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合苞橐吾的生药学研究

2022-06-13马超李琪陶梁春吕惠子

关键词:薄层叶柄粉末

马超, 李琪, 陶梁春, 吕惠子

(延边大学 药学院, 吉林 延吉 133002)

合苞橐吾(Ligulariaschmidtii(Maxim.) Makino)为菊科橐吾属多年生草本植物[1].研究显示,橐吾属植物的根、茎、叶、花具有散寒、润肺、解毒清热、活血化瘀、降血糖等功效[2-6],常用于治疗支气管炎、咳喘、肺结核、咯血等症[7-9].查阅文献显示,目前针对合苞橐吾的研究大多是针对其化学成分及活性成分进行研究的[10-16],而对其生药学方面的研究尚不完善.为此本文对合苞橐吾的性状、组织结构等进行了研究,以为合苞橐吾质量标准的制订提供基础数据.

1 实验仪器与材料

1.1 实验仪器

BDS400倒置生物显微镜,重庆奥特光学仪器有限公司; KQ5200型超声波清洗器,昆山市超声仪器有限公司; JYD-325B生物组织石蜡切片机,金华市宇典医疗器械厂; FA2004电子天平,上海良平仪器仪表有限公司; RRH-100万能高速粉碎机,上海缘沃工贸有限公司.

1.2 实验材料

硅胶GF254薄层板,烟台江友硅胶开发有限公司;水合氯醛、无水乙醇、95%乙醇、二甲苯、石油醚(沸程为60~90 ℃)、乙酸乙酯、浓硫酸(均为分析纯),辽宁泉瑞试剂有限公司;石蜡(批号为20130415),上海华灵康复器械厂;番红染料(CAS号为477-73-6,干燥失重≤5.0%)、固绿染料(CAS号为2353-45-9,干燥失重≤8.0%),上海化学试剂采购供应站;中性树胶,上海标本模型厂;中药筛(380 μm),杭州同祺仪器有限公司.

实验用药材均采自延边朝鲜族自治州的不同地区,并由延边大学药学院朴光春教授鉴定,标本号为ybyx2019053001-10Ly.合苞橐吾的采集信息见表1.

表1 采集的合苞橐吾的信息

2 实验方法与结果

由于中国食品药品检定研究院目前尚无合苞橐吾对照药材,故选取经专家鉴定的样品作为对照药材进行薄层色谱研究.对照药材由通化师范学院于俊林教授提供.

2.1 药材性状

对采集的10批合苞橐吾的性状(见图1)进行观察显示:叶呈黄绿色,叶片大多卷缩,质脆易破碎;叶表面粗糙,叶脉羽状;叶长15~30 cm,宽3~15 cm,基部边缘光滑略呈波浪状;叶柄呈类三角形,断面白色或淡黄棕色.合苞橐吾的上述性状与文献[3]的表述一致.

2.2 合苞橐吾的显微鉴别

2.2.1叶片上、下表皮的显微特征

显微镜下的叶片上、下表皮片(表面制片法[17]制作)如图2所示.由图可以看出:上、下表皮细胞形状均为不规则形,多波状弯曲;上下表皮均有气孔分布(下表皮相对较多),气孔类型为不定式;副卫细胞为3~5个;下表皮侧脉细胞呈类长方形,排列紧密.

图1 合苞橐吾的性状

图2 叶片上、下表皮显微特征(放大倍数为×10)

2.2.2叶片和叶柄横切面的显微特征

取新鲜幼嫩叶片和叶柄,用石蜡制片法[17]切片,用番红-固绿染色法染色,然后在显微镜下观察叶片和叶柄横切面的显微特征.

1)叶片横切面的显微特征.图3为合苞橐吾叶片横切面的显微特征图.由图可以看出:叶片的上、下各有1层表皮细胞,且排列整齐;韧皮部细胞排列整齐;木质部导管呈圆形;叶肉组织分化为栅栏组织和海绵组织,其中栅栏组织为1~2列,海绵组织为3~5列,且均排列疏松.

图3 叶片横切面特征(放大倍数为×40)

2)叶柄横切面的显微特征.图4为合苞橐吾叶柄横切面的显微特征图.由图可以看出:表皮细胞为1~2层;皮层细胞为3~6层;有多个维管束,大小不一,呈类三角形排列;髓部较发达;韧皮部细胞排列紧密;木质部呈半圆形.

图4 叶柄横切面特征(放大倍数为×40)

2.2.3合苞橐吾叶粉末的鉴别

取干燥叶片研磨成粉末,过中药筛(380 μm),水合氯醛装片,然后在显微镜下观察粉末的特征[17].

图5为合苞橐吾叶粉末的特征图.由图可以看出:木栓细胞(1)较多,且细胞壁增厚;纤维束(2)众多;气孔(5)类型为不定式;导管主要为螺纹和网纹导管(8);有少量腺鳞(7)、非腺毛(3)、淀粉粒(6)及黄色油状物(4).

图5 叶片粉末的特征图(放大倍数为×40)

2.3 合苞橐吾的薄层色谱

依据2020版《中华人民共和国药典:四部》中的通则0502项[18]对合苞橐吾的薄层色谱进行研究.

2.3.1供试品溶液的制备

取10批合苞橐吾药材粉末各0.2 g,然后分别加入石油醚20 mL;超声提取20 min,过滤;滤液浓缩后备用.

2.3.2对照药材溶液的制备

取合苞橐吾对照药材粉末0.2 g, 按2.3.1方法制备对照药材溶液,备用.

2.3.3点样、展开及显色

用毛细管分别吸取供试品溶液与对照品溶液,点于同一硅胶GF254薄层板上.以体积比为10∶3的石油醚-乙酸乙酯作为展开剂展开,再用体积分数为10%的硫酸-乙醇溶液作为显色剂进行显色.

图6为合苞橐吾薄层色谱图.由图可以看出: 在供试品色谱中,与对照药材色谱相应的位置上显示的是相同颜色的斑点,且重复性良好,未出现拖尾现象.图中4个点的Rf值分别为: 0.34(①)、 0.56(②)、 0.62(③)、 0.96(④).

图6 合苞橐吾的薄层色谱图

3 结论

合苞橐吾的生药学特性研究显示,其主要鉴别特征有:叶呈黄绿色,易破碎;叶柄呈类三角形,断面白色或淡黄棕色;气孔为不定式,纤维较多;在10批供试品的薄层色谱中,与对照药材色谱相应的位置上显示的是相同颜色的斑点.本文研究结果可为合苞橐吾的鉴定和质量评价提供科学依据.

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