文山三七的皂苷含量与商品规格划分的相关性研究

李秋叶，陈丽莎，张玉洁

（1.文山州食品药品检验研究院，云南 文山 663099；2.文山学院 文山三七研究院，云南 文山 663099）

三七为五加科植物三七Panax notoginseng（Burk.）F.H.Chen的干燥根和根茎，是我国传统的名贵中药材。“文山三七”作为国家地理标志产品受到了人们的广泛认可。《七十六种药材商品规格标准》中将三七划分为春三七和冬三七两种规格，并分别将这两种规格划分为13个等级[1]；刘大会等将三七药材按照不同部位和采收时间划分为主根（又分春七和冬七）、筋条和剪口4种规格，春七和冬七又按个头大小简化为20头、30头、40头、60头、80头、无数头和等外8个等级[2]；《中华人民共和国药典》里收载的三七为秋季花开前采挖，洗净，分开主根、支根及根茎，干燥。支根习称“筋条”，根茎习称“剪口”[3]；春三七为摘除花苔后采挖的三七，冬三七为留种后采挖的三七[4]；由此可见《中华人民共和国药典》里收载的三七为春三七。春三七在外观上饱满健壮，细纹紧实无裂纹内在坚实不空泡，质重；冬三七外观上干瘪瘦小，皱缩不饱满，内在稀疏松泡，质轻；结合文山本地区的实际种植采挖销售来看，主要是采挖春三七为主，冬三七仅是三七种植户需要留种才会延迟采挖的三七，产量较小， 所以在本地区的三七市场中，一般意义上的三七指的是春三七，本文所讨论的三七也仅限春三七。通过多次走访文山三七市场发现，市场中对三七的划分与相关标准中划分略有不同，例如存在不少标注为50头的三七；还有一部分三七的剪口和主根部分并没有分离开，这样显得三七个头更大，在当地俗称“戴帽三七”，与之相对应的只有主根部位的三七俗称“滑头三七”，相同头数时，在价格上带剪口的三七明显低于不带剪口的三七；另外不同头数规格的三七价格差异更是显著，甚至每斤相差数倍价格。鉴于此本研究选取了文山当地不同商品规格的三七，通过对其皂苷成分含量的分析，以对商品规格划分进行相关性讨论，为合理使用不同规格的三七提供一定的理论依据。

1 仪器与材料

1.1 仪器

高效液相色谱仪（U3000，赛默飞）、色谱柱（Waters C18，250 mm×4.6 mm，5 μm）、电子分析天平（BP211D，北京赛多利斯）、电热恒温水浴锅（HWS-24型，上海惠泰），电热恒温干燥箱（DHG-9101-2A，上海三发）。

1.2 材料

三七购于文山市三七国际交易市场，分别为不同商家随机购买，共9种规格，每种规格三七样品3批次，总计27批次；对照品人参皂苷Rg1（110703-201933，纯度93.4%，中国食品药品检定研究院）、人参皂苷Rb1（110704-202028，纯度93.1%，中国食品药品检定研究院）、三七皂苷R1（110745-201921，纯度90.4%，中国食品药品检定研究院）；乙腈、甲醇均为色谱纯，水为超纯水。

2 方法

2.1 对照品溶液的制备

精密称取人参皂苷Rg1、人参皂苷Rb1及三七皂苷R1对照品适量，加甲醇制成每1 mL含人参皂苷Rg10.4 mg、人参皂苷Rb10.4 mg、三七皂苷R10.1 mg的混合溶液，即得。

2.2 供试品溶液的制备

三七样品粉碎，精密称取粉末（过四号筛）约0.6 g，精密加入甲醇50 mL，称定重量，放置过夜，置80 ℃水浴上保持微沸2 h，放冷，称重，用甲醇补足减失量，摇匀，取续滤液，即得。[3]

2.3 色谱条件

采样Waters C18色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）；以乙腈为流动相A，以水为流动相B，梯度洗脱条件为：0～12 min，19% A，81% B ；12～60 min，19%～36% A，81%～64% B。检测波长为203 nm，流速1 mL/min，进样量10 μL。理论板数按三七皂苷R1峰计算应不低于4 000。

2.4 标准曲线的制作

精密称取三七皂苷R12.89 mg、人参皂苷Rg111.72 mg、人参皂苷Rb112.18 mg于25 mL容量瓶中，配置成对照品混合溶液，分别吸取对照品溶液2、5、10、15、20、25 μL注入液相色谱仪，记录色谱峰以进样x（μL）为横坐标，峰面积y为纵坐标，绘制标准曲线。

2.5 加样回收率试验

精密称定已知含量的同一批三七6份，每份约0.3 g，精密加入混合对照品溶液适量，分别照“2.2”项下方法操作，照“2.3”项下色谱条件进行试验，计算回收率。

2.6 样品测定

每组样品选取参照“2.2”方法制作样品溶液，参照“2.3”方法进行色谱测定，本次所检样品中，共9种规格，每种规格三七样品3批次，总计27批次。

3 结果

3.1 三种皂苷对照品

吸取“2.1”项下对照品溶液10 μL，按“2.3”项下色谱条件测定，结果表明三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1的分离度均较好，三种皂苷的HPLC色谱图见图1。

图1 三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1对照品的HPLC色谱图

3.2 标准曲线及线性关系

按“2.4”项下以进样量x（μL）为横坐标，峰面积y为纵坐标，绘制标准曲线，进行线性回归，得回归方程，结果表明三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1这3种皂苷成分线性关系良好，线性回归方程及线性关系见表1。

表1 三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1标准曲线及线性关系

3.3 加样回收率试验结果

按“2.5”项下测定加样回收率，三七皂苷R1的平均回收率为99.41%，RSD值为2.88%；人参皂苷Rg1的平均回收率为100.31%，RSD值为1.47%；人参皂苷Rg1的平均回收率为97.35%，RSD值为1.85%，表明该方法准确度较好，结果见表2。

表2 加样回收率

3.4 样品测定结果

本次所测样品中，商品规格为20头、30头、40头的三七，存在两种类型，分别为仅有主根部分的三七及主根和剪口两部分相连的三七，商品规格为50头、60头的三七，仅有主根部分。每种规格三七样品3个批次，总计27批次，经检测，27批次样品的总皂苷含量在5.73%～9.84%之间，均符合《中国药典》三七皂苷R1、人参皂苷Rg1和Rb1的总量不得少于5.0%的规定，其中20头主根和剪口两部分相连的三七总皂苷含量最高，3批次的平均值为9.33%，50头三七总皂苷含量最低，3批次的平均值为7.45%，其余商品规格的三七总皂苷含量介于这二者之间，其总皂苷含量与其商品规格无规律性的对应关系，结果见表3。

表3 皂苷含量测定

4 讨论

（1）在本地三七市场中普遍存在着仅有主根部分的三七及主根和剪口两部分相连的三七，在外观形态上前者更受消费者青睐，所以相同头数时，一般前者价格高于后者价格。本次分别测定了这两种类型的20头、30头、40头三七，结果显示，相同头数时，主根和剪口两部分相连的总皂苷含量高于仅有主根部分的三七，推测可能与剪口有关；相关前期研究证实三七的剪口部分皂苷含量高于主根部分[5-6]。

（2）传统市场分类按照1市斤三七含几头来划分的商品规格，头数越少价格越高，20头与60头三七相比，价格甚至相差数倍。

本文分别选取了仅有主根部分的20头、30头、40头、50头、60头三七进行总皂苷的含量测定，结果显示，40头平均皂苷含量最高，为8.45%，50头平均皂苷含量最低，为7.45%；同时还对价格最便宜的筋条进行了含量测定，平均皂苷含量为7.89%，其含量高于本次所检测的50头三七；另外早在1999年秦雪梅等[7]就曾用薄层鉴别的方法证实了仅用个头大小不能鉴别三七药材的优劣；本研究采用HPLC法证实了三七中的人参类皂苷含量与其商品规格无显著相关性。由此可以看出，人们普遍认为的三七个头越大质量越好以及筋条质量较差的说法并不可靠，就文山本地三七市场而言，三七总皂苷含量与其商品规格的划分并无明显相关性，对于消费者来说，没有必要盲目追求个头大的三七。