HPV-DNA分型检测在宫颈癌前病变早期筛查中的应用价值

高华荣

连云港市赣榆区人民医院妇科，江苏 连云港 222100

宫颈癌是临床上常见的妇科恶性肿瘤之一，近些年其发病率仍持续上升，且有年轻化趋势，对女性患者身心健康造成严重影响［1］。有研究证实，在宫颈癌前病变（CIN）早期及时发现、治疗对改善宫颈癌患者预后、延长生存周期有着重要价值［2］。目前CIN早期筛查方法仍无明确标准，有研究显示，高危型人乳头状瘤病毒（HPV）感染是引发宫颈癌的重要因素，尤其是HPV16、18型，因此HPV-DNA分型检测在筛查早期CIN中有着良好效果［3］。本研究旨在探讨HPV-DNA分型检测在CIN早期筛查中的应用价值，现将结果报告如下。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年5月—2020年5月连去港市赣榆区人民医院收治的疑似CIN需进行病理活检的429例患者为研究对象，纳入标准：（1）临床表现有CIN疑似症状者［4］。（2）生殖系统发育正常，月经期正常者。（3）近期无阴道用药史者。（4）无宫颈外科手术或盆腔放疗史者。排除标准：（1）有宫颈癌及CIN病史或放疗史者。（2）子宫切除者。（3）妊娠期妇女。患者年龄27～68岁，平均年龄（46.84±7.46）岁，孕次为0～4次，平均孕次为（2.54±0.44）次，主要临床表现：白带异常29例，异常阴道出血22例，性交痛5例，性交出血4例。体检结果：宫颈肥大9例，宫颈息肉11例，宫颈糜烂40例。本次研究经过医学伦理委员会批准，患者均知悉、同意并签署知情同意书。

1.2 方法

所有患者均接受HPV-DNA检测、细胞学检测及病理学检查。（1）HPV-DNA检测。于患者月经后5d，用无菌棉棒清除宫颈上黏液，使用宫颈标本采集刷在宫颈内1cm处，保持一定压力，顺时针旋转6圈左右，采集标本。将样本放入1mL生理盐水离心管中，4℃条件下保存待检。使用7500型荧光定量检测仪（生产厂家：美国ABI公司）检测HPV-DNA表达情况，由专职检验人员按照高危型HPV核酸检测试剂盒（生产厂家：凯杰生物工程有限公司）说明书内容严格操作，该试剂盒可以特异性识别HPV16及HPV18，同时能够检测出其他12种高危类型，检测出任意一种HPV型即为阳性，无HPV感染为阴性。（2）细胞学检测。按上述方式采集样本，制片染色后根据Bethesda分类系统阅片诊断［5］，包括：不典型腺细胞（AGC）、鳞癌（SCC）、无恶性病变或无上皮内病变（NILM）、意义不明的不典型鳞状细胞（ASCUS）、非典型鳞状细胞、低度鳞状上皮内病变（LSIL）、不典型鳞状细胞（ASCH）、高度鳞状上皮内病变（HSIL）。诊断结果为正常或NILM时为阴性，其余结果为阳性。（3）病理学检查。HPV阳性且细胞学检验结果≥ASCUS、HPV阴性且细胞学检验结果≥LSIL患者进行活检和阴道镜检查。若阴道镜下暴露充分且有病变位置异常则进行活检，若阴道镜下暴露不充分则取宫颈搔刮术。将阴道镜下所取宫颈标本或活检标本送至本院病理科进行制片诊断，病理结果按照WHO制定的宫颈肿瘤组织分类标准［6］分为：宫颈上皮内瘤变（CINⅠ级、CINⅡ级、CINⅢ级）、宫颈癌SCC及正常或慢性炎症，检测CINⅠ级及以上为阳性，正常或慢性炎症为阴性。同时，由另一位有丰富检验经验的病理师对结果复审，若不一致，将送至中国医学科学院进行最终诊断。

1.3 观察指标

（1） HPV-DNA、细胞学及病理学检测结果。（2）HPV-DNA检测对CIN早期筛查效果及对ASCUS人群分流效果，以病理学诊断结果CINⅡ级及以上为金标准，计算HPV-DNA检测对总人群和ASCUS人群CINⅡ级及以上检出的灵敏度、特异度、PPV、NPV及95%CI。

1.4 统计学方法

采用SPSS22.0软件进行统计分析，计量资料以均数±标准差（s）表示，组间比较采用t检验，计算HPV-DNA检测的特异度、灵敏度及95%CI，以P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 HPV-DNA、细胞学及病理学检测结果

429例受试者中，病理学检查结果：阳性（CINⅠ级及以上）共60例，其中CINⅠ级18例、CINⅡ级16例、CINⅢ级21例、SCC5例，阴性369例均为炎症。细胞学结果为阳性（除正常或NILM外其他检验结果）106例，其中ASCUS42例、LSIL23例、HSIL15例、ASCH22例、AGC19例。HPV-DNA检查结果：阳性（有任意一种HPV）患者69例，其中HPV16阳性14例、HPV18阳性6例，其他类别阳性49例。

2.2 HPV-DNA检测对CIN早期筛查效果及对ASCUS人群分流效果

HPV-DNA检测对总人群CIN早期筛查效果为高危型HPV灵敏度95.21%，特异度为87.84%，HPV16/18类型合并检测灵敏度为65.88%，特异度为97.48%；对ASCUS人群分流效果为高危型HPV灵敏度为90.55%，特异度为78.24%，HPV16/18类型合并检测灵敏度为56.44%，特异度为95.67%，见表1。

表1 HPV-DNA检测对CIN早期筛查效果及对ASCUS人群分流效果

3 结论

近年来，宫颈癌发病率在全球范围内均呈现上升趋势，大多由初次生产年龄过早、性生活过早、不固定性伴侣等原因造成，这也是导致目前宫颈癌发病率年轻化的主要原因［7］。高危型HPV持续感染是宫颈癌发病的主要危险因素之一，由于HPV感染发生到CIN有一个漫长过程，因此临床上多通过早发现、早诊断来实现对CIN或宫颈癌的治疗和预防［8］。目前常用的诊断CIN方法包括宫颈刮片、液基细胞学检测、阴道镜检查、HPV检测［9］，其中HPV检测因操作便捷、费用低、受试者无不适感等原因，成为临床上较为常用筛选手段［10-11］。

本文研究结果显示，429例受试者经病理学检验CIN阳性有60例（13.99%），其中HPV16阳性14例、HPV18阳性6例，其他类别阳性49例，检出比例低于潘敏等［12］研究CIN阳性检出率16.09%，可能是由于本文研究对象年龄稍大有关。HPV-DNA检测对总人群CIN早期筛查效果中高危型HPV灵敏度达95.21%，特异度为87.84%，HPV16/18类型合并检测特异度达97.48%，但灵敏度仅65.88%，结果说明高危型HPV检验对CIN早期筛查效果更好，与潘敏等［12］研究结果相符。ASCUS是一种常见的宫颈细胞学异常，其既可以提示HPV感染、CIN出现，也可提示炎症、细胞衰退等状态，对ASCUS进行分流可以更好的预防CIN及宫颈癌。本研究显示，HPV-DNA检测对ASCUS人群分流效果中高危型HPV灵敏度达90.55%，特异度为78.24%，HPV16/18类型合并检测灵敏度为56.44%，特异度为95.67%，与张韶凯等［13］研究结果一致。本研究说明HPV-DNA分型检测在CIN早期筛查中有着很好的应用价值，且高危型HPV-DNA检测在CIN筛查及ASCUS分流中有着较高的灵敏度和特异度，临床效果更好。

综上所述，HPV-DNA分型检测对CIN早期筛查和ASCUS人群分流有着较高的灵敏度和特异度，有很好的临床应用价值。