 统计学方法 采用SAS v.10 统计软件，疫苗接种率及血清PT-IgG 水平分布采用百分数表示，计数资料组间比较采用χ2检验，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 基本情况 230 例慢性咳嗽患儿中， 男性155例，女性75 例，男女比例约为2∶1，年龄1 月～13 岁零1 月，中位年龄1 岁零6 月。 3 月～1 岁患儿中1剂以上百白破疫苗接种率达68.9% (40/58) ，86.2%(131/152) 的1 岁以上患儿按计划免疫程序完成了百白破疫苗接种。 230 例患儿中，83.05%（191/230）的患儿在发病前一周与家庭内咳嗽患者有接触史。

2.2 百日咳抗体检测情况 患儿PT-IgG 水平分布情况见图1。 230 例慢性咳嗽患儿中，48.7%（112/230） 的患儿PT-IgG 抗体水平位于试剂盒检测限以上。 ＜3 月龄和3 月～1 岁患儿的可检测率最高，分别为55.0%（11/20）和58.6%(34/58)，1 岁～3 岁患儿可检测率为49.2%(29/59)，≥6 岁患儿的可检测率比3 岁～6 岁患儿的可检测率有所增加（44.8%vs 39.1%，χ2=0.274，P=0.6003）；＜3 月龄患儿中PTIgG≥100 IU/mL 的检出率最高，为20.0%（4/20），3月～1 岁和1 岁～3 岁患儿中PT-IgG≥100 IU/mL的检出率分别为10.3%（6/58） 和15.3%(9/59)，≥6岁患儿中PT-IgG≥100 IU/mL 的检出率较3 岁～6岁患儿有所增加(3.4%vs 1.6%，χ2=0.337，P=0.5614)。

图1 不同年龄段慢性咳嗽患儿血清中PT-IgG 分布

2.3 百日咳感染情况 表1 展示了不同年龄段慢性咳嗽患儿血清PT-IgG 检测水平。 本研究共纳入230 例慢性咳嗽患儿，有21 例PT-IgG 检测水平≥100 IU/mL， 当中有6 例存在近期或现症百日咳感染，4 例年龄＜3 月， 这部分患儿未接种过百白破疫苗， 病史资料提示在发病前一周有与家庭内咳嗽患者接触史；另2 例年龄分别为3 岁～6 岁和≥6岁，均在近1 年内无百白破疫苗接种史，无明确咳嗽患者接触史；有6 名3 月～1 岁和9 名1 岁～3 岁的患儿在1 年内均接种过百白破疫苗， 不能判断其是否为百日咳近期或现症感染。 此外， 共有23例患儿PT-IgG 水平为40 ～＜100 IU/mL， 其中14例患儿年龄在3 月～3 岁之间， 这部分患儿不能排除受疫苗接种影响； 有9 例患儿存在可疑近期或现症百日咳感染，其中3 例年龄＜3 月，6 例年龄在3 岁以上。

表1 不同年龄段慢性咳嗽患儿PT-IgG 水平的分布（n）

3 讨论

本研究纳入的230 例年龄≤14 岁的患儿均按照2013 年修订的《中国儿童慢性咳嗽诊断与治疗指南》推荐的诊断流程诊断为慢性咳嗽，这些患儿没有典型的阵发性痉挛性咳嗽或鸡鸣样回声，当中有6 例存在近期或现症百日咳感染(2.6%，6/230)，9 例为可疑近期或现症感染(3.9% ,9/230)。由于临床症状不典型及对百日咳感染缺乏较深入的认识，临床医生忽视了百日咳感染引起的慢性咳嗽，导致这些表现为慢性咳嗽的感染者成为百日咳的重要传染源。

临床医生主要根据百日咳的诊断标准识别百日咳， 而目前很多不同国家和地区的诊断标准中要求咳嗽持续时间≥2 周，并同时具备1 个以上典型临床表现，如阵发性咳嗽、咳嗽后呕吐或鸡鸣样回声等[1]。 本研究中6 例近期或现症百日咳感染患儿和均不具备典型临床表现，其中4 名患儿年龄＜3 月，另有2 例年龄分别为3 岁～6 岁和≥6 岁。 有研究提示0～3 月龄人群感染百日咳症状和体征往往不典型，反复咳嗽可能是其主要或唯一的症状[6]。实际上进行过疫苗接种的儿童感染百日咳临床表现常不典型[1]，本研究中2 例3 岁～6 岁和≥6 岁近期或现症感染百日咳的患儿均为疫苗接种过的儿童。 百日咳感染后的临床表现受到多种因素的影响，包括年龄、疫苗接种情况、百日咳感染史以及其他病原体合并感染情况等[7]。 为了帮助临床医生早期识别百日咳， 中华儿科学会感染学组结合国内情况，将患者的年龄、免疫状态和潜在合并感染因素考虑在内， 同时参考各国目前采用的百日咳诊断标准和GPI 建议，于近期发布了“中国儿童百日咳诊断及治疗建议”[8]。该建议不推荐单次ELISA法检测PT-IgG 用于诊断0～3 月龄百日咳感染人群，但本研究结果显示＜3 月龄患儿PT-IgG 抗体的可检测率和PT-IgG≥100 IU/mL 的检出率最高。有研究表明，不论是单份血清，还是双份血清（急性期和恢复期）， 采用ELISA 检测百日咳患者PTIgG 的敏感度均为92.2%[9]。 理论上本研究中＜3 月龄婴儿百日咳抗体升高的可能主要来自母体抗体，但有研究表明，疫苗接种后母传抗体消减的半衰期仅6 周，0～3 月龄人群得到母传抗体保护的时间窗极短[10-11]。

百日咳是一种传染性极强呼吸道传染病，主要依据临床病状、 流行病学资料和病原学检查进行诊断。 中国儿童慢性咳嗽诊断与治疗指南将儿童慢性咳嗽按病因分为特异性咳嗽和非特异性咳嗽， 而百日咳杆菌感染可能仅表现为慢性咳嗽[4]。本研究调查分析了慢性咳嗽儿童血清抗百日咳毒素抗体水平情况， 但是仅限于在一个单位开展了研究工作，结论不具有普适性，亟待开展多中心研究以进一步验证本研究的初步结果。 但是，本次研究提示慢性咳嗽患儿中有百日咳感染患者不易被识别出， 传统使用的百日咳诊断标准对目前临床实践的指导意义非常有限， 临床工作者应不满足于对典型百日咳临床表现的认识， 要重视慢性咳嗽患儿中有少数百日咳近期或现症感染患儿未被诊断。