APP下载

延边猫泛白细胞减少症的实验室诊断与综合治疗

2022-05-18胡春意马浩原

吉林畜牧兽医 2022年4期
关键词:引物白细胞患病

胡春意,马浩原,高 旭

延边大学农学院,吉林延吉 133400

猫泛白细胞减少症也称猫瘟热,从20世纪30年代开始,欧美地区的研究学者发现了该种传染病,因对于病猫造成的急性、烈性的白细胞数下降为主要特征而命名为猫泛白细胞减少症。该病于1928年在法国首次被鉴定,1939年正式命名,Bilin等于1957年首次分离出该病毒。猫泛白细胞减少症是由猫细小病毒(FPV)引起的一种急性高度接触性传染病[1],病猫主要表现为机体内白细胞数量急剧减少,并在体内大量复制,特别是在有丝分裂活动频繁的细胞当中,如骨髓、淋巴组织和肠道隐窝细胞,对猫科动物的多器官多系统都造成了巨大伤害[2],并伴有发热、厌食、呕吐、腹泻、中性粒细胞减少和淋巴细胞减少等症状[3]。FPV主要侵害1岁龄以下的猫,尤其是3~6月龄的幼猫最容易感染。发病率较高,死亡率在25%~100%之间,呈世界流行。FPV的预防,目前所使用的弱毒疫苗注射、α干扰素、单抗和卵黄抗体等不失是有效的办法。FPV主要的传播途径有粪便、口腔、分泌物等,包括但不限于通过接触患猫的体液、粪便或其他污染物,或通过易感动物及跳蚤等传播。对于环境当中所存在的FPV,通常情况下使用稀释的漂白水来进行消毒可以有效抑制。

1 病例情况

2021年9月23日,延边朝鲜族自治州延吉市派斯特动物医院接诊一病例,患病猫品种为金渐层,名为球球,雌性,6月龄,体重1.5 kg,未接种疫苗。主诉该猫近两日出现精神萎靡,呕吐拉稀症状,今日发现粪便中带血,故立即送医。临床检查肛温40.5 ℃。肛门处毛发色黄、有异味及干涸粪便。

2 诊断方法

2.1 血常规检查

静脉采血,进行检查[4~5],血常规检测结果见表1。结果显示白细胞、粒细胞、红细胞总数、血小板计数等数值均有所降低,结果表明患病幼猫可能存在病毒感染,出血、脱水症状等情况。

表1 患病幼猫血常规检测结果

2.2 生化检查

静脉采血,进行生化检查[6],检查结果见表2,结果显示:白球比下降,引起原因可能为体内存在炎症,其他结果未见异常。

表2 患病幼猫生化检测结果

2.3 胶体金检测法

因患病幼猫有明显消化道疾病症状,白细胞下降,有明显猫瘟症状,故取肛拭子,用猫瘟热病毒检测卡(胶体金法)检测[7],检测板C杠呈红色、T杠也呈红色。综上结果表明,该患病幼猫为猫细小病毒感染。

2.4 PCR诊断

2.4.1 引物合成

参照GenBank中FPV基因序列(M38246),设计FPV VP2基因引物,片段大小为717bp:上游引物为:5′-CATGGCTTTAGATGATATTCATG-3′;下游引物为:5′-GCTGGTCTCATAATAGTAGCTTC-3′。

2.4.2 方法与结果

取肛拭子,用病毒基因组DNA提取试剂盒提取猫细小病毒DNA,进行PCR扩增,FPV VP2基因扩增反应体系为:DNA 模板 2 µL,dNTP 2 µL,10×Ex Taq Buffer2.5 µL,上游引物 1 µL,下游引物 1 µL,Ex Taq 0.5 µL,dd H2O 16 µL,总计 25 µL。

PCR程序反应体系为:95 ℃ 5 min;94 ℃ 30 s,55 ℃ 2 min,72 ℃ 2 min,30 个循环;72 ℃ 5 min。将PCR产物进行1%琼脂糖凝胶电泳[8],Marker为2 000 bp,FPV VP2基因扩增结果为扩增出与目的条带大小相符的片段,大小约为717 bp,故确定检测拭子中含猫细小病毒。

3 临床治疗

3.1 治疗方案

3.1.1 抗病毒,抑制体内增殖

皮下注射猫瘟单克隆抗体2 mL,每日1次;皮下注射重组猫ω干扰素90万IU。

3.1.2 抗炎杀菌,防止继发感染

皮下注射庆大霉素2万IU,每日1次;静脉注射0.9%氯化钠20 mL加入头孢曲松钠75 mg,每日1次。

3.1.3 补充能量、维持电解质平衡

静脉注射第一组:5%葡萄糖20 mL,加入ATP 0.2 mL、CoA 0.2 mL、维生素C 0.2 mL、复合维生素B 0.2 mL、肌苷0.2 mL,50%高糖1 mL,每日1次;第二组:乳酸林格氏液20 mL,每日一次。

3.1.4 止吐、止泻、止血

皮下注射止吐宁0.15 mL,每日1次;口服强力止泻片(碱式碳酸铋片)0.2 g,每日1次;静脉注射酚磺乙胺1.2 mL,每日2次。

3.1.5 控制发热

皮下注射巴比妥0.2 mL,每日1次。

3.2 治疗结果

本病例治疗全程为6 d,按照3.1所述的治疗方案,连续用药。9月23日,用药第1天,高温未退,精神萎靡,呕吐腹泻,粪便不成型且带血。连续用药至9月25日治疗第3天,患病幼猫精神状态稍有好转,粪便中仍带有血液,采取强制喂食,并未出现呕吐现象,情况稍有好转。9月26日治疗第4天,体温39.5 ℃,且全天并未出现体温升高现象,患病幼猫可自主进食,故停掉能量补充及控制发热药物,其余按治疗方案正常用药,情况已基本稳定,但仍要巩固治疗继续观察。9月27日治疗第5天,幼猫可排出成型粪便,自主进食且不出现呕吐、腹泻情况、精神状态良好,体温38.8 ℃,不再升高,继续按照治疗方案用药,进行最后一日的巩固治疗。9月28日治疗第6天,幼猫并未出现病情反复的情况,经FPV金标试纸检病毒已消失,恢复健康故办理出院。

4 案例总结

猫泛白细胞减少症是一种致死率较高的高度传染性疾病,主要通过粪便-口腔途径进行传播,包括但不限于通过接触患猫的体液、粪便或其他污染物,以及通过跳蚤等传播。FPV在环境当中具有高度的抗性,能够在60 ℃环境下生存30 min,且并不完全的丧失病毒的活性。在低温的条件下,FPV也能发挥其特定的感染性,并且在受到FPV感染的有机物当中至少能存活1年。FPV对于醇类、氯仿等有机溶剂都有一定的抵抗能力,但对于紫外线等物理措施能将其完全灭活。因此特别是幼猫需要定期疫苗接种,未接种的要避免接触易感环境及动物;主要表现症状呕吐、拉稀甚至便血,如初有上述症状,要立即就医;因FPV病毒检测卡可能有假阳性或假阴性,故本次诊断运用了PCR鉴定的方法,鉴定结果更加高效准确;本案例的治疗方法应用了对症治疗、抗病毒抗炎杀菌的方法,其中单抗和干扰素的应用也是治疗关键,本方案也是目前常用于猫泛白细胞减少症病毒感染的治疗方案。

猜你喜欢

引物白细胞患病
香合欢EST-SSR标记开发及种间通用性研究
心力衰竭患者白细胞介素6、CRP表达水平与预后的相关性探讨
血脂异常与高血压对糖尿病患病的交互作用分析
有关PCR扩增过程中的疑虑与剖析
白细胞降到多少应停止放疗
“PCR技术原理和应用”考点的复习建议
白细胞减少是免疫力降低了吗?
基于RPA技术检测向日葵茎溃疡病菌的方法、RPA引物及试剂盒
白细胞总是低是有病吗?
完形填空训练