子痫前期患者血清晚期氧化蛋白产物及髓过氧化物酶表达水平及其临床意义〔1〕

王硕石，钟梅，廖义鸿*

(1.深圳市人民医院，暨南大学第二临床医学院，南方科技大学第一附属医院，广东 深圳 518020；2.南方医科大学南方医院，广东 广州 510515)

子痫前期是产科常见的妊娠并发症，其主要表现为妊娠20周以后出现的高血压、蛋白尿等，病情严重时可以诱发心、脑、肾、胎盘等多脏器功能障碍，是目前围产期母胎死亡的主要原因之一[1-2]。多年来，各国科学家和医务工作者们对子痫前期的发病机制和防治方法进行了大量的临床和基础研究，但是尚无一个单一方法能够尽早预测子痫前期。因此，寻找分子标记物早期诊断子痫前期，对降低孕妇病死率、减少母胎不良结局有重要意义。氧化应激学说在子痫前期发病机制中占有一席之地[3]。晚期氧化蛋白产物(AOPP)是具有高度生物活性的氧化应激代谢产物，本课题组前期研究表明，AOPP在子痫前期患者的外周血及胎盘中高表达，说明AOPP从氧化应激的角度参与子痫前期的发病过程[4]。髓过氧化物酶(MPO)可以诱导产生活性氧(ROS)，促进脂质过氧化[5]。本研究通过检测子痫前期孕妇血清中AOPP和MPO表达水平，评估两因子对疾病的诊断价值，希望能够为临床诊治妊娠期高血压疾病(尤其是子痫前期)提供新思路和新方向。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年9月—2020年10月收治的50 例子痫前期孕妇，根据病情严重程度分为轻度子痫前期(MPE)组25 例和重度子痫前期(SPE)组25 例，选取同期产检的孕妇25 例为对照组。子痫前期的诊断依据教材妇产科学(第九版)标准[6]。排除标准：试管婴儿、双胎、各类慢性病(糖尿病、慢性高血压等)及系统性疾病(血液系统系统、消化系统、泌尿系统疾病等)。

1.2 方法

1.2.1 主要仪器及试剂

低温离心机(美国贝克曼库尔特有限公司)；-80 ℃低温冰箱(南京贝登医疗股份有限公司)；多功能酶标仪(上海闪谱生物科技有限公司)；MPO ELLSA试剂盒(碧云天生物科技有限公司)、AOPP检测试剂盒(南方医科大学免疫学教研室提供)。

1.2.2 酶联免疫吸附法检测

抽取5 mL肘静脉血于EDTA抗凝管中，3 000 r/min离心30 min，收集上清液，保存于-80 ℃低温冰箱中。酶联免疫吸附法(ELLSA)法检测各组血清MPO及AOPP的浓度。

1.3 统计学方法

2 结 果

2.1 一般资料比较

三组年龄、孕周、体质量指数(BMI)等一般资料比较，差异无统计学意义(P>0.05)；收缩压及舒张压比较，差异有统计学意义(P<0.05)(见表1)。

表1 三组一般资料比较

2.2 三组MPO及AOPP表达水平比较

SPE组和MPE组血清MPO，AOPP表达均高于对照组(P<0.05)，且SPE组高于MPE组，差异有统计学意义(P<0.05)(见表2)。

表2 三组MPO及AOPP水平比较

2.3 血清MPO及AOPP水平对子痫前期患者的诊断价值

ROC曲线显示，MPO和AOPP可作为诊断子痫前期患者的标志物，当MPO≥40.45 μg/L，AOPP≥52.35 μmol/L时，呈高特异度和敏感度。联合应用AOPP及MPO诊断价值优于单独应用AOPP或MPO诊断价值(见表3和图1)。

表3 血清MPO及AOPP对子痫前期患者的诊断价值

图1 血清MPO及AOPP诊断子痫前期的ROC曲线

3 讨 论

子痫前期是妊娠期高血压的一种类型，严重时多器官功能不同程度受损。《妇产科学》(人卫版)既往教材中将子痫前期分为轻度及重度；但是最新版(第9版)《妇产科学》将SPE认为是MPE逐步发展到严重状态[7]。在临床工作中，由于轻度子痫前期和重度子痫前期在治疗和终止妊娠的时机上仍有很大差别，我们依然将二者区别对待。子痫前期是孕妇特有的疾病，病因及发病机制不明，病情复杂，往往进展迅速，严重危及母胎的生命安全。目前没有先进的预测和诊治方法，如果病情持续加重，需终止妊娠，造成许多早产儿或者低体质量儿的出生，给家庭及社会造成各种负担。因此，早期预测和诊断子痫前期，制订合理且个体化的诊治方案，降低子痫前期对母胎的危害，有重要的社会意义。AOPP在1996年由法国学者Witko-Sarsat等[8]第一次在全世界报道。最近发现肥胖、高龄、糖尿病、代谢综合征、多囊卵巢综合征等有子痫前期高危因素妇女中普遍存在慢性AOPP高表达[9]。目前关于AOPP与子痫前期的研究不多，汪琳和王欣[10]研究发现，子痫前期患者的血浆AOPP水平显著升高，AOPP与24 h尿蛋白定量及血浆光抑素水平呈正相关，认为AOPP可能通过诱导单核细胞产生更多活性氧，加重慢性炎性反应过程，间接造成了肾脏功能的损伤。韩静等[11]认为，孕妇如果患有SPE合并胎儿宫内生长受限(FGR)，其血清中胱抑素C及AOPP表达水平显著高于正常孕妇，且母婴妊娠结局不良者的血清胱抑素C及AOPP表达水平显著高于预后良好者，说明子痫前期孕妇AOPP表达用于预测不良妊娠结局、指导诊疗方案、降低母婴近远期并发症有重要意义。本课题组近10年来一直在不断地深入研究AOPP参与子痫前期发病机制的过程，且前期研究已明确子痫前期孕妇的血浆及胎盘组织中AOPP明显高表达。本研究再次证实，AOPP在子痫前期患者血浆中的浓度明显高于正常对照组，且重度子痫前期组明显高于轻度子痫前期组，与前期研究结论一致[4]，说明AOPP不仅与子痫前期密切相关，而且与病情严重程度密切相关。本课题组进一步深入研究发现，AOPP可以下调滋养细胞增殖、侵袭和分化能力，并上调滋养细胞凋亡来干扰妊娠滋养细胞的生物学功能[12]；AOPP可能通过还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)通路介导了妊娠滋养细胞的凋亡[13]；AOPP通过上调活性氧簇的表达，加重生物体氧化应激状态[14]。研究发现[15]，除了氧化应激，AOPP还参与子痫前期血管内皮功能障碍等致病环节，它通过上调滋养细胞抗血管生成因子，参与髓过氧化物酶阻击病原侵入生物体。髓过氧化物酶本质是白细胞酶，隶属于过氧化物酶家族[16]。现有研究认为[17]，MPO作为介质可以促进多种氧化物的形成，对心血管系统产生损害。MPO可以修饰低密度脂蛋白并将其过氧化，形成氧化型低密度脂蛋白(OX-LDL)，OX-LDL被单核巨噬细胞侵噬后形成泡沫细胞；泡沫细胞大量聚集在血管内皮上，导致血液淤积、流速缓慢等一系列心血管事件的发生。黄伟聪和周晓梅[18]研究发现，MPO可以通过多种途径加速血管内皮细胞损伤，诱发调节炎性反应：首先，MPO与肌酸激酶结合后沉积于内皮细胞表面，随后进入胞质，下调缓激肽的表达和释放，抑制血管张力；其次，MPO诱导产生组织因子，从而使血管内皮细胞损伤甚至凋亡，而血管内皮损伤/凋亡恰恰是子痫前期发病的学说之一，结合本论文研究结果，MPO高表达于子痫前期患者血清中，且SPE组显著高于MPE组。因此可以认为MPO参与子痫前期的发病。

本研究发现子痫前期患者血清中AOPP和MPO的表达水平均高于同期正常产检的孕妇，而且两者均与子痫前期的严重程度密切相关，说明AOPP与MPO在诱导氧化应激及血管内皮损伤方面具有协同作用。血清AOPP和MPO检测简单易行。本研究进一步通过ROC曲线分析结果提示，AOPP和MPO可作为诊断子痫前期的生物学标记物，且建议两者联合应用，以取得更有效的诊断价值。因此，联合应用AOPP及MPO诊断子痫前期，可能会更早地发现和预测子痫前期，为改善母婴不良妊娠结局提供新的思路。子痫前期严重影响孕产妇及其胎儿/新生儿，尤其是当其进展到较为严重程度时，会引起多个器官功能的受累，甚至母婴死亡。