2个小蘑菇属中国新记录种

刘伟　陈言柳　张林平　梁俊峰

摘  要：對采自广东省的2份小磨菇属Micropsalliota标本进行鉴定，采用形态鉴定和ITS序列比对相结合的方法，最终将这2份标本鉴定为二瓣小蘑菇（Micropsalliota bifida R.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde）和亚白小蘑菇（Micropsalliota subalba Heinem. & Little Flower），前者的模式产地在泰国，后者在印度，二者在我国均为首次发现。二瓣小蘑菇主要的识别特征为子实体小型，菌盖成熟后纯白色;菌褶离生，不等长，密，幼时白色，成熟后褐色，菌环白色;担孢子椭圆形至杏仁形，光滑;褶缘囊状体17.6～32.0 ?m×4.6～7.4 ?m，顶部有时分裂成两瓣，簇生，光滑，薄壁，侧生囊状体缺失;菌盖皮层由平伏的菌丝组成。亚白小蘑菇的主要识别特征为子实体小型，菌盖表面被辐射状纤毛;菌褶离生，不等长，具小菌褶，密;菌环上位，白色;担孢子椭圆形，光滑，薄壁;褶缘囊状体25.6～56.5 ?m×7.1～12.6 ?m，成簇，棒状至槌形，无色，光滑，侧生囊状体缺失，菌盖皮层由平伏的菌丝组成。本研究提供了二者详细的形态描述、显微线条图及与它们相关的系统发育树，并分析其与相近种在形态上的区别。本研究结果增加了该属在我国分布的种类和地理区域。

关键词：小蘑菇属;分类学;分子系统学;新纪录中图分类号：S324      文献标识码：A

Two New Records of the GenusMicropsalliota from China

LIU Wei CHEN Yanliu ZHANG Linping LIANG Junfeng

1. Lishui Baiyunshan Ecology Forest Farm， Lishui， Zhejiang 323000， China; 2. Research Institute of Tropical Forestry， Chinese Academy of Forestry， Guangzhou， Guangdong 510520， China; 3. Key Laboratory of State Forestry Administration on Forest Ecosystem Protection and Restoration of Poyang Lake Watershed / Key Laboratory of Bacteria Resources Conservation and Utilization in Jiangxi Province / Jiangxi Agricultural University， Nanchang， Jiangxi 330045， China

Abstract： In this paper， two samples ofMicropsalliota collected from Guangdong Province were classified and identified. A method of combining morphological comparison and gene sequence was used. Finally， the two specimens were identified as Micropsalliotabifida R.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde andMicropsalliota subalbaHeinem. & Little Flower， both of them are new record species in China.M. bifidais characterized in its small fruiting body， pure white pileus when mature， free and crowded lamellae， white when young， then brown when mature， white annulus， oval to almond-shaped and smooth basidiospores， hyaline and smooth cheilocystidia， sometimes bifid with two toe-like lobes， 17.6～32.0 ?m×4.6～7.4 ?m， absent pleurocystidia， and pileipellis composed of creeping hyphae.M. subalbais characterized in its small fruiting body， pileus surface with radial cilia， free and crowded lamellae， white and superior annulus， oval and smooth basidiospores， 25.6～56.5 ?m×7.1～12.6 ?m， clustered， hyaline， and smooth cheilocystidia， absent pleurocystidia， and pileipellis composed of creeping hyphae. Furthermore， the detail description， illustrations and phylogenetic tree are provided， and the differences in morphology with similar species are analyzed in this paper. To this end， the species and geographical regions of this genus in China are added.

Keywords： Micropsalliota; taxonomy; phylogeny; new records

DOI： 10.3969/j.issn.1000-2561.2022.04.006

小蘑菇屬（MicropsalliotaH?hn.）是蘑菇科（Agaricaceae）中较小的成员之一，与磨菇属（Agaricus）亲缘关系较近，但该属的担子果更小而细长^[1]。截至2020年，世界范围内分布63种（http：//www.speciesfungorum.org/Names/Names.asp），大部分分布于热带地区。目前，我国共报道11种，即Micropsalliota arginophaeaHeinem.、M. brunneosperma var. cortinataHeinem.、M. furfuraceR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde、M. globocystisHeinem.、M. gracilisHeinem.、M. lateritiaHeinem.、M. megarubescensR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde、M. megasporeR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde、M. pseudoargineaHeinem.、M. pseudoglobocystisLi Wei & R.L. Zhao、M. rubrobrunnesceR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde ^[1-9]。

在对粤港澳大湾区大型真菌资源调查中，发现了2个小蘑菇属中国新记录物种，二瓣小蘑菇（Micropsalliota bifida R.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde）和亚白小蘑菇（Micropsalliota subalba Heinem. & Little Flower），扩大了该属在我国的分布种类和区域范围，为其从热带区过渡至亚热带区提供了数据支持。

1  材料与方法

1.1 标本采集

标本于2020年8月采自广东省惠州市罗浮山风景区和南山公园，采集时拍摄新鲜子实体

生境照，用锡箔纸包裹放入采集盒，室内记录宏观形态后，将标本放入50℃的烘箱内烘干，最后用自封袋保存。标本保存于中国林业科学研究院热带林业研究所真菌标本馆（RITF）。

1.2 形态研究

宏观形态依据野外观察记录和生境照片;微观形态描述依据干燥标本徒手切片观察，使用5%的KOH溶液进行样品形态的复原和固定，1%刚果红溶液进行染色，随机选取成熟的担孢子、担子、囊状体和菌盖皮层菌丝进行测量和绘图。描述孢子时以字母x表示平均值，Q表示长宽比，Q_m表示Q±标准差，n表示测量个数^[1]。

1.3分子系统研究

采用Ezup柱式真菌基因组DNA抽提试剂盒（上海生工生物工程技术服务有限公司）提取总DNA，ITS4/ITS5为目的片段扩增引物^[10]，PCR产物送往上海生工生物科技有限公司进行测序，所获基因序列与NCBI数据库比对并上传。构建系统发育树所用的序列信息见表1。利用ContigExpress软件进行序列拼接^[11];使用在线MAFFT version 7软件进行序列比对^[12];BioEdit软件用于序列的手动调整^[13];借助RaxML v7.2.6软件进行最大似然（maximum likelihood，ML）分析，经1000次重复获得统计学支持^[14];利用MrModeltest 2.3软件计算出序列矩阵的最佳模型为GTR+I+G^[15];采用MrBayes 3.1软件进行贝叶斯分析^[16]运行一百万代;Hymenagaricus epipastus和三硫色蘑菇（Agaricus trisulphuratus）作为外类群^[1]。

2  结果与分析

2.1形态学特征描述

2.1.1  二瓣小蘑菇（Micropsalliota bifidaR.L. Zhao， Desjardin， Soytong & K.D. Hyde，图1）  子实体小型;菌盖直径6～21 mm，幼时斗笠形或钟形，成熟后凸镜形至平展或平凹，幼时淡黄色，中间褐色，表面干，无毛或被白色细纤毛，具条纹，成熟后光滑，纯白色，边缘略内卷，在KOH中变红褐色;菌肉薄，白色，不变色;菌褶离生，不等长，具小菌褶，密，幼时苍白色、浅灰色至淡黄褐色，成熟后灰褐色、褐色至深褐色;菌柄长30～46 mm，粗1～2 mm，圆柱形，白色，近光滑或稍被绒毛;菌环白色，膜质，上位，易脱落;无明显的气味和味道。

担孢子3.8～4.7 ?m×2.3～2.8 ?m，[x=（4.2± 0.21）?m×（2.6±0.14）?m，Q=1.4～1.9，Q_m=1.59±0.09，n=40]，橢圆形至杏仁形，有时顶部变厚，褐色，光滑，薄壁，无芽孔;担子9.8～12.3 ?m×3.9～ 5.6 ?m，短棒状，具4个小梗，有时具2个，无色，薄壁;褶缘囊状体17.6～32 ?m×4.6～7.4 ?m，宽棒状至近槌形，顶部有时分裂成两瓣，簇生，无色，光滑，薄壁;侧生囊状体缺失;菌盖皮层由平伏菌丝组成，菌丝直径1.6～5.6 ?m，圆柱形，无色，薄壁;锁状联合缺失。

生境：群生于阔叶林中地上或枯枝上。

分布：泰国（模式产地）、中国广东。

研究标本：2020年8月22日，广东省惠州市罗浮山风景区，23°15′54″N，114°3′27″E，海拔90 m，张锦花、潘雪玉（RITF4915，RITF4917）。

2.1.2  亚白小蘑菇（Micropsalliota subalbaHeinem. & Little Flower，图2）  子实体小型;菌盖8～18 mm，凸镜形至近平展，中央具小的脐突，盖表被辐射状纤毛，白色至浅褐色;菌肉白色，薄，不变色;菌褶离生，不等长，具小菌褶，菌褶中间略宽，密，白色至灰褐色;菌柄长20～30 mm，粗1～1.5 mm，圆柱形，中空，褐色，被白色细微纤毛;菌环脱落，上位，白色;无明显的气味和味道。

担孢子4.9～6.8 ?m×2.9～4 ?m，[x=（5.6± 0.40） ?m×（3.3±0.19） ?m，Q=1.5～1.8，Q_m=1.69±0.07，n=40]，椭圆形，在KOH溶液中呈褐色，光滑，薄壁;担子11.5～17 ?m×4.9～6.8 ?m，棒状，具4个小梗，偶具2个，无色，具颗粒，稍厚壁（>0.5 ?m）;褶缘囊状体25.6～56.5 ?m×7.1～ 12.6 ?m，成簇，棒状至槌形，无色，光滑，稍厚壁（>0.5 ?m）;侧生囊状体缺失;菌盖表皮由平伏菌丝组成，末端细胞近棒状至近纺锤形，23.2～69.2 ?m×4.8～ 9.6 ?m，菌丝直径2.7～16 ?m，无色，薄壁;锁状联合缺失。

生境：群生于地上。

分布：印度（模式产地）、泰国、中国广东。

研究标本：2020年8月21日，广东省惠州市南山公园，23°3′40″N，114°24′2″E，海拔30 m，陈言柳（RITF4594）。

2.2 系统发育研究

基于ITS序列，采用最大似然法和贝叶斯法构建系统发育树，二者形成的拓扑一致，仅仅在支持率上略有不同，因此，本研究仅展现最大似然法结果（图3）。从图3可见，本研究的自采标本与泰国的标本聚在一起形成独立的分支，并获得较高的支持率。自采标本二瓣小蘑菇（M. bifida，RITF 4915和RITF 4917）与来自泰国的标本二瓣小蘑菇（M. bifida）聚在一起，获得较高的支持率（82%的靴带支持和1.0的后验概率），并与来自泰国的标本亚白小蘑菇（M. subarginea）有较近的亲缘关系。自采标本亚白小蘑菇（M. subalba，RITF4594）与来自泰国的标本亚白小蘑菇（M. subalba）聚在一起，获得96%的靴带支持和1.0的后验概率，并与来自老挝的M. gracilis有较近的亲缘关系。

3  讨论

基于ITS的系统发育结果，自采标本二瓣小蘑菇（M. bifida，RITF4915和RITF4917）和亚白小蘑菇（M. subalba，RITF4594）均属于小蘑菇属的类群，并分别与来自泰国的标本亚白小蘑菇（M. subalba）和二瓣小蘑菇（M. bifida）聚在一起，其形态特征也与小蘑菇属的特征相符合。

二瓣小蘑菇（M. bifida，RITF4915和RITF4917）与ZHAO等^[1]对其模式标本的描述无明显差异，该种的主要识别特征为菌盖白色、光滑，担孢子小及缘生囊状体两头膨大^[1]。还有一些具有白色菌盖的物种，如亚白小蘑菇（M. subarginea）、M. arginea、砖红小蘑菇（M. lateritia）、拟白色小蘑菇（M. pseudoarginea）、白小蘑菇（M. alba），宏观特征不易与二瓣小蘑菇区分。但M. subarginea有更长、弯曲、圆柱形至近头状的缘生囊状体（30～60 ?m×4～8 ?m）^[17];M. arginea有膨大近头状的缘生囊状体^[1];M. lateritia有更长的孢子（4.5～5.8 ?m×2.6～3.2 ?m）、近头状的缘生囊状体（20～40 ?m×9～18 ?m）及菌盖成熟后变红褐色^[17];M. pseudoarginea的担子更长（17～19 ?m×6～6.7 ?m），有椭球形至宽棒状的缘生囊状体^[18];M. alba有更小的子实体、更大的担孢子（5.8～6.6 ?m×3.3～3.6 ?m）及宽头状的缘生囊状体^[19]。

亚白小蘑菇（M. subalba）的主要形态特征为子实体小型，菌盖中央具小的脐突，表面被辐射状纤毛，有3种小菌褶，担孢子椭圆形，缘生囊状体多头状，簇生，菌盖皮层毛皮型，遇氨水呈橄榄灰色，遇KOH呈褐色。采自我国的标本（RITF4594）与源自印度的模式标本及ZHAO等^[1]采自泰国的标本在菌柄颜色上略有差异，但在显微特征上无明显区别;并且基于ITS的系统发育树结果显示，自采标本亚白小蘑菇（M. subalba，RITF4594）与泰国的标本聚在一支，其序列同源性高达99%。

基于上述原因，将我国的标本鉴定为亚白小蘑菇。M. subalba与M. gracilis具有较近的亲缘关系，区别在于后者的菌盖被淡红褐色的鳞片或糠麸和更窄的缘生囊状体（27～43 ?m×5～9 ?m）。

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