尾侧同源盒转录因子2在胃粘膜肠上皮化生及肠型胃癌中的表达研究

张赟 陈祎 马亮 文建力 王剑 曹颖△

(1.贵州省人民医院病理科，贵州 贵阳 550002； 2.四川大学华西医院消化内科,四川 成都 610041)

胃癌(GC)是消化系统常见恶性肿瘤之一。临床采用Lauren分型方法将GC分为肠型、弥漫型、混合型和不确定型四种病理组织学类型，我国以肠型GC为主[1]。目前认为，肠型GC可能是通过慢性萎缩性胃炎、胃粘膜肠上皮化生(IM)、胃粘膜上皮异型增生等一系列前期病变构成的Correa氏级联反应发展而来[2]。异型增生是GC重要且明确的癌前病变，当胃粘膜上皮细胞发生异型增生后，表现出与GC相似细胞形态学及功能代谢学特征[3]；胃粘膜上皮细胞可通过异型增生进展为肠型GC[4]。尾侧同源盒转录因子2(CDX2)是维持肠道表型的重要转录因子[5]。有研究显示，CDX2 可能参与了 IM 的发生及肠型GC的发生发展[6]。本研究通过检测CDX2在IM及肠型GC组织中的表达，探索其在Correa氏级联进展中的可能作用，为肠型GC的发病机制提供有用的实验依据。

1 资料与方法

1.1临床患者及相关临床病理特征 选择我院2014年至2017年胃镜活检标本和手术切除的肠型GC根治术标本共67例。所有肠型GC患者术前均未接受放疗和化疗。复查HE切片后分为胃粘膜组、IM组、上皮异型增生组和肠型GC组。粘蛋白组织化学染色后将IM分为I、II和III型[7]；采用悉尼评分系统对IM及异型增生进行分级[8]。本研究经本医院伦理委员会批准。

1.2CDX2免疫组织化学染色及半定量分析 免疫组织化学染色采用Envision二步法，CDX2阳性定位于细胞核，结果判定方法如下：(1)阳性细胞数百分比评分，百分比≤5%计为0分，6%～25%计为1分，26%～50%计为2分，51%～75%计为3分，>75%计为4分；(2)染色强度评分，无色计为0分，淡黄色计为1分，棕黄色计为2分，棕褐色计为3分；(3)将阳性细胞数百分比评分×染色强度评分=总得分，总得分0～1定为阴性，2～3分定为弱阳性，4～8分定为中等阳性，9～12分定为强阳性；本研究将阴性和弱阳性表达定为低表达病例，中等阳性和强阳性定为高表达病例。

1.3统计学方法 采用SPSS 20.0软件分析数据，组间比较采用 Fisher精确检验，相关性分析采用Spearman相关性分析，P<0.05表示差异有统计学意义。

2 结 果

2.1CDX2在胃粘膜、IM、上皮异型增生和肠型GC组织中的表达 与胃粘膜组相比，IM组CDX2高表达病例百分率显著增高(P<0.01)；异型增生组CDX2高表达病例百分率低于IM组，但差异无统计学意义(P>0.05)；与IM组和异型增生组相比，肠型GC组CDX2高表达病例百分率均降低(P<0.01,P<0.05)。见表1。

表1 CDX2在胃粘膜组、IM组、异型增生组及肠型GC组中的表达[n(%)]

2.2CDX2表达与IM分型及分级、异型增生分级、肠型GC分化的相关性 相关性分析结果显示，CDX2表达与肠型GC癌细胞分化相关(Rho= 0.3491，P<0.01)，癌细胞的分化越低，CDX2表达也越低， CDX2的表达与IM分型及分级、异型增生分级均不相关。见表2。

表2 CDX2表达与IM分型及分级、异型增生分级以及肠型GC分化相关性研究[n(%)]

3 讨 论

CDX是一类在肠道细胞增殖、分化和发育等生理过程中发挥重要作用的转录因子，含有CDX1、CDX2 、CDX4 三种同源体。其中，CDX1 和CDX2在肠道上皮细胞的发育、分化以及肠道表型的维持中有重要意义，而CDX2更为重要。目前认为，IM主要由幽门螺杆菌(H.pylori)感染和CDX表达诱导。CDX2 被认为是胃 IM 发生发展的触发因子，过表达 CDX2 的转基因小鼠可引起了胃部广泛的 IM 的发生[9]。本文结果显示，绝大多数胃粘膜上皮细胞未见CDX2表达，67例中有4例胃粘膜上皮细胞呈现CDX1弱阳性表达；然而所有IM组均观察到CDX2阳性表达，且大多数呈中等阳性或强阳性表达，提示 IM 的发展中存在CDX2 基因的异位表达，CDX2在IM的形成中起到一定的作用。本文结果还显示，CDX2在IM组、异型增生组到肠型GC组中高表达病例百分率呈逐渐下降趋势；与IM组和异型增生组相比，肠型GC组CDX2表达显著降低。说明Correa氏级联反应中由IM向异型增生及肠型GC的发展过程中，CDX2可能作为肿瘤抑制基因参与了IM向肠型GC发生及发展。相关性研究结果显示，CDX2表达与肠型GC癌细胞分化相关，癌细胞分化越低，CDX2表达则越低，提示CDX2可能在肠型GC的发展过程中起到负向调节作用，CDX2可作为判断肠型GC恶性程度及预后判断的分子标志物。然而，本组研究数据显示CDX2表达与IM的分型分级、异型增生分级均不相关性。刘贵生等[10]通过免疫组化染色检测不同亚型 IM 中 CDX2 的表达结果却显示CDX2 在Ⅰ型、Ⅱ型、Ⅲ型IM 中表达率逐渐减低，其中Ⅲ型 IM 中 CDX2 的表达率明显低于Ⅰ型。他人流行病学研究[11]也显示，不完全性IM 进展为 GC 的速度快于完全性 IM，Ⅱ型和Ⅲ型 IM 发生肠型GC风险明显高于Ⅰ型 IM。因本研究病例数量偏少，在今后的研究中需要增加病例数量后进一步明确CDX2与IM分型分级及异型增生分级之间的关系。

综上，本研究结果提示CDX2蛋白可能参与了IM向肠型GC的恶性转化，在肠型GC发生发展中可能发挥了抑制作用，但确切机制尚需要进一步深入研究。