德谷胰岛素联合GLP-1 RAs对2型糖尿病患者Omentin-1、VaspinRBP4水平的影响

赵传志 陈凤玲

2型糖尿病是成年人常见的糖尿病类型，该疾病是由体内胰岛素分泌不足或人体不能有效利用胰岛素等多种原因造成的，从而引起血糖水平升高[1]。高血糖环境下，会使大血管、微血管、神经等疾病发生病变，进而使心脏、肾脏、眼睛等器官损害[2]。遗传、年龄、种族、生活方式等因素都可导致2型糖尿病，到目前为止，我们还无法控制人体内的遗传因素[3]。然而，我们可以通过干预环境因素来降低2型糖尿病的患病率。高热量摄入和不合理的饮食结构会引起肥胖，随体重的上升，体育锻炼的减少，应激包括紧张、劳累、分娩、手术、精神刺激、使用升高血糖的激素等[4]。由于上述诱因，胰岛素抵抗会逐渐增加，从而引起胰岛素分泌不足，最终导致2型糖尿病的发生[5]。因此，本文探讨德谷胰岛素联合胰高血糖素样肽-1受体激动剂(GLP-1 RAs)利司那肽对2型糖尿病患者网膜素-1(Omentin-1)、丝氨酸蛋白酶抑制剂(Vaspin)、视黄醇结合蛋白4(RBP4)水平的影响。

1 资料与方法

1.1 一般资料 选取2019年7月至2020年7月我院收治的2型糖尿病患者172例，随机分为GLP-1组和联合治疗组，每组86例。GLP-1组：男45例，女41例；年龄39～59岁，平均年龄(46.55±9.50)岁；病程1～5年，平均病程(2.85±1.90)年。联合治疗组：男46例，女40例；年龄42～58岁，平均年龄(47.50±7.60)岁；病程2～8年，平均病程(4.75±2.85)年。2组患者一般资料比较差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。患者、家属均知情且签署知情同意书。

1.2 纳入与排除标准

1.2.1 纳入标准：患者均符合《中国2型糖尿病防治指南(2017年版)》[6]中的诊断标准；餐后2 h血糖(2 hPBG)≥11.10 mmol/L；患者均为初发，初次确诊；经期未接受药物治疗。

1.2.2 排除标准：合并肝、肾、心功能等严重障碍者；对德谷胰岛素过敏者；合并严重急慢性感染、自身免疫性疾病者；近6个月做过重大手术者。

1.3 药物来源 利司那肽[赛诺菲(北京)制药有限公司]规格：20 μg：0.10 mg/ml×3 ml支。德谷胰岛素[诺和诺德(中国)制药有限公司(Novo Nordisk A/S)]规格3 ml：300单位。

1.4 方法

1.4.1 用药:GLP-1组用利司那肽治疗，起始剂量为10 μg，1次/d，连续治疗14 d。维持剂量在第15天开始，1次/d，20 μg/次。联合治疗组在GLP-1组基础上于每晚睡前皮下注射德谷胰岛素，起始剂量为0.1～0.2 U/Ag,第2天根据患者FBG水平调整使用剂量，每2～4天剂量增减(2～4 U)，连续使用12周。

1.4.2 Omentin-1、Vaspin、RBP4、CA199、CA125水平检测:采用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测，抽取患者治疗前后1 d 3 ml清晨空腹静脉血，5 cm离心半径、3 000 r/min转速下离心10 min，分离血清，-80℃保存。设置10个标准孔并就让相应水平标准品，设置1个空白孔及若干待测样品在10 μl待测样品中加入40 μl 样本稀释液，封板膜封板，置于37℃水浴箱温育30 min，清洗反应板5次，每次间隔30 s，拍干，在除空白孔以外的各孔中加入酶标液50 μl，封膜温育30 min，清洗反应板5次，每次间隔30 s，拍干，在各孔中加入显色A液、B液各50 μl，轻轻震荡混匀，37℃避光环境下显色15 min，在反应孔内加入终止液50 μl/孔以终止反应，450 nm波长测量每孔吸光度，查出Omentin-1、Vaspin、RBP4、CA199、CA125水平表达。

1.4.3 FBG、2 hPBG、HbA1c水平检测:2组患者治疗前后空腹静脉血3 ml，取血液3 000 r/min，半径5 cm离心10 min，分离血清-80℃保存待检。采用糖化血红蛋白自动分析仪检测电泳法取EDTA-K2抗凝血40 μl 注入160 μl的溶血素溶液中,37℃水浴15 min后,各孔中加入溶血。液10 μl于加样梳中,经过染色、脱色、电泳、烘干,取出薄膜进行扫描得到结果,扫描时间约为1 h。将抗凝血放入样品架上,得到结果。

1.4.4 HOMA-β、HOMA-IR水平检测:采用Botnia钳夹术检测，空腹12 h检查,测量身高、体重,排尿后躺在检查床，30 min后检测。患者双侧前臂行静脉穿刺,将前臂置于60℃恒温仪,确保静脉血动脉化,静脉通道由三通管组成，一侧试验取血，另一侧注入胰岛素和20%葡萄糖溶液，关闭输液器采血，停止采血时缓慢静滴0.9%氯化钠溶液。

1.5 临床疗效评价 显效：临床症状基本正常，HbA1c减少率>1%，血糖恢复正常；有效：临床症状有所好转，HbA1c减少率为0.5%～1%；无效：临床症状、HbA1c和血糖无任何效果，甚至更严重。显效+有效=总有效。

1.6 不良反应情况 统计2组患者不良反应低血糖、皮下脂肪营养不良、过敏、体重增加等发生情况。

2 结果

2.1 2组患者Omentin-1、Vaspin、RBP4水平比较 2组治疗前Omentin-1、Vaspin、RBP4水平比较差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后2组Omentin-1水平明显升高，Vaspin、RBP4水平明显降低(P<0.5)；与GLP-1组相比，联合治疗组Omentin-1水平明显升高，Vaspin、RBP4水平明显降低(P<0.05)。见表1。

表1 2组患者Omentin-1、Vaspin、RBP4水平比较

2.2 2组患者2 hPBG、HbA1c、FBG水平比较 治疗前2组患者2 hPBG、HbA1c、FBG水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后2组患者2 hPBG、HbA1c、FBG水平明显降低(P<0.05)；与GLP-1组相比，联合治疗组2 hPBG、HbA1c、FBG水平明显下降，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 2组患者2 hPBG、HbA1c、FBG水平比较

2.3 2组患者HOMA-IR、HOMA-β水平比较 治疗前HOMA-IR、HOMA-β水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后2组患者HOMA-IR水平明显降低，HOMA-β水平明显升高(P<0.05)；与GLP-1组相比，联合治疗组HOMA-IR水平明显下降，HOMA-β水平明显上升，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 2组患者HOMA-IR、HOMA-β水平比较

2.4 2组患者CA125、CA199水平比较 2组患者治疗前CA125、CA199水平差异无统计学意义(P>0.05)；治疗后CA125、CA199水平明显降低(P<0.05)；与GLP-1组相比，联合治疗组CA125、CA199水平明显降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表4。

表4 2组患者CA125、CA199水平比较

2.5 2组患者疗效比较 与GLP-1组相比，联合治疗组治疗总有效率较高，差异有统计学意义(P<0.05)。见表5。

表5 2组患者疗效比较 n=86,例

2.6 2组患者不良反应发生情况比较 与GLP-1组相比，联合治疗组总不良反应较高，但差异无统计学意义(P>0.05)。见表6。

表6 2组患者不良反应发生情况比较 n=86,例

3 讨论

糖尿病是常见的内分泌代谢疾病，是继肿瘤和心脑血管疾病后严重危害健康的重要的慢性非传染性疾病[7]。肾脏疾病、视力障碍、心脏病、神经病变、周围血管疾病等并发症是引起糖尿病患者残疾、死亡的重要原因[8]。2型糖尿病以长期高血糖为特征的代谢综合征，2型糖尿病和1型糖尿病的主要区别在于1型糖尿病患者完全缺乏胰岛素，需要依靠注射胰岛素维持血糖终身。而2型糖尿病的病因是体内胰岛B细胞功能下降，引起胰岛素分泌不足，口服降糖药可以控制血糖。

德谷胰岛素是新型长效人胰岛素类似物，去除人胰岛素B链第30位的苏氨酸，通过B29位的赖氨酸上的L-γ-谷氨酸连接子与脂肪二酸侧链连接，经皮下注射后，以稳定聚六聚体存在，慢慢讲胰岛素单体释放进入血液[9]。且具有稳定的药效学特性，其氨基酸序列与人胰岛素有较高的同源性，作用时间较长，血药浓度稳定，释放较慢，给药时间和部位灵活，药物代谢不会受到肝肾功能的影响。

GLP-1由30或31个氨基酸残基组成是回肠末端、结肠神经内分泌L细胞分泌的[10]。GLP-1(7-36)NH2和GLP-1(7-37)有两种亚型，前者稳定性较好，GLP-1受体不仅存在于细胞中，还存在于胃、脂肪组织、骨骼肌、心脏等细胞中[11]。利司那肽属于GLP-1 RAS的一种，它含有44个氨基酸多肽，在扩链素-4的基础上将第38位的脯氨酸去掉了，6个赖氨酸和丝氨酸连接在第39位[12]。与GLP-1的同源性为50%。修饰后的结构将DPP-4的降解能力有所提高，使其半衰期延长至3～4 h，是目前唯一每天服用1次即可控制全天餐侯血糖的药物[13]。本研究显示联合应用德谷胰岛素、利司那肽控制基础血糖是新的给药方式，可降低低血糖风险、体重减轻及减轻胰岛素用量的优势，效果显著。

Omentin-1由网膜脂肪组织的血管基质细胞合成分泌，通过促进脂肪细胞的胰岛素介导的葡萄糖转运、Akp的磷酸化水平来改善胰岛素敏感性[14]。李娜等[15]研究显示，血清Vaspin和患者病程与DN的发生、发展紧密相连，可能会成为治疗糖尿病的潜在靶点。RBP4编码的单一肽链蛋白质由184个氨基酸残基、3个二硫键组成，是一种与2型糖尿病、肥胖、胰岛素抵抗相关的新型脂肪因子[16]。CA199常常用于胰腺癌的预后评价、诊断，CA125常用于卵巢癌的诊断、筛查、预后评价,但两者在其他的恶性肿瘤、良性疾病中也显示上升。曾毅等[17]研究显示，肿瘤标志物呈高表达可能是因为血糖水平上升导致的，所以对T2DM患者进行控制血糖，可以降低恶性肿瘤的发生，HbA1c是红细胞中的血红蛋白与血清中的糖类相结合的产物。通过持续、缓慢、不可逆的糖化反应而成，含量的多少取决于血糖浓度以、血糖与血红蛋白接触时间，与患者是否空腹、抽血时间等因素无关[20]。空腹血糖(FBG)指在前1 d空腹第2天早餐前采的血，检测的血糖值，为糖尿病常用的检测指标[18]。HOMA-IR可以用来评估个体胰岛素抵抗。HOMA-β可以评价个体的胰岛细胞功能的指标，其指数是100%显示是正常个体，糖尿病患者胰岛β细胞功能下降则数值随之下降，上升时数值也随之上升[19]。本研究显示，与GLP-1组相比，联合治疗组Omentin-1、HOMA-β水平明显升高，Vaspin、RBP4、2 hPBG、HbA1c、FBG、HOMA-IR水平明显降低，表明德谷胰岛素联合GLP-1 RAs治疗2型糖尿病患者可有效降低血糖，改善胰岛细胞功能，效果显著。

综上所述，德谷胰岛素联合GLP-1 RAs利司那肽治疗2型糖尿病患者可有效升高Omentin-1水平，降低Vaspin、RBP4、血糖水平及不良反应发生率，效果显著。