2018—2021 年上海市嘉定区规模猪场主要疫病抗体监测

甘叶青，朱九超，常晓静，曹传闺，孙泉云，卫金良，夏炉明

（1.上海市嘉定区动物疫病预防控制中心，上海 201800；2.上海市动物疫病预防控制中心，上海 201103）

当前，危害我国生猪养殖业的疫病种类繁多，除必须严格控制的非洲猪瘟外，还包括猪瘟（CSF）、口蹄疫（FMD）、猪繁殖与呼吸综合征（PRRS）、猪伪狂犬病（PR）和猪流行性腹泻（PED）等[1]。疫苗预防接种是目前规模猪场疫病防控的主要措施。但疫苗免疫效果受诸多因素影响，要确保猪群维持有效的免疫力，抗体水平（包括免疫抗体和感染抗体）监测评估必不可少[2]。

上海市嘉定区目前共有2 个规模猪场，其中一个为地方猪（梅山猪）保种场，生猪存栏3 000余头；另一个为商品猪场，生猪存栏8 500 余头。本研究对嘉定区2 个规模猪场开展FMD（O 型，以下非特指均简称FMD）、CSF、PRRS、PR 和PED 等5 种主要疫病血清学监测，从而掌握嘉定区规模猪场主要疫病的免疫抗体水平、动态变化情况和野毒感染状况，及时发现疫病风险隐患，为规模猪场及时调整免疫程序，科学制定综合防控措施提供数据支撑[3]。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 目标群 嘉定区现有2 个规模猪场的全部存栏生猪。

1.1.2 样本量计算 按照置信水平95%、可接受误差5%，以及免疫抗体合格率70%合格线的要求，通过估计流行率（本研究为估计免疫抗体合格率）的样本量计算公式计算样本总量；在每年每个规模猪场采样数量方面，按照置信水平95%、试验敏感性95%、预期免疫抗体不合格率30%，采用发现疫病（本研究为发现免疫不合格的猪只）的样本量计算公式计算每个规模猪场的样本量[4]。每个规模猪场采用分层随机抽样策略，按照生产母猪、后备母猪和育肥猪3 个生产阶段进行血清样品采集。2018—2021 年共采集嘉定区2 个规模猪场血清样品340 份，其中生产母猪180 份、后备母猪50 份、育肥猪（120～150 日龄）110 份。嘉定区规模猪场FMD 等5 种疫病免疫程序见表1。

表1 嘉定区规模猪场FMD 等5 种疫病免疫程序

1.1.3 试剂和仪器 FMD 抗体液相阻断ELISA检测试剂盒，购自中国科学院兰州兽医研究所；CSF、PRRS 以及PR 病毒gB、gp1 抗体检测试剂盒，均购自美国IDEXX 公司；PED 抗体检测试剂盒，购自法国ID.vet 公司；FMD NS 抗体检测试剂盒，购自荷兰Thermo Fisher 公司。仪器包括离心机、酶标仪（TECAN SUNRISE REMOTE）和96 通道全自动洗板机（ELX405R）等。

1.2 方法

采用ELISA 方法，对血清样品进行FMD、PRRS、CSF、PR（gB）和PED 免疫抗体检测，以及FMD非结构蛋白（NS）和PR（gE）感染抗体检测。操作步骤和判定标准按照试剂盒说明书进行。

2 结果与分析

2.1 总体情况

免疫抗体方面：2018—2021 年嘉定区2 个规模猪场FMD、PRRS、CSF、PR 等4 种疫病的免疫抗体合格率均在80%以上，表明嘉定区规模猪场这4 种疫病的免疫程序合理，免疫措施到位，防控效果确实；PED 免疫抗体合格率仅为23.5%，未形成有效的免疫屏障，说明规模猪场在PED 疫苗类型选择、免疫程序制定、免疫频次和计划执行等方面有待进一步优化。

感染抗体方面：FMD（NS）和PR（gE）抗体均维持在较低感染水平（表2）。

表2 嘉定区规模猪场5 种主要疫病抗体检测结果汇总

2.2 不同年份

2018—2021 年持续4 年对嘉定区2 个规模猪场进行了FMD、CSF 等5 种疫病免疫抗体和感染抗体检测，检测结果分别见表3 和表4。

表3 2018—2021 年嘉定区规模猪场5 种疫病免疫抗体检测结果汇总

表4 2018—2021 年嘉定区规模猪场FMD、PR 感染抗体检测结果汇总

按照年份比较，免疫抗体方面，FMD、CSF免疫抗体合格率呈逐年上升趋势，PRRS 免疫抗体总体维持在较高水平，年度间差异不显著（P＞0.05），PR 呈先降低后升高趋势，而PED 免疫抗体水平一直较低。在感染抗体方面，FMD（NS）抗体均为阴性，PR（gE）抗体呈现显著下降趋势（P＜0.01），2021 年感染抗体阳性率降至0。

2.3 不同猪场类型

目前，嘉定区仅有2 个规模猪场（1 个地方猪保种场、1 个商品猪场）。从免疫抗体检测结果看，除CSF 和PR 外，种猪场的FMD、PRRS 和PED免疫抗体水平整体高于商品猪场（P＜0.05，表5）。感染抗体方面，商品猪场PR（gE）抗体显著高于种猪场（P＜0.01，表6）。

表5 嘉定区不同类型规模猪场5 种主要疫病免疫抗体检测结果汇总

表6 嘉定区不同类型规模猪场FMD、PR 感染抗体检测结果汇总

2.4 不同生产阶段

分别采集生产母猪、后备母猪和育肥猪（120～150日龄，FMD 3 次免疫后）等3 个生产阶段猪群的血清学样品。从检测结果看，5 种疫病的免疫抗体合格率基本呈现生产母猪＞后备母猪＞育肥猪的特征，而PR（gE）感染抗体阳性率呈现生产母猪＞育肥猪＞后备母猪的规律。检测结果见表7～8。

表7 嘉定区规模猪场不同生产阶段猪群5 种疫病免疫抗体检测结果汇总

3 讨论

3.1 FMD

2018—2021 年，嘉定区规模猪场均未检测出FMD（NS）感染抗体阳性，FMD 免疫抗体合格率呈逐年上升趋势。疫苗毒株与流行毒株的匹配性是影响FMD 疫苗免疫效果的最重要因素，其次为免疫剂量、免疫频次和免疫部位等[5]。嘉定区高度重视FMD 免疫工作，每年向规模猪场印发FMD 等猪群主要疫病免疫方案，要求选择O-A FMD 二价灭活疫苗，对商品猪和后备母猪按照60、90、120日龄各免1 次的免疫程序实施强制免疫工作，连续4 年的检测结果表明，嘉定区规模猪场FMD 免疫抗体水平远超过70%的合格线，且均未检测到感染抗体阳性，说明FMD 防控取得了良好效果。

表8 嘉定区规模猪场不同生产阶段猪群FMD、PR 感染抗体检测结果汇总

3.2 CSF

2017 年CSF 退出国家强制免疫计划，但嘉定区各规模猪场始终高度重视CSF 的全面免疫和补免工作，事实也证明高质量的疫苗和科学合理的免疫程序对CSF 防控十分重要。2018—2021 年，嘉定区规模猪场CSF 免疫抗体平均合格率为84.7%，与FMD 等其他病种相比，CSF 免疫抗体水平还有一定的提升空间。种猪场CSF 免疫抗体水平不高可能与保育猪免疫日龄过早，受到母源抗体干扰有关[6]。我国的CSF 兔化弱毒疫苗，对各种猪群均有高度的安全性和优良的免疫原性，商品猪CSF免疫程序制定时要充分考虑母源抗体的干扰，可将CSF 首免日龄适当推迟（如推迟到35～40 日龄，或根据商品猪母源抗体检测结果来设定首免日龄），65～70 日龄二免（可用猪瘟-猪丹毒-猪肺疫三联活疫苗代替），育肥猪可于140 日龄再补免1 次[6-7]。

3.3 PRRS

当前，PRRS 仍然是影响我国生猪养殖的重要疫病之一，其流行范围广，污染面大，流行毒株复杂[8]。2018—2021 年，嘉定区规模猪场PRRS 免疫抗体合格率达到95.6%，抗体水平整体较高。一般认为弱毒疫苗免疫效果较好，但适用于感染猪场；灭活苗虽然安全性高，但免疫效果相对不佳。在PRRS 无净化可能的条件下，建议阳性场使用弱毒苗或与灭活苗联合使用，阴性场则不建议使用弱毒苗。目前，农业农村部批准的高致病性PRRS 毒株多达4 种（包括JXA1-R、HuN4-F112、TJM-F92和GDr180），由17 个疫苗厂家生产，建议一个规模猪场使用同一种毒株疫苗进行免疫[6]。

3.4 PR

PR 病毒可以感染多种动物（如狗、猫、牛、羊等），猪对其最为敏感。近年来规模猪场种猪调运不规范和饲养密度过高等因素，导致PR 在猪群中持续流行传播。PR 防控成效与净化关系到规模猪场的生产效益和经济效应[9]。从免疫抗体检测结果看，嘉定区规模猪场各生产阶段猪群PR 免疫抗体水平良好，形成了良好的免疫屏障；从gE 感染抗体检测结果分析，携带PR 病毒的高风险群体是生产母猪，因此PR 净化工作需要从培育健康阴性后备猪群做起[10]。近年来，嘉定区规模猪场按照《猪伪狂犬病净化规程》（DB31/T 1050—2017），采取“检测—淘汰阳性猪只—培育阴性后备猪群”的净化策略[11]，同时积极开展引种检疫、隔离和消毒等工作[12]，取得了明显的净化效果。

3.5 PED

2011 年左右，仔猪PED 疫情的流行，给我国养猪业乃至国民经济带来了沉重打击，曾经一度扭转猪价多年逐波下行的趋势，造成猪价快速飙升。近年来，PED 疫情虽然得到了一定的控制，但局部流行或散发现象仍然时有发生。目前，来源正规的“猪传染性胃肠炎（TGE）＋PED”二联灭活疫苗、“TGE+PED”二联活疫苗和“TGE+PED+猪轮状病毒（RV）”三联活疫苗对PED 的免疫效果均不够理想，免疫抗体难以激发或保护性抗体持续时间不长。针对该病的防控，除做好生物安全、饲养管理和持续监测外，建立适合本场猪群特点的免疫程序十分重要。由于冬春季节是该病的高发期，必须在11 月之前建立起有效的免疫力，坚持全群免疫，母猪在每年9—10 月普免2 次，从11 月到次年5 月，对所有怀孕母猪做好产前的跟胎免疫，这样可达到有效防止产房仔猪发生PED 的目的[13]。

规模猪场除因地制宜地制定符合生产实际的个性化免疫程序外，健全防疫制度、严格生物安全管理、完善饲养管理、降低饲养密度、保障良好的猪群健康水平等综合防控措施也是构筑坚实、牢固免疫保护屏障的关键环节[14]。

3.6 样品代表性与局限性

嘉定区现有2 个规模猪场，存栏生猪约1.1 万头。本研究对象为FMD、CSF 等5 种疫病的免疫群体，从2018—2021 年4 年的合计检测量来看，采用估计流行率（免疫抗体合格率）的样本量计算公式，样本总量达到了代表性要求；本研究每年每场的检测量为40～50 头，依据发现疫病（免疫不合格）的样本量计算公式，检测数量亦达到代表性要求。在FMD 和PR 感染抗体阳性率方面，按照估计流行率的样本量计算公式，嘉定区规模猪场FMD 感染抗体阳性率极低，每年每个规模猪场的检测数量均具有代表性，但PR 感染抗体的检测数量达不到代表性要求[4]。主要原因：一是本研究监测疫病种类多，检测项目多，难以兼顾；二是在非洲猪瘟疫情防控的大背景下，入场采样难度大，只能依靠各个规模猪场送检，具有一定的不可控性。今后需要继续加大PR 感染抗体的监测力度。