肺结核早期进行结核感染T细胞检验结合结核菌素试验在临床诊断中的作用

温晓萍（广东省惠州市职业病防治院,广东 惠州 516001）

“肺结核”是一种临床常见、具有一定传染性的呼吸系统疾病，主要病因是结核分枝杆菌感染，对患者的生活、工作均造成严重影响[1]。流行病学显示，肺结核在我国各类传染疾病中，发病数与死亡数均高居第二位。糖尿病、尘肺病、免疫力低下、HIV感染者是肺结核易感人群，需要每年做结核病检查，做到早发现、早治疗[2]。肺结核的临床检查、诊断主要采用影像学检查，例如胸部X线检查、CT检查等[3]。除此之外，细菌学检查、分子生物学检验、病理学检查、免疫学检查等，在临床诊断肺结核中也有非常好的应用，可以提高肺结核的整体检出率与诊断准确率[4]。结核感染T细胞检验与结核菌素试验如今在临床诊断肺结核中有广泛应用，并且取得了良好的诊断效果[5]。该检查操作简单、费用低，对患者影响小，容易被患者接受，且无辐射伤害，适用范围广。但是，由于肺结核患者的年龄、病情严重程度不同，加上部分患者合并其他肺部疾病、重要组织器官疾病，可能对检查结果造成干扰，降低诊断准确性[6]。因此，对肺结核患者进行单独的结核感染T细胞检验或结核菌素试验，都比较容易出现误诊、漏诊，因此考虑联合检验，可提高诊断准确性[7]。本次研究中，对87例2020年5月-2021年5月期间医院收治的疑似肺结核患者进行结核感染T细胞检验、结核菌素试验，探究结核感染T细胞检验与结核菌素试验联合诊断对肺结核早期临床诊断的作用，报道如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选择医院收治的87例疑似肺结核患者进行研究（时间2020年5月-2021年5月），对患者先后进行结核感染T细胞检验、结核菌素试验。87例患者中，男性、女性患者数量分别为47例和40例。其中患者最大年龄者68岁，最小年龄者28岁，年龄平均值为（48.67±2.64）岁。纳入标准：①疑似肺结核患者均通过痰结核分枝杆菌检验进行肺结核鉴别诊断；②患者及家属知情并同意参加研究，对本次研究认可，签署知情同意书；③患者病情稳定，精神状况良好；④研究经医学伦理委员会审核批准。排除标准：①病理学检验确诊为恶性肿瘤者；②患者患有精神疾病，或有严重认知障碍；③合并呼吸系统感染性疾病；④依从性差，不愿配合、参加研究者。

1.2 方法 患者均接受结核感染T细胞检验与结核菌素试验，以痰细胞结核分枝杆菌培养为“金标准”。进行检验前，由医生对患者做病情介绍，并解释、说明结核感染T细胞检验与结核菌素试验的具体操作、意义、作用、注意事项及费用等，并征得患者同意。

1.2.1 结核感染T细胞检验 使用北京万泰试剂盒，使用空白对照管N管和含有MTB RD1基因表达的CFP10和ESAT6刺激源的T管以及含有对哺乳动物T淋巴细胞具有普遍刺激的植物血凝素PHA。使用肝素锂采集受检患者的全血，分装1ml到N、T、P培养管，培养20-24小时，使用酶联免疫法检测培养后血浆中INF-γ含量来分析受试者体内是否存在MTB致敏的T淋巴细胞。结果判断规则：①N≥5000或N＜5000且（T-N＜14或T-N＜N/4）为不确定。②N＜5000且（T-N≥14且T-N＞N/4）为阳性。③N＜5000且（T-N＜14或T-N＜N/4）且P-N≥20为阴性。

1.2.2 结核菌素试验 使用5IU人型纯蛋白衍生物，对患者进行皮内注射，对患者进行注射后72h观察，观察局部硬结、红晕。红晕、硬结直径≥0.5cm，为阳性。仅有针眼大小红点或红肿，硬结直径＜0.5cm，为阴性。

1.2.3 痰细胞结核分枝杆菌培养 患者自己留痰，留取晨间痰、即时痰和夜间痰，作为痰液样本。样本在带螺旋的塑料痰盒放置并冷藏送检。选择结核分枝杆菌培养基，做好样本编号、填写患者信息后，将4%氢氧化钠溶液6-10mL加入检验样本，进行0.5-1.0min的振荡处理，放置在室温下静置15min。将预处理后的0.1mL痰稀释液在培养基中接种，并放置在37℃环境中孵育。观察记录接种后的痰结核分枝杆菌培育情况，从接种3-7d后开始。培养基上的菌落通过染色处理观察分析是否为结核分枝杆菌。菌落占培养基斜面面积超过1/4则认定为阳性。连续观察至第8周，培养基上依然无菌落生长，视为阴性。

1.3 观察指标 对比单独进行结核感染T细胞检验、结核菌素试验，以及联合检验对肺结核早期诊断的准确性。标准为痰结核分枝杆菌培养，对阳性、阴性结果进行统计。计算诊断符合率、灵敏度、特异度。

1.4 统计学处理 使用SPSS25.0统计学软件对研究中获取数据资料进行统计分析，计量资料采用(±s)形式表示，进行t检验；计数资料采用[n(%)]形式表示，进行χ2检验，P＜0.05表示数据比较，差异有统计学意义。

2 结果

87例疑似肺结核患者通过痰细胞结核分枝杆菌培养，阳性病例56例、阴性病例31例。结核感染T细胞检验诊断结果：阳性52例，阴性35例，其中真阳性48例、真阴性27例，假阳性（误诊）4例和假阴性（漏诊）8例。结核菌素试验结果：阳性50例，阴性37例，其中真阳性47例、真阴性28例，假阳性（误诊）3例和假阴性（漏诊）9例。联合检验结果：阳性56例，阴性31例，其中真阳性54例、真阴性29例，假阳性（误诊）和假阴性（漏诊）各2例。见表1。

表1 肺结核早期诊断中不同检验方式诊断准确性比较[n(%)]

3 讨论

结核病是结核分枝杆菌感染引起的一种较为常见的呼吸系统疾病，具有传染性，疾病危害范围广，社会危害大[8-10]。结核病早期诊断对于及时采取有效治疗措施，阻止病情发展，降低传染性有重要作用。影像学检查虽然在结核病的鉴别诊断中有较高的准确性，但是检查费用高，且无法对病情的严重程度及疾病类型进行准确判断，应用有限制。痰结核分枝杆菌培养是目前临床上诊断结核病的“金标准”，但是诊断所需时间比较长[11-13]。结核感染T细胞检验、结核菌素试验目前在临床诊断结核病中应用逐渐增多，诊断准确性方面存在一些差异。徐丽丹[14]等的研究中对儿童结核感染患儿进行结核感染T细胞斑点试验与结核菌素试验，结果发现结核感染T细胞检验的整体效果好于结核菌素试验。张小军[15]等的研究中指出，结核感染T细胞检验联合结核菌素试验对于肺结核早期诊断有很高的价值，联合检验的敏感度高，假阴性率低，与本次研究结果相近。本研究中联合检验的诊断准确性明显高于单独检验。分析原因为：结核菌素试验使用纯蛋白衍生物，采用皮内注射法观察注射局部的红肿、硬结程度，能为接种卡介苗提供依据[16-19]。该检验操作简单、方便，但是因为检验成分是结核菌素纯蛋白衍生物，其中抗原成分与卡介苗、肺结核分枝杆菌相同，使得部分接种过卡介苗人群或者免疫低下、使用过免疫抑制剂的人群发生交叉反应，出现假阳性诊断结果[20-21]。结核感染T细胞检验通过人体结核杆菌特异性抗原进行刺激，对人体T淋巴细胞反应应答进行了解，通过培养后检测T淋巴细胞浓度，确定受检者是否被结核分枝杆菌感染。检验时间短，且不会受到卡介苗的影响[22]。

本研究中，联合检验的诊断准确性明显高于单独检验，说明联合进行结核感染T细胞检验与结核菌素试验可以提高对肺结核的诊断准确性。

综上所述，肺结核早期诊断中联合应用结核感染T细胞检验与结核菌素试验具有重要作用，值得推广使用。