艾滋病初筛结果不准确的实验室原因和措施

林挺花 张成彬 邱品坤 黄铃铃

近年来，随着艾滋病患者的增多，艾滋病的危害逐渐成为我国一个严重而紧迫的公共卫生问题[1-2]。艾滋病病毒抗体检测不允许有任何差错，一旦检测结果的准确性稍有偏差，就会给受试者及其家属带来心理和精神上的伤害，后果不堪设想。为了及早发现，及时采取有效防控措施，艾滋病筛查实验室尤为重要，绝对不允许漏诊、误诊。因此，要做好艾滋病筛查实验室的质量控制，必须严格按照相关规定对实验室人员、设施、环境和设备进行质量控制[3-4]。艾滋病初筛实验室实施免费检测工作，2020年笔者所在中心自愿咨询检测450人次，高危监测494份，看守所在押人员艾滋病病毒抗体检测239份，梅毒检测944份，在一共2 127份检测结果当中，有120份检测结果不准确，为了更好了解艾滋病初筛结果不准确的实验室的影响因素和控制措施，本研究进行了总结分析，详细情况如下报道。

1 资料与方法

1.1 一般资料

2020年1—12月笔者所在中心自愿咨询检测450人次，当中，男有310例，女140例，年龄23～56岁，平均（38.31±5.21）岁。当中，高危监测494份，看守所在押人员艾滋病病毒抗体检测239份，梅毒检测944份，在一共2 127份检测结果当中，有120份检测结果不准确，对相关因素进行总结。

1.2 方法

1.2.1 器材 （1）一次性手套（PE手套或乳胶手套）；（2）一次性注射器（视采血量而定）；（3）一次性试管、塑料管（视采血量而定）；（4）抗凝剂（采血浆标本时使用）；（5）止血带；（6）碘酒；（7）棉签；（8）工作服；（9）试管架；（10）样品登记本、笔；（11）污物桶。

1.2.2 血液采集操作规程 （1）详细登记收样日期、样品编号、姓名、性别、年龄、采样日期、样品种类、检验项目，对于各地送检标本还必须登记送检单位。（2）带手套之前检查手套是否破损，如有破损则废弃，并更换合格的手套。戴好一次性手套，暴露被采者采血部位，在其近心端绑上止血带，用碘酒在采血部位皮肤进行消毒，使用后的棉签置于专用的污物桶中。（3）取出一次性注射器，检查包装，如有破损则废弃并更换合格的注射器。（4）采血，完成后用干净棉签压紧采血部位约2 min。（5）将血缓慢注入试管内，将注射器及废弃物置于专用的污物桶中，高压消毒后弃去。（6）在试管壁上注明姓名、编号、日期、检测项目。（7）采集完毕后，收拾好器材等，保持台面齐洁。

1.2.3 样品的运送 当样品从一个实验室转送到另外一个实验室时，必须注意以下几点：（1）样品必须是血清或血浆，一般情况下不用全血，以防溶血。（2）样品置于带盖帽且不易碎的试管中，再放入专门带盖的容器中进行运送。（3）如天气炎热或运送路途较远时，应将样品置于4℃以下运送。（4）运送样品的同时需附送检单。

1.2.4 样品的处理 （1）本实验室自采的样品应在室温下存放1 h后，再用1 500 r/min离心10 min，吸出上清备用。（2）样品如在几天内检测可放在2～8℃冰箱中；如需贮存，应进行分装，置于-20℃的低温冰箱内。冷冻的标本应待其完全融化后，充分摇匀，才能用于检测。（3）对于其他实验室送检的样品，严格核对送检标本和送检化验单，确认无误后进行样品登记，同时检查样品管是否破损、溢漏情况。（4）检查送检样品质量有无严重溶血、细菌污染、血脂过多等情况，如果有以上现象则需重新采血，以保证试验不受干扰。

1.3 统计学处理

采用SPSS 21.0软件统计检测结果不正确的影响因素，计数资料表示为（n，%），计量资料表示为（±s），分析原因，并根据相关因素提出相应的对策。

2 结果

在一共2 127份检测结果当中，有120份检测结果不准确，其中，血清样品采样和处理因素引起有42份，样品保存因素有38份，样品运送因素有10份，样品检测因素有10份，仪器设备因素有10份，其他因素有10份。见表1。

表1 检测样本不合理情况（n=120）

3 讨论

质量控制是指在每个实验过程中，为保证实验的正常进行而采取的各种必要措施[5-6]。为了确保艾滋病病毒抗体初筛检测结果的正确性和准确性，除了按照国家艾滋病检测工作标准建立合格的初筛实验室外，更重要的是要建立全面的质控体系。

通过艾滋病初筛工作，笔者深刻认识到两点，第一，需要加强思想政治工作，实施科学管理，充分调动职工的积极性，全面提高疾病预防检验工作水平。认真学习党的各项方针政策，树立和坚持正确的世界观、人生观、价值观[7]。积极参加中心的各项政治活动和业务学习，提高自身思想认识和服务技能，提高干部队伍素质。树立全心全意为人民服务的思想，想服务对象之所想，急服务对象之所急，围绕我中心改革发展大局，积极开展各项工作，认真完成了中心下达的各项工作任务。坚持以人为本，强化激励机制，是抓好管理促进工作的根本途径，人的因素是决定工作成败的关键，做好职工的思想工作，加强职工的素质教育和能力培养尤为重要[8]。在平常的工作当中，积极倡导和发扬团队协作精神，有工作任务大家一起上。在生活当中有什么困难我们主动帮助解决，让大家体现到一种大家庭的温暖。第二，做好疾病控制、突发公共卫生事件等应急采样及各项检测工作，为预防和控制重大传染病及加强公共卫生工作提供保证[9]。

本研究中艾滋病初筛实验室实施免费检测工作，在一共2 127份检测结果当中，有120份检测结果不准确，其中，血清样品采样和处理因素引起有42份，样品保存因素有38份，样品运送因素有10份，样品检测因素有10份，仪器设备因素有10份，其他因素有10份。

根据以上的初筛结果不准确的相关因素分析，需要加强实验室质量控制，强化实验室标准化建设。可从以下几个方面开展。

第一，严格按国家艾滋病检测规范要求建立符合条件的初筛实验室，按二级生物实验室（BSL-2）要求设置洁净区、半污染区和污染区[10]。

第二，建立全面、系统、规范的质量管理体系。严格按照国家艾滋病检测技术规范的要求，艾滋病筛查实验室由于自身的特殊性，要严格管理，严格要求。实验室工作人员必须具有高尚的职业道德和责任心，遵守保密制度。实验室工作人员上岗前，必须接受省级技术培训，并取得上岗证书。在工作中，要求每年接受一次省级再培训。实验室经理定期评估实验室检查员，包括准确性、效率、操作安全和职业道德[11]。

第三，加强生物安全管理。将生物安全管理纳入日常工作，检查人员要有安全防护意识，做好个人防护，所以所有操作都必须在生物安全柜中进行，必须严格执行各项标准操作规程，防止职业暴露。同时，加强对检查员操作技能的培训。实验室工作人员感染的风险很高，为确保实验室技术人员人身安全，始终重视实验室人员安全防护知识培训，督促严格落实人身安全防护措施，逐步提高实验室技术人员职业暴露防护意识[12]。

第四，要加大对实验设备的投入和加强设备维护，保持艾滋病抗体筛查实验室的质量管理，不仅要靠筛查实验室自身的努力，还需要卫生行政和宏观管理等相关制度的支持和协调。加强艾滋病抗体筛查实验室的质量管理，不仅要靠筛查实验室自身的努力，还需要卫生行政和宏观管理等相关制度的支持和协调，确保提高检测速度和准确性。除了加大实验室硬件设施投入外，实验室制定完善仪器设备年度维修计划，定期维护和校准，确保仪器设备的适用性、准确性和稳定性，最大限度减少系统误差，使仪器运行在最佳工作状态，为保证试验结果的准确性提供了有力的保证[13]。

第五，血清样本的采集和处理。对于艾滋病和艾滋病病毒感染的诊断，血清样本主要用于检测艾滋病病毒抗体。可用一次性注射器（或真空取样）无菌抽取静脉血5～10 mL（根据需要确定取样量），室温自然放置1 h和2 h，凝血、凝块收缩后离心15 min，抽取血清进行艾滋病病毒抗体检测。如果不能在同一天进行检测，血清样本应以2～8℃的温度保存在冰箱中[14]。也可以用快速检测试剂检测艾滋病病毒抗体：1岁以上的成人和儿童可以选择中指、无名指或食指，1岁及以下的儿童可以从脚后跟采血。用75%医用酒精或碘伏对采血部位皮肤进行消毒，并用无菌纱布擦去第一滴血。使用乙二胺四乙酸毛细管采集血样时，防止气泡进入毛细管。采血结束后，局部一定要仔细消毒，彻底止血，采血完成后必须将穿刺针丢弃在利器盒内，严防职业伤害。根据实验项目的要求，可以选择合适的抗凝剂采集检测CD4+/CD8+T淋巴细胞的样本，可以选择乙二胺四乙酸或肝素或柠檬酸钠，也可以选择乙二胺四乙酸或柠檬酸钠进行艾滋病病毒分离和核酸定性/定量检测[15]。样本采集后应及时送实验室，避免因采集不当、时延等因素影响检测结果的真实性，采集的抗凝剂全血应在4～8 h内进行分离。分离后，将样品冷冻至-20℃或-70℃。给所有样品编号，注明采集日期和时间。

第六，样本的保存。用于抗体检测的血清或血浆样品应保存在-20℃以下，短时间（1周）内检测的样品可保存在2～8℃。艾滋病病毒阳性血清样本已保存至少10年。艾滋病病毒检测阴性的血清样本是否需要保存取决于不同的条件。用于CD4+/CD8+T淋巴细胞检测的标本不能长时间保存，采集超过48 h即检不出。由于艾滋病检测确认实验室存放的是艾滋病检测样本，在艾滋病检测阳性血清样本较多的地区，艾滋病检测确认实验室应配备-20℃以下的低温冰箱和-80℃的超低温冰箱，并建立血清库[16]。

第七，样品的运送。实验室间转移的样品应符合生物安全要求，并由专人送检。应采用世界卫生组织提出的三级包装体系。

第八，实验结束后，实验人员应对检测结果为阴性的样本出具《艾滋病病毒抗体阴性》报告，对结果为阳性的样本填写阳性复检表，并送上级实验室进一步确认。同时，在报告和审查表上要有实验人员和评审员的签名。还应设立柜台，以确保各种重要记录得到妥善保存，通常保存时间为15年。

在本次研究后，笔者所在医院艾滋病筛查实验室从内涵管理上加强建设，建立健全了由工作制度、岗位职责、工作指导书组成的质量管理体系。严格按照国家和军队卫生部门关于血液检测的具体规定，建立了严格规范的艾滋病抗体检测工作流程、标准操作规程（和质控规程）。对实验样品、实验过程、实验结果、实验记录、样品确认、质量控制、人员、设备、环境等各个环节进行规范和控制，并在实践中不断改进和完善，实现检验流程的标准化和试验操作的正规化。主要控制环节包括：（1）检测前标本的采集、接收、处理和保存；（2）检测过程中的仪器设备、检测试剂、检测方法和内部质量控制；（3）检测后的实验评估、结果复核、复验和交付；（4）检测记录、出具报告和文件保存；（5）安全防护等。对各控制环节制定相应的控制对策，通过对关键控制点的规范管理，确保检验质量和结果。同时，改进和完善原始文件管理，每一次实验的原始记录都是质控有效程序和质量记录的重要组成部分，既是实验结果的记录，也是整个测试过程的真实再现，这是确定血液质量的直接依据。

综上所述，艾滋病初筛结果不准确的实验室的影响因素主要类型血清样品采样和处理不规范、样品保存因素、样品运送因素、样品检测因素，仪器设备因素等，需要及时分析原因并采取相应的控制措施，更好提高艾滋病初筛结果正确性。