酶联免疫法和金标法检测HIV 抗体的价值对比

郭志飞

获得性免疫缺陷综合征(AIDS)简称艾滋病,主要是因为HIV 对机体免疫系统进行攻击而造成的。现阶段,艾滋病是临床无法治愈的疾病,具有较高的死亡率,所以又被称为世纪杀手。因为艾滋病具有较长的潜伏期,许多患者在感染艾滋病后依然是健康的,同时伴有轻微症状或者无症状,很可能导致HIV 传染给其他人员,具有终生传染性［1,2］。所以,如何在短时间内明确诊断为艾滋病,并将携带HIV 患者筛查出,是当前控制艾滋病传播及发展的主要方法。现阶段,主要利用HIV 抗体检测方法诊断HIV 感染,而酶联免疫法是以往常用的一种检测方法,在医学技术日益提高的背景下,金标法被广泛应用于临床中,以便更好的筛查HIV。因而,本次研究针对金标法与酶联免疫法在HIV抗体检测中的应用效果进行简单阐述,具体如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 本次研究选取本院2019 年1 月～2020 年5 月接收的120 例接受HIV 抗体检测的患者,其中男64 例,女56 例；年龄最小18 岁,最大65 岁,平均年龄(33.65±10.45)岁；文化水平：小学23 例,初中28 例,高中31 例,大专及大专以上38 例。经医院医学伦理委员会批准。纳入标准：自愿参与研究并签署同意书；研究资料齐全、完整；具备正常沟通、表达、理解能力；具备良好的依从性。排除标准：合并血液系统疾病或者免疫系统疾病；存在心理障碍或者具有精神疾病史；合并恶性肿瘤；哺乳期或者妊娠期妇女。

1.2 方法 采集所有患者5 ml 的空腹血液标本,血液样本检测前,均未被污染,同时也无溶血现象。血液采集过程中,全面落实无菌操作原则。

1.2.1 金标法检测 在25 μl 的血清中添加金标法试剂,然后添加一滴缓冲液,静置20 min,通过肉眼观察,如果试纸上存在2 条红线,表示血液标本检测为阳性；若是无2 条红线,表示血液样本检测为阴性,准确记录红线产生时间。

1.2.2 酶联免疫法检测 应用酶联免疫试剂及配套仪器,按照说明书进行操作,检测过程中,应用酶标仪,对标准a 值进行检测：参考波长为630 nm,检测波长设置为450 nm,若a 值≥1,说明血液样板检测为阳性；若a 值＜1,说明血液样本检测为阴性。酶联免疫检测血液样本期间,严格按照检测仪器及说明书进行,同时让相同的检测人员检测血液样本。

不同检测方法初次检验后明确诊断为阳性的血液样本,需要二次检测,进行确认试验,将确认试验检测结果为阳性的血液样本送至疾控中心展开免疫印迹检测。

1.3 观察指标 准确记录酶联免疫法与金标法检测结果,并进行比较。

1.4 统计学方法 采用SPSS20.0 统计学软件进行统计分析。计数资料以率(%)表示,采用χ2检验。P＜0.05 表示差异具有统计学意义。

2 结果

金标法血液样本阳性率为9.17%,酶联免疫法血液样本阳性率为2.50%。金标法血液样本阳性率高于酶联免疫法,差异有统计学意义(χ2=4.855,P=0.028＜0.05)。以免疫印迹检测结果为金标准,金标法检测HIV 抗体的假阳性率为0.91%(1/110),酶联免疫法检测HIV 抗体的漏诊率为70.00%(7/10)。见表1。

表1 不同检测方法对HIV 抗体的检测结果比较［n(%),n=120］

3 讨论

艾滋病是由于HIV 感染而引起的病情相对严重的传染疾病,具有盗汗、持续发热等临床症状,中青年人是主要患病人群,主要通过母婴、性接触及血液方式等传播。艾滋病自身具有较大的危害性,是因为HIV 感染造成的。HIV 是一种可以对机体免疫系统造成攻击的病毒,其主要负责攻击免疫系统中相对重要的CD4 淋巴细胞,使得该细胞受损,机体免疫功能丧失［3］。所以,机体很容易感染各种各样的疾病,同时也可能导致恶性肿瘤的发生,具有较高的死亡率。一般情况下,机体中HIV 潜伏期是8～9 年,HIV 潜伏阶段,患者无任何症状,也不会对正常工作和生活造成影响［4］。所以需要及早检测潜伏在机体的HIV,其直接影响着艾滋病的控制及传播。现阶段,抗体检测是诊断艾滋病常用方法,机体HIV 感染后,其会在短时间内出现抵抗性抗体及免疫反应,其能够更好的控制寄生虫、病毒和病原体的入侵等。

金标法是一种全新的体外诊断方法,其具有特异性高、灵敏性高等特点,该方法操作快捷、简答,且具有较高的检测准确率。通过特制的检验盒能够快速取得检测结果,详细操作如下［5］：血液标本采集后,在试纸上滴注血液样本,静置20 min 后,仔细观察试纸颜色是否发生改变,如果颜色改变,表示初步检测为阳性。对于大部分患者和医院均比较适用,该方法具有操作便捷、方便、检测准确高等特点。酶联免疫法是改良酶免疫测定原理的技术,其包括三种,分别是抗体竞争法、间接法与双抗原夹心法。当前,双抗原夹心法试剂是国外及国内常用的检测方法,操作步骤如下［6］：在酶反应中添加底物,因为酶催化作用,导致底物转变成有色产物,产物与标本中受检物质的量存在紧密关联。所以,需要根据颜色反应进行定量分析或者定性分析。由于酶催化具有较高频率,所以能够进一步放大反应效果,进而提高了检测方法的敏感度。

本次研究主要在空腹状态下采集5 ml 血液样本,采集期间,全面落实无菌操作原则,指导患者分别实施酶联免疫法与金标法检测,研究结果显示,金标法血液样本阳性率为9.17%,酶联免疫法血液样本阳性率为2.50%。金标法血液样本阳性率高于酶联免疫法,差异有统计学意义(P＜0.05)。以免疫印迹检测结果为金标准,金标法检测HIV 抗体的假阳性率为0.91%(1/110),酶联免疫法检测HIV 抗体的漏诊率为70.00%(7/10)。由此可见,金标法在HIV 抗体检测中具有灵敏度高等特点,而且酶联免疫法具有较高的特异度。不同血液中HIV抗体检测方法,从检测原理和操作两个方面分析,存在一定差异,金标法不仅能够快速反应,而且并不需要消耗大量时间和特殊设备,从容取得检测结果。对于病情严重者,如果采用酶联免疫法对血液进行检测,很可能延误病情,如果血液检测时未确诊,则会导致临床医师在未知状态下展开手术,进而增加了艾滋病传播风险［7］。所以,通过金标法能够有效解决急诊中遇到的该类状况,协助医师更好的诊断病情。但是酶联免疫法在监测精准度方面较金标法高,且具有较低的误差。尽管操作较为复杂,对于非紧急状况较为适用。

金标法在血液HIV 抗体检测中具有较高的灵敏度和特异度。两种方法血液HIV 抗体检测中具有重要作用,从检测过程及检测原理两个方面来看,存在许多不同地方［8］。通常情况下,金标法能够在短时间内完成检测,而且检测期间不应用特殊设备,检测时间短,能够在短时间内取得血液样本检测结果。针对病情严重者,若应用酶联免疫法检测,则会对疾病诊断时间造成影响,未取得血液检测结果前,则会对临床医生的诊治造成影响,进而提高了传播风险［9］。而金标法可以弥补酶联免疫法的不足,在短时间内了解患者病情。酶联免疫法的检测效果更加明显,但是该方法操作繁琐、复杂,导致使用范围受到影响。

金标法具有操作简单、方便、检测速度快、敏感性高等特点,对于个人检测和中小医院更加适用。酶联免疫法同样具有良好的特异性及敏感性,但是其需要结合酶标仪等设备辅助,而且对专业人员的操作要求较高,且操作繁琐,往往需要大量时间检查,对于单份标本的检测不适用。本次研究中,金标法与酶联免疫法均具有良好的诊断效果,所以应加强对检测方法的选择,从而更好的判断疾病,根据诊断结果予以患者相应的治疗,从而促进患者治疗效果和生活质量的提高,改善其身体状况。

总而言之,HIV 抗体检测过程中,酶联免疫法与金标法均具有一定效果,临床检测过程中,需要根据患者实际状况对检测方法进行选择,从而促进诊断准确率的提高,以便医生根据检测结果为患者提供针对性治疗方法,改善患者身体状况和生活质量。