血清SAA、S100A12和ApoA1在早发型新生儿败血症诊断和随访中的临床价值*

符发仙，吉张艳，邝少丹

海南省东方市人民医院儿科，海南东方 572600

败血症在新生儿中发病率和病死率较高，也可能产生严重后果及长期影响，如神经发育不良、哮喘或过敏性疾病风险增加等[1]。由于血培养耗时较长且准确性较低，且目前还没有理想的实验室生物标志物进行败血症诊断，因此新生儿败血症的早期诊断具有较大的挑战性[2]。血清淀粉样蛋白(SAA)是一种由肝脏合成的高度保守的蛋白质，已被证实为一种炎性反应急性期产物。在血液循环中，SAA可取代载脂蛋白A1(ApoA1)与高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)结合，导致HDL-C分子的半衰期大大降低。此外，宿主对感染的反应与释放内源性损伤相关的分子模式(DAMPs)有关，包括S100蛋白家族成员。其中S100A12主要在粒细胞中表达，经病原体刺激释放可能导致全身炎症和血栓性并发症以及继发性器官衰竭。SAA、S100A12、ApoA1在许多急性和慢性疾病中都有报道，然而其作为早发型新生儿败血症的诊断或随访监测标志物的作用尚不清楚。因此，本研究旨在评价SAA、S100A12和ApoA1水平在早发型新生儿败血症诊断和随访监测中的价值。

1 资料与方法

1.1一般资料 本研究是一项前瞻性单中心研究，共纳入2018年3月至2021年3月在本院分娩的229例早产新生儿为研究对象，其中男141例，女88例；胎龄(34.00±1.16)周，出生体质量(2 714.97±599.36)g。纳入标准：具有感染高危因素或疑似细菌感染临床表现，出生后72 h内入院。其中113例新生儿在出生3 d内被诊断为早发型新生儿败血症(败血症组)，男67例，女46例；胎龄(34.09±1.13)周，出生体质量(2 751.55±520.83)g。败血症诊断标准参照《新生儿败血症诊断及治疗专家共识(2019年版)》[3]，所有患儿均有败血症临床表现，结合白细胞计数(WBC)、中性粒细胞百分比(NEUT%)、血细菌培养等明确诊断。其余116例纳入一般感染组。另外，纳入100例非感染早产新生儿为对照组，其中男68例，女32例；胎龄(34.26±1.09)周，出生体质量(2 830.00±499.53)g。对照组新生儿由出生后因感染因素以外的其他原因入院，包括暂时性呼吸急促、黄疸、慢性缺血性二尖瓣反流、胃食管反流等。排除围生期窒息、先天性畸形、有抗菌药物治疗史或手术史、年龄>3 d、有高脂血症或低血脂家族史的新生儿。用标准的实验室方法来鉴定培养基上生长的微生物。患儿在取得血液、尿液、脑脊液或其他培养物后，通过静脉注射抗菌药物进行治疗。试验得到受试者监护人完全知情的同意，并经本院伦理委员会批准。

1.2方法 在入院第0天(D0)时，所有新生儿都进行了静脉血及尿液取样分析和培养。常规血液检查包括全血细胞计数[WBC、血小板计数(PLT)、降钙素原(PCT)、NEUT%]、血气分析、血液化学成分(葡萄糖水平、肾脏和肝脏功能)、凝血试验和血清C反应蛋白(CRP)水平。在入院后D0、D1、D3、D7时，采集败血症患儿的静脉血样，采用分离胶促凝管取全血3 mL，在2 500 r/min分离血液10 min后，30 min内检测血清SAA、S100A12和ApoA1水平。应用酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒(上海通蔚生物公司)测定血清SAA、S100A12的水平。以水平轴为标准品浓度，垂直轴为吸光度值，用相关软件绘制标准曲线，计算待测指标水平，严格按照说明书指示进行操作，试验前所有试剂混合均匀。应用全自动生化仪测定ApoA1的水平，其原理为免疫透射比浊法，所用试剂盒购自上海科华生物工程股份有限公司。

2 结 果

2.13组临床资料的比较 对比3组新生儿临床资料，结果显示，败血症组产前发热比例和胎膜早破比例均高于对照组和一般感染组，且住院时间更长(P<0.05)；其余指标在3组间比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表1。

表1 临床资料在3组新生儿间的比较

2.23组新生儿血清SAA、S100A12、Apo-A1水平比较 与对照组相比，一般感染组和败血症组患儿血清SAA、S100A12水平升高，同时血清ApoA1水平降低(P<0.05)；败血症组患儿血清SAA、S100A12水平高于一般感染组患儿，血清ApoA1水平则低于一般感染组患儿(P<0.05)。见表2。

表2 3组新生儿入院时血清SAA、S100A12、ApoA1水平比较

2.33组感染指标异常情况比较 与对照组相比，一般感染组和败血症组患儿的WBC、PLT、PCT、NEUT%、CRP指标异常率均升高(P<0.05)，然而一般感染组和败血症组患儿上述感染指标异常率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。见表3。

表3 3组新生儿感染指标异常情况比较[n(%)]

2.4血清SAA、S100A12及ApoA1水平对早发型新生儿败血症的诊断价值 经ROC曲线分析，血清SAA、S100A12、ApoA1水平对于早发型新生儿败血症诊断和鉴别诊断均有一定的价值，其中SAA和S100A12诊断和鉴别诊断早发型新生儿败血症的曲线下面积(AUC)均大于0.7，说明诊断效能良好；而ApoA1的AUC均小于0.7，提示诊断效能一般。见表4、5。

表4 血清SAA、S100A12及ApoA1水平对早发型新生儿败血症的诊断价值分析

表5 血清SAA、S100A12及ApoA1水平对早发型新生儿败血症的鉴别诊断价值分析

2.5早发型新生儿败血症患儿血清SAA、S100A12及ApoA1水平动态变化 随访D0、D1、D3、D7各指标的水平变化，结果显示，发生早发型新生儿败血症患儿血清SAA、S100A12水平都有不同程度升高，同时血清ApoA1水平则不同程度降低，但随着治疗的进行，血清SAA、S100A12水平逐渐降低，同时血清ApoA1水平则逐渐升高。见表6。

表6 早发型新生儿败血症患儿血清SAA、S100A12及ApoA1水平动态变化情况

3 讨 论

新生儿败血症是威胁新生儿生命的重大疾病，近期发布的《新生儿败血症诊断及治疗专家共识(2019年版)》[3]是我国新生儿专家第三次针对新生儿败血症制定的专家共识。共识的颁布为新生儿败血症诊断和治疗提供了可靠依据。血细菌培养仍是诊断败血症的金标准，然而血培养需要24～48 h才可得到阳性结果。另外，由于新生儿采血量不足、采血前多已应用抗菌药物治疗等原因，细菌培养阳性率明显降低。近年来，许多临床检测指标(如细胞因子、细胞表面抗原等)已逐渐应用于新生儿败血症的早期诊断。

SAA是一种非特异性急性时相反应蛋白，属于载脂蛋白家族。生理情况下，人体血液中SAA水平极低，仅为2.33 μg/mL，在炎症及组织损伤时，SAA可迅速增加，在8～12 h达峰值，可升高至最初浓度的100～1 000倍，但由于SAA半衰期极短，当刺激因素消退后，可在肝脏及肾脏中迅速代谢而使血清水平降至正常[4]。SAA的降解产物能以淀粉样蛋白A(AA)原纤维的方式沉积在不同的器官中，在慢性炎症性疾病中会导致严重的并发症。SAA水平是反映感染性疾病早期炎症程度的敏感指标，因此有助于炎症诊断。目前已有多项研究表明，SAA可作为新生儿败血症早期诊断的良好指标[4-6]。DENG等[7]研究结果显示，SAA与CRP、PCT联合应用诊断新生儿败血症的准确率可以从单独应用SAA的72%～76%提高到82%～85%。以上研究表明，SAA与CRP、PCT等指标联合后，诊断阳性率明显提高，这些指标是新生儿败血症早期诊断的可靠指标。

S100A12属于S100蛋白家族的成员之一。S100A12基因定位于人染色体1q21，DNA全长1 895 kb，其编码的蛋白S100A12相对分子质量为10 575，由92个氨基酸组成[3]。S100A12表达于中性粒细胞，在淋巴细胞、单核细胞中低表达。S100A12可参与中性粒细胞的钙调节作用以及花生四烯酸代谢作用[8]。S100A12的功能尚不完全明确，有证据表明其与中性粒细胞和红细胞功能相关，可能与抗微生物功能及产生凋亡因子有关[9-10]。EBIHARA等[11]证实，S100A12水平在川崎病急性期高表达，应用丙种球蛋白治疗24 h后，S100A12水平明显下降并在1个月内恢复正常水平。FOELL等[12]研究表明，S100A12在炎症性滑膜组织中高表达，并推测其与类风湿性关节炎的活动程度有关，因此S100A12蛋白可作为类风湿性关节炎的血清学指标。KAISER等[13]发现，检测粪便中性粒细胞分泌的S100A12蛋白有助于鉴别诊断炎症性肠病和肠易激综合征，S100A12蛋白的水平可作为监测炎症性肠病活动的非侵入性指标。由于S100A12是一种具有促进炎性反应的钙结合蛋白，其主要作用是使血管内皮细胞黏附分子表达上调、激活炎症细胞、化学趋化和抗微生物作用，因此可作为炎症性疾病的诊断指标。本研究分析了S100A12在早发型新生儿败血症诊断中的价值，结果表明，S100A12诊断早发型新生儿败血症的价值较高。

载脂蛋白是血浆脂蛋白中的蛋白质部分，能够结合和运输血脂到机体各组织进行代谢。ApoA1由肝脏和小肠合成，是组织中含量最高的载脂蛋白，其功能主要是组成高密度脂蛋白(HDL)并维持其结构的稳定性和完整性，激活卵磷脂胆固醇脂酰转移酶催化胆固醇酯化，另外，ApoA1还可作为HDL受体的配体。ApoA1可反映HDL水平，已知冠心病[14]、脑血管疾病[15]患者ApoA1水平偏低，未控制的糖尿病[16]、慢性肝病[17]、慢性肾功能衰竭[18]等均可引起ApoA1水平降低。

本研究通过对比一般感染组、败血症组和对照组患儿的临床指标发现，与对照组相比，一般感染组和败血症组患儿感染指标，包括WBC、PLT、PCT、NEUT%、CRP的异常率均升高(P<0.05)，然而一般感染组和败血症组患儿上述感染指标异常率比较，差异无统计学意义(P>0.05)。说明只检测常规生化指标可能对于新生儿败血症的鉴别准确性较低。而血清SAA、S100A12水平则对于早发型新生儿败血症的诊断和鉴别诊断则都具有较高的价值，AUC>0.7。为进一步探究SAA、S100A12及ApoA1水平在诊断早发型新生儿败血症和鉴别诊断中的临床价值，本研究分别检测了D0、D1、D3、D7时血清SAA、S100A12及ApoA1水平变化，发现SAA、S100A12及ApoA1随着时间的迁移，各指标水平均有不同程度的动态变化，提示在发病早期及时检测血清SAA、S100A12、ApoA1水平有助于临床诊断和治疗。

综上所述，早发型新生儿败血症患儿普遍存在血清SAA、S100A12水平升高和ApoA1水平降低情况，检测这3项指标有望为临床诊断提供一定的帮助。