60%乙·嗪·滴辛酯乳油的高效液相色谱分析

王利，李艳华，杜辉*

(1.南通江山农药化工股份有限公司，江苏 南通 226017；2.哈尔滨利民农化技术有限公司，黑龙江 哈尔滨 150025)

60%乙·嗪·滴辛酯乳油是由乙草胺、嗪草酮、2，4-滴异辛酯三种有效成分复配而成的旱田除草剂，在大豆、玉米播种后出苗前进行土壤封闭处理，可一次性防除大豆田、玉米田等旱田多种杂草，除草谱广、防效稳定[1]。

本文采用高效液相色谱法[2]，在同一色谱条件下，实现了乙草胺、嗪草酮、2，4-滴异辛酯的有效分离。该方法简便、准确，精密度和准确度均能达到定量分析的要求，适用于产品质量的检测分析。

1 实验部分

1.1 仪器和试剂 日本岛津LC-10A液相色谱仪(带紫外检测器)；色谱工作站；超声波清洗器；分析天平；微量注射器50μL；甲醇(色谱纯)；乙腈(色谱纯)；磷酸(色谱纯)(均为美国天地公司)；超纯水(电阻率：25℃，18.2MΩ·cm)；乙草胺标准品(质量分数99.5%)；嗪草酮标准品(质量分数99.5%)；2，4-滴异辛酯标准品(质量分数99.4%)，国家农药质量监督检验中心(沈阳)提供。

1.2 色谱条件 色谱柱：200mm×4.6mm(i.d.)不锈钢柱，内装C18填充物，粒径为5μm；流动相：A泵：乙腈，B泵：酸水(磷酸调pH值=2.5)；按时间程序运行：0～7min时，A：B=50：50，7～19min时，A：B=75：25， 19～20min时，A：B=85：15，35min停止。流速1.0mL/min；柱温：室温；检测波长：236nm；进样量5μL。保留时间： 嗪草酮5.2min；乙草胺13.4min；2，4-滴异辛酯30.4min。色谱图(图1、图2)。

图1 标样溶液高效液相色谱图

图2 60%乙·嗪·滴辛酯乳油高效液相色谱图

1.3 实验方法

1.3.1 标准溶液的配制 准确称取乙草胺标准品0.20g(精确至0.02mg)、嗪草酮标准品0.03g(精确至0.02mg)、2，4-滴异辛酯标准品0.09g(精确至0.02mg)于50mL容量瓶中，加入约45mL甲醇溶解，在超声波上脱气5min，使样品全部溶解，冷却至室温，定容，摇匀。

1.3.2 试样溶液的配制 准确称取试样0.5g(精确至0.02mg)于50mL容量瓶中，加入约45mL甲醇溶解，在超声波上脱气5min，使样品全部溶解，冷却至室温，定容，摇匀。

1.4 测定 在上述操作条件下，待仪器基线稳定后，连续注入数针标样溶液，待相邻2针响应值变化<1.5%后，按照标样溶液、试样溶液、试样溶液、标样溶液的顺序进行测定。

1.5 计算 乙草胺(或嗪草酮、2，4-滴异辛酯)质量分数按下式计算：

式中A1：标准品溶液中，乙草胺(或嗪草酮、2，4-滴异辛酯)峰面积的平均值；A2：试样溶液中，乙草胺(或嗪草酮、2，4-滴异辛酯)峰面积的平均值；m1：乙草胺(或嗪草酮、2，4-滴异辛酯)标准品称样量(g)；m2：试样的质量(g)；ω：标准品中乙草胺(或嗪草酮、2，4-滴异辛酯)的质量分数(%)。

2 结果与讨论

2.1 有效成分的特异性 液相色谱操作条件：

检测器：二极管阵列检测器；

色谱柱：250mm×4.6mm(i.d)不锈钢柱，内装C18填充物，粒径为5μm；

流动相：A泵：乙腈，B泵：酸水(磷酸调pH值=2.5)；按时间程序运行：0～7min时，A：B=50：50，7～19min时，A：B=75：25， 19～20min时，A：B=85：15，35min停止。

称取适量乙草胺、嗪草酮、2，4-滴异辛酯标准品置于一个50mL容量瓶中，取试样置于另一个50mL容量瓶中，使用甲醇溶解，过滤，作为特异性溶液。

待仪器稳定后进样，进行特异性测定。结果显示未检测到不纯物，峰纯度指数>0.99，表明特异性符合要求。

2.2 流动相的选择 以常规的甲醇+水为流动相，2，4-滴异辛酯出峰时间太慢，效率太低，最终确定乙腈+水为流动相，按时间程序运行，样品中各组分能很好分离，保留时间适中。

2.3 波长的选择 考查不同波长下乙草胺、嗪草酮和2，4-滴异辛酯的响应值，在236nm处各组分均有较大吸收，响应值比例适当且无杂质干扰，最终选择检测波长236nm。

2.4 方法线性相关性试验 准确配制5个不同浓度的乙·嗪·异辛酯标准溶液，分别进样分析，得到响应值(表1、表2、表3)。以质量浓度为横坐标，与其相应的峰面积为纵坐标，绘制线性关系曲线(图3、图4、图5)。得到乙草胺线性回归方程为y=0.793 7x+0.017 9，相关系数为0.999 7(n=5)、嗪草酮线性回归方程为y=5.089 5x-0.008 7，相关系数为0.999 9(n=5)、2，4-滴异辛酯线性回归方程为y=2.274 6x+0.064，相关系数为0.999 9(n=5)，说明在选定的条件下，各有效成分的响应值与其质量浓度有良好的线性相关性。

图3 乙草胺线性关系曲线图

图4 嗪草酮线性关系曲线

图5 2，4-滴异辛酯线性关系曲线

表1 乙草胺线性关系试验结果

表2 嗪草酮线性关系试验结果

表3 2，4-滴异辛酯线性关系试验结果

2.5 方法精密度的测定 在选定的色谱操作条件下，对同一样品重复测定5次，结果乙草胺、嗪草酮、2，4-滴异辛酯的标准偏差分别为0.085、0.032、0.077，变异系数分别为0.23%、0.63%、0.42%。表明该方法的精密度较高(表4)。

表4 精密度试验结果

2.6 方法准确度的测定[3]为了证明方法的准确度，做产品回收率试验。方法是在定量的60%乙·嗪·滴辛酯乳油中加入已知含量的乙草胺、嗪草酮和2，4-滴异辛酯标准品，分析其含量，计算回收率，结果(表5)。乙草胺的回收率在98.65%～99.97%之间、嗪草酮的回收率在99.06%～99.69%之间、2，4-滴异辛酯的回收率在98.83%～99.95%之间，说明该测定方法具有较好的准确度。

表5 60%乙·嗪·滴辛酯乳油准确度测定表

3 结论

试验结果表明，在本文建立的分析条件下，60%乙·嗪·滴辛酯乳油的各有效成分分离效果好，杂质干扰少，方法具有很好的精密度和准确度，分析速度较快、简便、准确，适合工业化生产控制分析，是较为理想的分析方法。