外周血微小核糖核酸-21、同型半胱氨酸水平变化与急性心肌梗死患者Gensini积分的关联性及临床意义

张桂花

河南省项城市第一人民医院检验科 466200

急性心肌梗死(AMI)是临床常见心脑血管疾病，在我国发生率、残死率均较高，具有发病急骤、进展迅速的特点，会严重影响患者生活质量[1]。临床多采用经皮冠状动脉介入术(PCI术)及溶栓治疗，但术后心血管不良事件(MACE)发生率较高，预后效果较差，是心血管疾病的重要致死原因[2]。因此，快速准确评估病情程度及预后效果是挽救生命、降低病死率的关键。近年来，生化指标检测在多种心血管疾病中应用广泛，其中微小核糖核酸-21(miR-21)属于小分子非编码RNA，在血液循环中稳定存在，其在心肌细胞中表达丰富，与心肌损伤、再灌注损伤等密切相关[3]。同型半胱氨酸(Hcy)属于血管内皮损伤标志物，其水平升高会增加氧化应激状态，并促进血小板聚集，导致动脉粥样硬化斑块的形成，是多种心血管疾病的危险因素[4]。本文选取我院AMI患者136例，旨在探讨外周血miR-21、Hcy水平与Gensini积分的关联性及临床意义。现报道如下。

1 资料和方法

1.1 一般资料 经我院医学伦理委员会批准，选取2019年6月—2020年6月我院AMI患者136例。患者均伴有持久性、突发性、剧烈性心前区、胸骨后压榨型疼痛；均发生室性心律失常、房室传导阻滞；均经冠状动脉造影检查≥1支冠脉闭塞；心肌损伤标志物水平升高；均经超声心动图、心电图等辅助检查确诊为AMI；患者或家属均签署知情同意书。排除其他心脏疾病，如原发性肺动脉高压、扩张型心肌病、肥厚性心肌病、原发性心脏瓣膜病；入院前进行溶栓、抗凝治疗或既往接受过PCI术；合并血液系统、免疫系统疾病、恶性肿瘤、急慢性感染疾病；合并肝、肾、肺等重要脏器功能障碍；伴有脑血管疾病；合并甲状腺功能亢进或严重结缔组织疾病。

1.2 方法 (1)外周血miR-21、Hcy水平测定：所有患者均于术前、术后3d采集外周血5ml，置于枸橼酸钠抗凝管中，以3 000r/min的速度离心10min，分离血清与血浆，均置于-80℃下保存待测，miR-21检测取400μl血浆，采用RNA提取液提取总miRNA，并逆转录为cDNA，采用实时荧光定量聚合酶链反应(PCR)扩增，然后用2-ΔΔCt方法计算miR-21相对表达量；Hcy检测取血清1ml，采用比色法测定，试剂盒购自山东博迈达生物科技有限公司[批准文号：鲁食药监械(准)字2012第2400312号]。(2)术前Gensini积分评估：给予所有患者冠状动脉造影术，评估冠脉狭窄程度，①基本评分：总分1～32分，分数越高，狭窄程度越严重，其中≤25%计1分，26%～50%计2分，51%～75%计4分，76%～90%计8分，91%～99%计16分，100%计32分。②评分系数：根据狭窄部位不同乘以不同系数(0.5～5)。Gensini评分=基本评分×评分系数。其中总分≤24分为轻度狭窄，25～49分为中度狭窄，≥50分为重度狭窄。(3)预后评估：所有患者均行经皮冠状动脉介入术(PCI术)，并给予阿司匹林+氯吡格雷双抗治疗；根据术后6个月内是否发生MACE(如恶性心律失常、复发性心绞痛再入院、心力衰竭、心源性死亡)分为预后不良组(n=27)与预后良好组(n=109)，统计两组一般资料，包括年龄、性别、合并症、体质量指数(BMI)、Killip分级、心率(HR)、收缩压(SBP)、病变支数、心肌损伤指标[肌酸激酶同工酶(CK-MB)、肌钙蛋白I(cTnI)]。

1.3 观察指标 (1)比较两组一般资料、外周血miR-21、Hcy水平及Gensini积分。(2)采用Pearson分析术前外周血miR-21、Hcy水平与Gensini积分的关联性。(3)采用Logistic分析AMI患者预后不良的影响因素。

2 结果

2.1 两组一般资料、外周血miR-21、Hcy水平及Gensini积分 两组年龄、性别、合并症、BMI、HR、SBP比较，差异无统计学意义(P>0.05)；不同预后AMI患者Killip分级、病变支数、cTnI、CK-MB、miR-21相对表达量、Hcy、Gensini积分比较，差异有统计学意义(P<0.05)。见表1。

表1 两组一般资料、外周血miR-21、Hcy水平及Gensini积分比较

2.2 术前外周血miR-21、Hcy水平与Gensini积分的关联性 经Pearson相关性分析，AMI患者术前外周血miR-21、Hcy水平与Gensini积分呈正相关(r1=0.621，P1=0.035；r2=0.547，P2=0.048)。

2.3 AMI患者预后不良影响因素 经Logistic回归分析显示，Killip分级、病变支数、术后3d cTnI、CK-MB、miR-21相对表达量、Hcy均为AMI患者预后不良的重要影响因素(P<0.05)。见表2。

表2 AMI患者预后不良影响因素

3 讨论

AMI发病机制为冠状动脉阻塞，导致心肌持续性缺血缺氧，引发心肌损伤坏死，且预后效果较差[5]。临床应积极采取措施准确评估病情及预后，为治疗方案的制定及调整提供指导意见。

近年来，随着临床检验技术的进步发展，基因分子、生化标志物的异常变化均能准确反映AMI病情，为临床诊断治疗提供新方向。心血管疾病中微小RNA研究普遍，在心肌细胞中表达明确，与再灌注损伤、心律失常、心肌肥厚等多种心脏疾病密切相关[6]。基于此，本文中对AMI患者miR-21水平进行检测，结果显示预后不良外周血miR-21相对表达量明显更高，且与Gensini积分相关，是发生MACE的重要影响因素。分析其原因为，miR-21属于跨膜蛋白基因，在进化上高度保守，参与心房颤动与纤维化的发生发展进程，机体发生AMI后，miR-21会富集于成纤维细胞，促进心血管系统的纤维化及AMI的进展[7]。在AMI早期，miR-21表达丰富可能通过促进炎症反应参与心肌损伤，与冠状动脉狭窄程度及Gensini积分密切相关[8]；而经PCI术治疗后，miR-21水平会有所降低，狭窄程度减小，但对于预后不良患者，miR-21仍参与冠状动脉粥样硬化进程，且会影响其稳定性，增加MACE发生风险。

另外，相关研究指出，Hcy水平与AMI患者心室重构严重程度密切相关，可辅助临床预测预后[9]。据此，本研究对AMI患者Hcy因子进行检测，不同预后Hcy水平具有一定差异，且与MACE的发生密切相关。其原因可能为以下几点：(1)Hcy水平升高会引起自由基的产生及炎症因子的释放，对心肌细胞具有一定损伤，导致心肌重塑，加速AMI的病情进展[10]；(2)Hcy会促进血管平滑肌细胞增殖，抑制血管内皮细胞分泌抗炎因子，并激活凝血因子Ⅳ的活性，促进血小板聚集，参与动脉粥样硬化发生发展；(3)Hcy水平升高会降低阿司匹林抗血小板聚集作用，增加再次血运重建风险。因此，Hcy可评估AMI患者预后的重要危险因素，具有一定检测价值。

综上所述，AMI患者外周血miR-21、Hcy水平异常升高，且与Gensini积分、预后效果密切相关，具有较高临床检测价值。