乳腺癌病人绝经前后血清25羟维生素D及骨钙素水平与乳腺密度相关性研究

何雷，沈冬明

美国最新癌症统计报告显示，乳腺癌仍是具有高发病率及病死率的妇科恶性肿瘤，且发病率呈现逐年递增趋势［1］。为提高乳腺癌临床诊断敏感度，提升病人生存时间，其诊断和预测指标越来越受到诸多专家关注。研究发现，25 羟维生素D（25-OHVD）通过抑制癌细胞增殖、诱导细胞凋亡、减少血管生成等降低癌症的危险性［2-5］。研究显示，骨钙素（OC）与25-OH-VD 与乳腺癌发病具有强关联性，由于OC 与25-OH-VD 与乳腺癌发病机制尚不清楚，对其作为乳腺癌的临床诊断和预测指标存在较大争议［6-7］。该研究通过探讨25-OH-VD 和OC 等指标与乳腺癌病人影像评估风险的关联，为乳腺癌临床诊疗提供理论参考。

1 资料与方法

1.1 一般资料自2017 年6 月至2018 年12 月，就诊于上海市宝山区罗店医院的乳腺癌病人共纳入108 例，年龄为（46.53±6.26）岁，其中包括53 例绝经前妇女（42.68±5.44）岁和55例未使用激素治疗的绝经后妇女（51.39±7.08）岁，所有病人均经临床病理诊断为乳腺癌，对象排除标准：①患有动脉高血压、肾病、肝病等；②乳腺结节、乳腺囊肿等；③病人依从性差或不配合者。病人或其近亲属知情同意，本研究符合《世界医学协会赫尔辛基宣言》相关要求。

1.2 试剂和仪器

1.2.1 实验室检查 采用真空管采集静脉血样，将样品以3 000 r/min离心10 min，将得到血清等分试样并储存在-80 ℃直至一次测定。血糖（GLU），三酰甘油（TG），总胆固醇（TCHO），高密度脂蛋白胆固醇（HDL-C）和25-OH-VD通过使用Roche Cobas分析仪进行检测。通过化学发光免疫测定法（immulite analyzer，siemens medical solutions USA，Malvern，PA）测量OC。

1.2.2 乳房X线片密度 使用GE Healthcare Senographe 2000D（GE Healthcare，Chicago，IL）测定数字乳房X线照相术。选择乳房X线照片上四个视图，右侧和左侧乳房的颅尾侧和内侧斜视图中临床测量乳腺密度。

1.3 方法采用病例对照方法，根据密度的范围和类型采用Wolfe的实质模式将MBD分为四个实质模式：N1-非密集，没有可见的管道；P1-导管突出占据不到四分之一的乳房；P2 突出的导管模式占据乳房的四分之一以上；Dy 型，以结缔组织增生为主的乳腺，乳腺的密度增高、致密。这些模式再次被分为低风险（N1 和P1）和高风险（P2 和Dy）模式，以高风险组乳腺癌病人为病例组，低风险组病人为对照组。对所有研究对象进行血清25-OH-VD、骨钙素等指标检测和信息采集。

1.4 统计学方法采用R 3.4 统计软件进行数据分析。计量资料以表示，两组间比较采用t检验；计数资料以相对数或率表示，比较采用χ2检验或Fisher 确切概率法；定量变量间采用Pearson 相关性分析进行检验，P＜0.05 为差异有统计学意义。根据WHO 标准分为正常体质量指数（BMI＜25 kg/m2）和超重或肥胖（BMI＞25 kg/m2）。以乳腺癌病人影像学风险模式为因变量，以年龄、BMI、腰围、SBP 等为自变量，采用logistic 回归分析乳腺癌病人影像学风险模式的影响因素，以纳入标准为0.05，排除标准为0.10，以向前法选取变量。

2 结果

2.1 一般情况研究共纳入53例绝经前和55例未使用激素治疗的绝经后妇女。绝经前、后病人OC、25-OH-VD 的差异有统计学意义（P＜0.001）；绝经前后在腰围、收缩压、足月妊娠次数等差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 绝经前后病人一般情况分析

2.2 两组病人的检验结果比较绝经前高、低风险组的年龄、BMI、腰围、GLU、TG 等指标差异无统计学意义（P＞0.05）。绝经后，低风险、高风险病人的OC 和25-OH-VD 差异有统计学意义（P＜0.001）；绝经后低风险和高风险组间年龄、腰围、GLU、TG 等指标差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 高低风险组病人检测指标分析

2.3 检测指标的相关性分析采用person 进行双变量间的相关性分析，绝经前病人中，25-OH-VD 和OC 的相关性检验差异有统计学意义（r=-0.28，P=0.041）；绝经后25-OH-VD 和OC 的相关性检验差异有统计学意义（r=-0.56，P=0.010）。见表3。

表3 绝经前后各项指标间的相关性分析

2.4 多元logistic 分析logistic 回归分析显示，25-OH-VD（β=-0.547，P=0.004）和OC 浓度（β=0.180，P=0.002）与乳腺癌病人影像学风险模式有关。未发现年龄、BMI、腰围、TG、TCHO 等与乳腺癌病人影像学风险模式有关（P＞0.05）。见表4。

表4 绝经后乳腺癌病人影像学风险模式的logistic分析

3 讨论

研究发现，25-OH-VD 和OC 水平在绝经后乳腺癌病人中呈明显的相关性，具有乳腺癌高风险绝经妇女血清的25-OH-VD 表达更低，而OC 表达水平明显升高。目前诸多研究仍未发现OC 与乳腺密度之间的关系［8-9］。此结果为绝经后妇女乳腺癌风险评估提出了新角度。

25-OH-VD 除了具有内分泌作用，还具有广泛的免疫原性和抗增殖作用［10-11］。研究结果显示，25-OH-VD 缺乏与乳腺癌、前列腺癌和结肠癌的发病率增加有关［12-13］。诸多研究发现，血清维生素含量低水平乳腺癌妇女的总体存活率和无病生存期较差［14-15］。目前所提出的25-OH-VD 参与调节癌症发生发展的机制包括上调细胞之间依从性和信号传导，促进细胞增殖的接触抑制、分化、细胞周期稳定化，并促进细胞凋亡，抗血管生成和糖原合成酶激酶3（GSK-3）的下调，这会降低结肠直肠癌，乳腺癌，前列腺癌等癌细胞的体外增殖［16］。如果与特定癌症类型存在明显的相关性，25-OH-VD 及其代谢物可用作侵袭性的非特异性标志物。正常的25-OHVD 水平不仅有利于降低恶性肿瘤的发病率，而且有益于多种健康状况，例如自身免疫疾病，感染和慢性疾病等［17-18］。基于人群的大数据分析表明，血清25-OH-VD 水平与乳腺癌风险呈负相关，并呈浓度依赖性［19］。研究发现，高BMI 和低维生素D 水平之间存在相关性［20］。该研究病例组和对照组病人进行BMI 匹配，因此，限制了BMI 作为混杂因素的影响。

维生素D 在钙稳态，骨骼代谢方面同样起着至关重要的作用。而骨代谢的水平与肿瘤的发生发展和预后有明显的相关性。OC 是一种维生素D 相关蛋白，由成骨细胞释放，不仅在成骨细胞与破骨细胞相互作用和骨吸收方面具有潜在作用，同时在代谢方面也发挥作用。有研究发现，OC 与维生素D之间存在负相关［21］。但有学者指出，血清未羧基化的OC 与25-OH 维生素D 水平呈正相关［22］。通过小鼠模型验证发现Leydig 细胞系（MA-10）中CYP2R1表达促进25-OH-VD 的产生［23］，可能与成骨细胞产生的OC 通过受体GPRC6A 刺激Leydig 细胞产生蛋白偶联受体有关。但目前OC 与乳腺癌的相关性尚未有明确报道，也没有发现OC 与乳房密度风险评估的直接相关证据。

综上所述，在乳腺癌病人中25-OH-VD 与OC 存在负相关，并在绝经后乳腺癌病人的影像学风险评价中具有重要临床意义，有望成为乳腺癌风险评估的辅助诊疗指标。