自身免疫性肝病抗体谱的检测及临床意义

王虹力

（凤城市中心医院检验科，辽宁 丹东 118100）

自身免疫性肝病（autoimmune liver disease，ALD）是因体内免疫功能紊乱引起的一组特殊类型的慢性肝病，包括自身免疫性肝炎（autoimmune hepatitis，AIH）、原发性胆汁性胆管炎（primary biliary cholangitis，PBC）、原发性硬化性胆管炎（primary sclerosing cholangitis，PSC）以及相互重叠的重叠综合征（overlap syndrome）。不同类型的自身免疫性肝病，其人口学特征、临床表现、肝脏的病理改变各有不同。该病具体的发病机制尚不明了，患者多伴有其他自身免疫性疾病，如糖尿病、桥本甲状腺炎等。AILD是肝脏免疫耐受机制失衡所致的肝细胞/胆管上皮细胞的慢性损伤性炎症，属于慢性肝病，即肝脏组织免疫应答、功能异常下自身免疫系统攻击所致。具有起病隐匿特点，患者一般有腹胀、乏力、食欲下降等症状，是肝硬化、肝功能障碍常见原因。临床工作中发现，此类疾病患者一般无特异性表现，所以单纯凭借症状特征无法有效诊断疾病[1]。另外，不同类型、病理特征自身免疫性肝病特点有所不同，抗体谱检测诊断具有较高价值。基于此，本文就我院2019年8月至2020年7月收治的自身免疫性肝病患者为例，研究抗体谱检测情况。

1 资料与方法

1.1 一般资料 研究对象选自2019年8月至2020年7月，均为自身免疫性肝病患者，符合《自身免疫性肝病基础与临床》判断依据。纳入标准：①＞18岁患者。②病历资料完整者。③患者经抗体谱检测。④参与者知情、具备配合能力。⑤伦理委员会批准。排除标准：①酒精肝等患者。②退出研究者。③精神疾病患者。④其他重大疾病患者。观察1组（50例）：男性30例、女性20例；患者年龄20～65岁，平均（45.50±6.50）岁。观察2组（50例）：男性32例、女性18例；患者年龄22～66岁，平均（46.50±6.20）岁。观察3组（50例）：男性30例、女性20例；患者年龄21～66岁，平均（46.60±6.60）岁。对照组（50例）：男性27例、女性23例；患者年龄23～65岁，平均（46.30±7.50）岁。4组性别分布、平均年龄接近，P＞0.05均衡具有可比性。

1.2 方法 研究所用试剂盒由欧盟医学诊断技术有限公司提供，整个检测过程严格按照抗体谱试剂盒完成。晨起空腹采集受检者静脉血（3 mL），真空采血管保存，离心3 000 r/min、时间为10 min，血清置于冰箱（-20 ℃）备用。间接免疫荧光法检测ANA、AMA、SMA抗体，抗原为HEp-2细胞基质、大鼠胃基质冰冻生物薄片，待检血清配比1∶100，基质置入温浴，时间为30 min，洗涤后放入羊抗人IgG，30 min后洗片、封片，荧光显微镜观察，组织/细胞内特异性黄绿色荧光即ANA/AMA阳性[2]。免疫印迹法检测SLA/LP、LKM-Ⅰ，LKM-1、SLA/LP抗原做包被，对5种AMA-M2亚型抗原包被，以1∶50配比待检血清，混合（30 μL）、稀释液（1.5 mL）观察膜反应，常温下持续振荡孵育（1 h），洗膜后滴入抗人IgG，常温下水平晃动（1 h），而后洗膜，进行显色，蒸馏水结束反应。比对标准对照条带图，特定区域条带着色、颜色清晰，即SLA/LP、LKM-Ⅰ阳性[3]。

1.3 观察指标 统计分析4组受检者血清ANA、AMA以及SMA滴度≥1/320、SLA/LP与 LKM-Ⅰ抗体测定测定结果。

1.4 统计学方法 基于SPSS 19.0版本软件建模，录入4组受试者观察指标数据。以[n（%）]描述血清ANA、AMA等检验结果阳性率，采用（χ2）值进行检验。P＜0.05情况下，数据比较存在显著性差异、具有统计学意义。

2 结果

2.1 组间血清ANA、AMA抗体测定分析 观察1组、观察2组、观察3组血清ANA阳性率高于对照组，有显著性差异，P＜0.05。观察1组血清ANA阳性率高于观察2组、观察3组，有显著性差异，P＜0.05。观察2组血清AMA阳性率高于观察1组、观察3组、对照组，有显著性差异，P＜0.05。见表1。

表1 组间血清ANA、AMA 抗体测定情况分析[n（%）]

2.2 SMA滴度≥1/320、SLA/LP 与LKM-Ⅰ抗体测定分析 观察1组受试者的SMA滴度≥1/320、SLA/LP与LKM-Ⅰ抗体阳性测定结明显高于观察2组、观察3组、对照组，有显著性差异，P＜0.05。见表2。

表2 组间SMA滴度≥1/320、SLA/LP与LKM-I抗体测定情况分析[n（%）]

3 讨论

近几年，自身免疫性肝病发生率一直呈上升趋势，对人们生命健康造成威胁。自身免疫性肝病根据组织病理学、免疫学划分包括多种病型，如AIH、PBC、PSC，需积极鉴别诊断、治疗，以促进患者预后[4]。本组疾病病因尚不完全明了，可能与各种因素，如感染、物理或化学因素，引起的免疫功能紊乱有关，明确的诱发因素是各种嗜肝病毒感染。病毒感染（如乙型肝炎病毒、丙型肝炎病毒、EB病毒、麻疹病毒等）在激发免疫反应方面的作用比较肯定。病毒抗原表位和某些肝脏抗原具有相同的决定簇，通过“分子模拟”而诱发交叉反应，进而导致自身免疫性肝病。如丙型肝炎病毒感染的部分患者血清中可检测到多种非特异性自身抗体，推测可能是丙型肝炎病毒的感染改变了肝细胞膜上的蛋白质成分所致[5]。自身免疫性肝病除了乏力、食欲下降、腹胀、肝区不适、皮肤巩膜黄染等共有的临床表现外，不同类型的疾病有其本身的特点。自身免疫性肝炎（AIH）的病变部位以肝细胞为主，以50岁左右的中年女性多见，其特征是血清转氨酶有不同程度升高，血清免疫球蛋白IgG（或γ-球蛋白）水平显著升高（＞20 g/L），血清抗核抗体、抗平滑肌抗体、抗肝肾微粒体I型抗体或抗肝细胞胞质I型抗体等自身抗体阳性。原发性胆汁性胆管炎（PBC）的病变部位以小叶间胆管和小胆管为主，以50岁以上的女性多见。临床上可有皮肤瘙痒、上眼内眦部出现黄色瘤，肝功能检查以肝内淤胆为特征，患者表现为总胆红素升高，直接胆红素升高超过间接胆红素，同时有碱性磷酸酶和谷氨酰转移酶显著升高。血清免疫球蛋白IgM显著升高，血清抗核抗体和抗平滑肌抗体阳性。原发性硬化性胆管炎（PSC）的病变部位以肝内大胆管为主，少数可波及到肝外胆管，以40岁左右中年男性居多，多数患者同时合并有溃疡性结肠炎。与原发性胆汁性胆管炎相比，原发性硬化性胆管炎的发病率更低，但临床表现和实验室检查二者相似，内镜下逆行性胆管造影或经皮经肝胆管造影有助于区别。肝组织遭受麻疹、乙肝等感染后，损害人体肝脏组织功能，发展后可致肝硬化、肝衰，增加患者知识风险[6]。结合临床经验，肝病患者普遍有特异性自身抗体，滴度水平较高，所以自身抗体谱检测可以有效鉴别诊断疾病类型[7]。血清AMA检测PBC的特异性高，SLA/LP对AIH诊断敏感度高，所以自身抗体谱检测尤为关键[8]。不同肝病患者的血清ANA水平各有差异，AIH影响最为明显。结合本文研究，观察1组血清ANA阳性率高，观察2组、观察3组血清ANA阳性率接近，对照组无ANA阳性，抗体高敏感性助于疾病筛查。血清AMA属特异性自身抗体，观察2组检测高表达，是PBC血清特征性自身抗体，是诊断PBC的敏感指标。PSC血清ANA阳性率方面不高，无血清AMA阳性[9]。SMA滴度≥1/320、SLA/LP、LKM-Ⅰ检测，无阳性病例[10]。为提升疾病检测准确率，需根据临床经验，需结合患者肝病史、临床影像报告综合判断[11-13]。相关研究指出，自身免疫性肝病抗体谱助于自身免疫性肝病早期诊断，在有效鉴别分型的基础上促进患者早期治疗和预后[14-17]。

本文结果：自身抗体谱检测筛查后，血清ANA阳性率方面，观察1组、观察2组、观察3组高于对照组，1组高于观察2组、观察3组，P＜0.05；血清AMA阳性率方面，观察2组高于1组、观察3组、对照组，P＜0.05；SMA滴度≥1/320、SLA/LP、LKM-Ⅰ抗体测定方面，观察1组明显高于观察2组、观察3组、对照组，P＜0.05。由此说明，自身抗体谱检测筛查肝脏疾病分型方面价值显著，可以先排除患病毒性肝病的可能，再选择合适的治疗用药，利于患者早期临床治疗和预后。

综上所述，患者基于饮食、遗传、工作与生活环境等因素影响，导致肝病发病率一直较高，临床需尽早诊断、治疗，以保障患者的健康、提升生活质量。自身免疫性肝病是自身免疫反应所致的肝胆系统损伤，是慢性、进展性疾病。由于疾病发病比较隐匿，无特异性表现，增加了早期诊断、鉴别诊断的难度，提高了疾病的误诊风险。自身抗体谱检测筛查肝脏疾病助于分型鉴别，利于早期治疗，提升患者预后。