槐角不同炮制品中槐角昔的含量测定

金月 谢静 张岩 赵海鹰 马伟丽 常承东

[摘要]目的比较槐角不同炮制品中槐角昔成分的含量。方法采用HPLC法测定槐角昔的含量：Inertsil ODS C₁₈色谱柱（250 mm×4.6 mm，5 μm）;柱温30℃;流动相为甲醇-乙睛-0.1磷酸溶液（12：20：68）;等度洗脱;体积流量1.0 ml/mm;检测波长：260 nm。比较槐角生品、砂炒、麸炒炮制品槐角苷的含量。结果不同槐角炮制品中槐角昔的含量：生品（6.15%）>砂炒（5.92%）>麸炒（5.74%）。结论槐角饮片中黄酮类成分经过砂炒、麸炒炮制后槐角甘含量略降低。

[关键词]槐角;砂炒槐角;麸炒槐角;槐角苷;含量测定

[中图分类号]R284    [文献标识码]A    [文章编号]2095-0616（2022）05-0075-03

Determination of sophoricoside in different processed products of sophora fruit

JIN Yue1    XIE Jing2    ZHANG Yan1    ZHAO Haiying1    MA Weili1    CHANG Chengdong1

1. Preparation Center，Affiliated Hospital of Gansu University of Chinese Medicine，Gansu，Lanzhou 730000，China;2. Department of Traditional Chinese Medicine，Food，Drug and Medical Device Inspection and Testing Center of Jiayuguan City，Gansu，Jiayuguan 735300，China

[Abstract] Objective To compare the content of sophoricoside in different processed products of sophora fruit. Methods The content of sophoricoside was determined by High Performance Liquid Chromatography （HPLC）in an Inertsil ODS C₁₈column （250 mm×4.6 mm，5 μm）with column temperature of 30℃. The isocratic elution was performed with a mobile phase of methanol-acetonitrile-0.1 phosphoric acid solution （12：20：68）. The volume flow rate was set to 1.0 ml/min，and the detection wavelength was 260 nm. The contents of sophoricoside in sophora fruit of raw，sand-fried and bran-fried were compared. Results The content of sophoricoside in different processed products of sophora fruit：raw sophora fruit （6.15%）>sand-fried sophora fruit （5.92%）>bran-fried sophora fruit （5.74%）. Conclusion The content of sophoricoside in sophora fruit decoction pieces is slightly reduced after the flavonoids contained are sand-fried and bran-fried.

[Key words] Sophora fruit;Sand-fried sophora fruit;Bran-fried sophora fruit;Sophoricoside;Content determination

槐角為豆科植物槐（Sophora japonica L.）的干燥成熟果实，主要分布于我国河北、天津等地。也称作槐实、槐子，初次记载于《神农本草经》，并将其列为上品。其性寒、味苦，归肝、大肠经，主要功效以清热泻火，凉血止血见长[1]。中医临床主要用于治疗肠热便血、痔肿出血等症状[2]。本研究选用麸炒和砂炒两种方法，严格按照炮制规范操作，对两种炮制品进行含量测定。2020年版《中国药典》[3]选取槐角昔作为槐角的指标性成分，因此，本研究选择槐角苷为指标成分进行检测，将砂炒槐角和麸炒槐角与生品槐角中的槐角苷含量进行比较，为槐角的临床使用提供参考。

1    材料与仪器

高效液相色谱仪（日本岛津公司，LC-20AD）;电子天平（Sartorius公司，CPA225D）;电子天平（Sartorius公司，BSA224S）;数控超声波清洗器（昆山市超声仪器有限公司，KQ-500VDE型）;数显恒温水浴锅（上海博迅实业有限公司医疗设备厂）;离心机（长沙湘仪离心机仪器有限公司）;旋转蒸发仪（郑州杜甫仪器厂，SHB-3A）。

槐角药材购自甘肃康乐药业有限公司，经甘肃中医药大学附属医院主任中药师杨锡仓鉴定为豆科植物槐的干燥成熟果实;槐角苷对照品购自成都埃法生物科技有限公司，CAS：152- 95-4，批号：AF-8103093，纯度：98%。

2    方法与结果

2.1    样品制备

生品槐角：除去杂质，充分干燥后粉碎，过50目筛;砂炒槐角：取河砂置于锅内，武火加热至灵活状态，投入槐角药材，不断用热砂掩埋、翻炒至膨胀鼓起，筛去砂，放凉，粉碎，过50目筛;麸炒槐角：用武火将锅烧热，撒入麦麸至起烟时，投入槐角药材，不断翻动并控制火力，炒制药材表面深黄色且鼓起时取出，筛去麸皮放凉，粉碎，过50目筛，计算各样品的粉碎率（粉碎率=筛下部分/总样品量×100%）。其3种不同样品的性状及水分测定（烘干法）结果见表1。

2.2    测定条件

色谱条件：Inertsil ODS C₁₈（250mm×4.6 mm，5 μm）;检测波长：260 nm;流速：1.0 ml/min;柱温：30℃;进样量：10 μl;流动相：甲醇-乙腈-0.07%磷酸溶液（12：20：68）。

2.3    对照品溶液制备

取槐角昔对照品11.46 mg，加甲醇50 ml，得到浓度为0.2292 mg/ml的对照品溶液，备用。

2.4    供试品溶液制备

取“2.1”项下生品、砂炒、麸炒槐角3种不同粉末约2 g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入70%乙醇50 ml，称定重量，超声处理（功率300 w，频率25 kHz）45 min，放冷，再称定重量，用70%乙醇补足减失重量，摇匀，过滤。精密量取续滤液0.5 ml，置20 ml容量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得[3]。

2.5    线性关系考察

精密吸取槐角昔对照品储备液0.5、1.0、1.5、2.0、2.5、3.0 ml，置10 ml量瓶中，加甲醇稀释至刻度，混匀，配制成11.46、22.92、34.38、45.84、57.30、68.76 μg/ml对照品溶液。精密吸取上述溶液各10 μl，按“2.2”项下色谱条件进样测定，以峰面积值为纵坐标，对照品浓度（μg/ml）为横坐标，绘制标准曲线，得线性回归方程为Y=581 043X-35 897，R²=0.9994，表明槐角昔在11.46～68.76 μg/ml范围内线性良好。

2.6    精密度试验

取对照品溶液重复进样6次，记录峰面积。结果槐角苷峰面积的相对标准偏差（RSD）为1.80%，表明进样精密度良好。

2.7    稳定性试验

将供试品溶液在室温下贮存，分别于0、4、8、12.24 h测定，峰面积积分值的RSD为1.39%，结果表明样品溶液在24 h内稳定。

2.8    重复性试验

取同一批槐角药材样品，按“2.4”项下方法制备5份平行样品，按照“2.2”条件测定，以峰面积计算，槐角苷RSD为0.46%，表明该样品重复性良好。

2.9    加样回收率试验

精密称取同批槐角6份，加入槐角苷对照品适量，按“2.4”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件进行分析，测得加样回收率分别为96.58%、99.15%、96.66%、96.41%、97.29%、98.10%，RSD 为1.10%。

2.10    样品含量测定

取3批槐角样品各约2.0 g，精密称定，按“2.4”项下方法制备供试品溶液，按“2.2”项下色谱条件进样，将各样品中的峰面积代入标准曲线，计算各样品中槐角昔的含量，色谱图见图1。从实验结果分析来看，槐角昔的含量经炮制后略有降低，依次为生品>砂炒>麸炒，RSD值为3.46%，见表2。

3    讨论

槐角为中医临床常用药物之一，目前在医院调剂使用时多用槐角和槐角炭，其中槐角清热凉血力强，用于血热妄行的出血症和肝火目赤、头痛眩晕等[4];槐角炭寒性减弱，长于收敛止血，常用于便血、痔血、崩漏等。槐角炮制品使用在历代本草中有不同的记载，南北朝刘宋时代有乳汁制（《雷公》），唐朝有烧灰（《千金》），宋代《总录》记载有麸炒法，明代《回春》《禁方》《保元》分别记载了胆汁制、煮制和黑豆拌蒸等炮制方法，而清代则广泛应用炒黄、炒炭、麸炒等法[5]。槐角化学成分复杂，其主要活性成分为黄酮类化合物，此外还含有三萜皂苷、生物碱、磷脂、氨基酸以及多糖等其他成分。黄酮类成分主要有芸香苷、槲皮素、异鼠李素、槐属苷等[6]。槐角具有止血、消炎、抑菌等作用，此外还具有抗癌及雌性激素样作用，对肠、痔疮等出血可有效治疗，对胃腺癌、肺癌等癌症及心血管疾病等也有一定的防治作用[7]。

根据我院临床使用统计，现药房中药处方调剂中槐角使用量很少，槐角多人制剂使用，如槐角丸[8]或地榆槐角丸[9]，而且疗效较好。我院常用院内制剂大黄消痔栓[10]中，槐角是主药之一。槐角丸用炒槐角、地榆槐角丸用蜜槐角，我院制剂使用槐角。在药廠与医院制剂过程中，药材在前处理中都需要粉碎成细粉，生品黏性较大，粉碎时有一定的难度，容易与其他药材粘连或堵塞筛网，影响细度，对制剂最后的成型和疗效都有一定影响。麸炒和砂炒均有文献记载和出处，生品槐角经过麸炒或砂炒，黏性变小，质地变酥脆，便于粉碎，有利于生产。因此，本研究选用麸炒和砂炒两种方法，并对两种炮制品槐角昔进行含量测定。经测定，两种炮制方法对有效成分槐角苷影响很小，而且提高了前期的粉碎效率，有利于生产需要。以上研究结果对整体评价槐角及其不同炮制品也提供了一定依据。但麸炒和砂炒两种炮制方法缓和了生品的寒凉之性，两种炮制方法对槐角中其他成分的影响如何[11-15]，是否完全可以替代使用等问题，还需后续进一步研究，这是本研究的不足之处。

[参考文献]

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[7]金浩，余佳，王梓瑜，等.槐角黄酮通过调控LncRNA FBXL19-AS1/miR-342-3p 通路抑制肝癌细胞增殖、迁移及侵袭的机制研究[J].中国中药杂志，2020，45（18）：4440-4447.

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