活动期慢性化脓性中耳炎病原菌分布及药物敏感性分析

邓华，祝晓宇，孙川惠，杨莎莎，曹庆新，赵成彦，周艳，任佳丽

贵州中医药大学第一附属医院耳鼻咽喉科，贵州贵阳 550001

慢性化脓性中耳炎是耳鼻咽喉科的常见疾病，病程长， 容易反复感染， 甚至引起严重的颅内并发症。慢性化脓性中耳炎可以分为静止期、活动期[1]，活动期慢性化脓性中耳炎需要积极采取抗感染治疗，随着临床上抗菌药物的广泛运用， 复杂多样的病原菌对药物的敏感性表现出明显差异，因此，分析活动期慢性化脓性中耳炎的病原菌分布及药物敏感情况，对于临床合理使用抗菌药物具有重要意义。回顾性收集2019 年8 月—2021 年5 月在该院住院治疗的64 例具有病原学检查结果的活动期慢性化脓性中耳炎患者的临床资料， 分析其病原菌分布及药敏试验结果，现报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

回顾分析在该院住院治疗确诊为活动期慢性化脓性中耳炎的患者64 例临床资料。其中男24 例，女40 例；年龄 9～82 岁，平均（50.59±17.83）岁；其中左耳 36 例，右耳 24 例，双耳 4 例；病程 2～60 年，平均（15.02±11.55）年。 所有入选患者在采集病原学标本前48 h 未使用任何抗菌药物。 该研究经贵州中医药大学第一附属医院伦理委员会审查通过 （伦理审查批件号：K2021-012）。

1.2 方法

1.2.1 病原学标本采集 75%乙醇棉球消毒患耳耳郭及外耳道口，在耳内镜直视下，用0.9%氯化钠注射液浸润的灭菌拭子经外耳道口伸入患耳外耳道深部，沾取外耳道深部的分泌物，随后将已经取样的拭子置入灭菌试管妥善封存，并立即送检。

1.2.2 病原菌鉴定及药敏试验 严格按照《全国临床检验操作规程》[2]进行外耳道分泌物标本的接种培养，菌株鉴定分型采用全自动微生物分析系统（法国生物梅里埃公司），纸片法进行病原菌药物敏感性试验， 药敏试验结果的判读参照美国临床实验室标准化委员会（NCCLS）药敏试验判断标准[3]。质控菌株为金黄色葡萄球菌ATCC25923、表皮葡萄球菌ATCC12453、大肠埃希菌ATCC25922、铜绿假单胞菌ATCC27853。

1.3 统计方法

采用R 统计学软件进行数据分析，采用描述性统计处理。

2 结果

2.1 病原菌种类及构成比

64 例（68 耳）患者共68 份患耳外耳道分泌物标本进行病原菌培养，有64 份分泌物标本培养出病原菌，病原菌检出率为94.12%。 64 例患者经病原学检查发现复合感染病例有7 例， 其中5 例患者分泌物标本同时检出2 种病原菌，2 例患者分泌物标本同时检出3 种病原菌。 送检的分泌物标本检出病原菌共计73 株，其中革兰阳性菌 39 株（占53.40%），革兰阴性菌 27 株（占 37.00%），真菌 7 株（占 9.60%）。革兰阳性菌主要为金黄色葡萄球菌， 其次为表皮葡萄球菌、 溶血葡萄球菌。 革兰阴性菌主要为变形杆菌、大肠埃希菌。 真菌主要是酿酒酵母菌、光滑念珠菌。 见表 1。

表1 病原菌分布及构成比Table 1 Distribution and composition ratio of pathogens

2.2 革兰阳性菌药敏试验分析

该组病例检出的革兰阳性菌菌株对红霉素、青霉素、克林霉素均耐药，对万古霉素、利福平、呋喃妥因的药物敏感性较高。 其中金黄色葡萄球菌对红霉素耐药率达90.9%，对青霉素耐药率为81.8%。 金黄色葡萄球菌对苯唑西林、万古霉素、利福平均敏感，对复方磺胺、环丙沙星、呋喃妥因的敏感性较高。表皮葡萄球菌对青霉素耐药率高达100.0%，对苯唑西林、红霉素、克林霉素的耐药率达75.0%。表皮葡萄球菌对万古霉素、利福平、利奈唑烷、呋喃妥因的敏感性较高。 其他革兰阳性菌对红霉素的耐药率达到90.0%，对克林霉素耐药率为70.0%， 对青霉素的耐药率为75.0%。其他革兰阳性菌对万古霉素、利福平、庆大霉素、利奈唑烷、呋喃妥因的药物敏感性较高。 见表2。

表2 革兰阳性菌药物敏感性分析[n%]Table 2 Drug sensitivity analysis of gram-positive bacteria[n%]

2.3 革兰阴性菌药敏试验分析

该组病例检出的革兰阴性菌菌株对四环素、氨苄西林耐药率高，对阿米卡星、头孢他啶、亚胺培南的药物敏感性较高。 其中变形杆菌对四环素和多粘菌素的耐药率高达100.0%，对氨苄西林耐药率为87.5%。变形杆菌对阿米卡星、头孢他啶、氨曲南、美罗培南、头孢吡肟均敏感，对环丙沙星、左氧氟沙星、阿莫西林钠克拉维酸钾、派拉西林、头孢噻肟、亚胺培南的敏感性较高。 大肠埃希菌对四环素耐药率高达100.0%，对氨苄西林的耐药率达80.0%。大肠埃希菌对阿米卡星、亚胺培南敏感，对头孢他啶、氨曲南、头孢吡肟的敏感性较高。 其他革兰阴性菌对氨苄西林和美罗培南的耐药率达85.7%，对多粘菌素、阿莫西林钠克拉维酸钾、氯霉素的耐药率>60%。 其他革兰阴性菌对庆大霉素、左氧氟沙星、阿米卡星、头孢他啶、头孢吡肟、头孢噻肟、亚胺培南的药物敏感性较高。 见表 3。

表3 革兰阴性菌药物敏感性分析[n(%)]Table 3 Drug sensitivity analysis of gram-negative bacteria[n(%)]

2.4 真菌

该组病例检出的真菌对氟胞嘧啶、伏立康唑、两性霉素B、酮康唑、制霉菌素、氟康唑、咪康唑的药物敏感性较高。 酿酒酵母菌对米卡芬净的耐药率高达100.0%， 光滑念珠菌对特比萘芬的耐药率高达100.0%。 见表 4。

表4 真菌药物敏感性分析[n(%)]Table 4 Analysis of fungal drug sensitivity[n(%)]

3 讨论

耳科医生、 儿科医生和全科医生接诊的患者之中，慢性化脓性中耳炎是最常见的疾病之一[4]。 慢性化脓性中耳炎具有病程长， 病情容易反复发作等特点，影响患者生活质量，并造成听觉功能损害[5]，甚至会导致严重的颅内并发症，威胁患者生命[6]。 静止期慢性化脓性中耳炎一般病情稳定， 活动期慢性化脓性中耳炎有持续性流脓症状[1]。常见的致病微生物中，革兰阳性细菌和革兰阴性细菌都是导致中耳感染的病原菌[3，7]。近年来，在慢性化脓性中耳炎患者中耳分泌物培养中发现，真菌感染病例有逐渐增加的趋势，可能与抗菌药物的使用及患者所在地域有关[8]。文献报道国内病原菌检出率为（79.88±18.51）%，革兰阳性菌为 （57.58±7.81）%， 革兰阴性菌为 （37.39±4.38）%，致病菌以金葡菌、凝固酶阴性葡萄球菌、铜绿假单胞菌、变形杆菌为主，占比71%~75%[8]。 国外有研究表明， 慢性化脓性中耳炎的主要病原菌是革兰阴性菌，其中以铜绿假单胞菌、变形杆菌多见，其次是金黄色葡萄球菌[7，9]。 国内与国外的主要病原菌构成比有很大差异，考虑与地域、种族、抗菌药物使用等多方面因素有关。

该组研究发现，活动期慢性化脓性中耳炎外耳道分泌物标本检出的病原菌主要是革兰阳性菌（53.4%）， 与本地区和国内其他地区的其他研究结果一致[8-11]。 革兰阳性菌主要为金黄色葡萄球菌，其次为表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌。 该组研究革兰阴性菌检出率与国内其他报道有明显差异，易虹[12]、郝春艳等[13]报道检出的革兰阴性菌主要检出铜绿假单胞菌， 而该组研究中， 检出的革兰阴性菌（37.00%）主要为变形杆菌、大肠埃希菌，考虑与地域因素有关。真菌检出率为9.60%，考虑与抗菌药物使用及本地区潮湿温暖有关。 此外，慢性化脓性中耳炎可以是多种病原菌的复合感染，一方面耳内微生态环境的变化导致病原菌发生改变，另一方面是病原菌自身耐药性增强， 引起病原菌组成发生，在多因素的影响下，导致慢性化脓性中耳炎出现多种病原菌混合感染[14-15]，在该组研究也发现了部分病例存在复合感染的情况。

该组研究检出的革兰阳性菌对红霉素、青霉素、克林霉素均不敏感， 与国内其他地区报道革兰阳性菌耐药情况的结果一致[16-17]。 革兰阴性菌对四环素、氨苄西林耐药。该组病例检出的真菌对米卡芬净、特比萘芬耐药。 临床不宜将这些不敏感的抗菌药物作为治疗慢性化脓性中耳炎的首选。

该组研究发现， 革兰阳性菌对万古霉素、 利福平、呋喃妥因的药物敏感性较高。革兰阴性菌对阿米卡星、亚胺培南、头孢他啶药物敏感，与国外的研究接近[9]。该组病例检出的真菌对氟胞嘧啶、伏立康唑、两性霉素B、酮康唑、制霉菌素、氟康唑、咪康唑的药物均敏感。

综上所述，在临床治疗慢性化脓性中耳炎时，可以选用上述敏感的抗菌药物进行治疗。 在进行治疗之前， 务必采集病原学标本进行细菌培养及药敏试验，在治疗过程中，密切观察患者的病情变化，及时根据药敏试验结果合理选择抗菌药物。