我国部分省份不同阶段猪群CSF、PRRS及PR-GE抗体检测分析

刘晓东,袁 飞,刘红祥,陈 俭,孔宪好,杜元钊,陆慧君（1.吉林大学 动物医学学院/人兽共患病研究所,吉林 长春 1006；.动物基因工程疫苗国家重点实验室,山东 青岛 66000；.云南神农农业产业集团股份有限公司,云南 昆明 650000）

猪瘟（classical swine fever,CSF）、猪繁殖与呼吸综合征（porcine reproductive and respiratory syndrome,PRRS）及猪伪狂犬病（pseudorabies,PR）是影响我国养猪业生产的三大病毒性疾病,其均可导致母猪生产性能下降、流产、返情等繁殖障碍症状,仔猪感染后均会出现消化系统与呼吸系统损伤,生长受抑制甚至死亡。如何制定科学的免疫程序以及如何加强生物安全措施以有效地防控此3种疫病是现代养猪业的一大研究课题。本试验应用ELISA方法,对我国部分地区CSF、PRRS、PR等3种疫病在猪群不同阶段的抗体阳性率进行监测,并分析检测结果,为猪场制定合理的免疫程序以有效防控此3种疫病提供理论依据。

1 材料与方法

1.1被检猪血清样品2018年,收集部分省份临床免疫猪血清样本14 580份,涵盖各生长阶段猪群（公猪、母猪、后备母猪、仔猪、保育猪、育肥猪）。按照常规实验室方法分离血清,并于—20℃保存备用。

1.2主要试剂和仪器猪瘟ELISA抗体诊断试剂盒、PRRS ELISA抗体诊断试剂盒及猪伪狂犬病病毒GE抗体诊断试剂盒均购自美国IDEXX公司。酶标仪（型号为TECAN）,购自瑞士帝肯公司；离心机（型号为TGL-16）,购自湘仪公司；微量移液器、枪头、超净台等由本实验室提供。

1.3检测方法及结果判定按照美国IDEXX公司提供CSF、PRRS、PR-GE抗体检测试剂盒说明书进行操作,3种病毒抗体检测结果判定标准按说明书标注见表1。

表1 不同病毒抗体检测结果的判定标准

1.4数据处理样品检测结果应用Excel 2013进行统计学分析处理。

2 结果

2.1不同地区送检样品比例不同省份的送检样品中,福建省样品占比最高,为16.77%；其次为江苏省样品,占15.83%；其他省份占比为:广西12.26%、山东8.75%、云南7.97%、湖北7.33%、四川5.78%、河北4.57%、江西3.98%、海南3.02%、贵州2.29%、安徽2.02%、黑龙江1.95%、河南1.75%、吉林1.45%、山西1.34%、湖南0.85%、甘肃0.83%、浙江0.58%、辽宁0.46%、重庆0.22%（图1）,这与当各地客户养殖意识及物流运输有关。

图1 不同省份送检比例

2.2不同猪群样品比例送检样品中,母猪样品比例最高,为60.09%；保育猪次之为14.52%；育肥猪为10.02%；仔猪6.00%；公猪为5.03%；后备母猪最低为4.34%（图2）。由此可见,养殖公司对于母猪的关注度更高。

图2 不同阶段猪群送检比例

2.3CSF、PRRS及PR-GE抗体阳性率2018年,CSF抗体阳性率为78.84%,PRRS抗体阳性率为78.23%,PR-GE抗体阳性率为27.47%（图3）。

图3 CSF PRRS PR-GE抗体阳性率

2.4不同阶段猪群CSF、PRRS及PR-GE抗体阳性率CSF抗体阳性率公猪最高为91.67%,保育最低为57.00%；PRRS抗体阳性率育肥猪为91.31%,保育猪最低为50.02%；PR-GE抗体阳性率公猪最高为33.98%,后备母猪最低为19.17%（表2）。

表2 不同阶段猪群CSF、PRRS及PR-GE抗体阳性率%

2.5不同阶段猪群CSF平均阻断率及离散度不同阶段猪群CSF平均抗体分别为:仔猪为59.05%、保育猪为45.14%、育肥猪为55.17%、后备母猪为71.40%、母猪为70.75%、公猪为73.29%（图4）。不同阶段猪群CSF抗体离散度分别为:仔猪为0.46、保育猪为0.57、育肥猪为0.50、后备母猪为0.33、母猪为0.31、公猪为0.28（图4）。

图4 不同阶段猪群CSF抗体平均阻断率及离散度

2.6不同阶段猪群PRRS抗体及离散度不同阶段猪群PRRS抗体平均值分别为:仔猪为1.11、保育猪为1.38、育肥猪为1.89、后备母猪为1.70、母猪为1.48、公猪为1.41（图5）。不同阶段猪群PRRS抗体离散度分别为:仔猪为0.80、保育猪为0.73、育肥猪为0.43、后备母猪为0.52、母猪为0.60、公猪为0.65（图5）。

图5 不同阶段猪群PRRS抗体平均值及离散度

2.7不同阶段猪群PR-GE抗体及离散度不同阶段猪群PR-GE抗体平均值分别为:仔猪为0.67、保育猪为0.74、育肥猪为0.79、后备母猪为0.79、母猪为0.67、公猪为0.66（图6）。不同阶段猪群PR-GE抗体离散度分别为:仔猪为0.60、保育猪为0.46、育肥猪为0.42、后备母猪为0.46、母猪为0.59、公猪为0.62（图6）。

图6 不同阶段猪群PR-GE抗体平均值及离散度

2.8不同阶段猪群CSF抗体在不同区间的比例不阶段猪群CSF抗体在不同区间比例不同。阻断率＜40%时,比例最高为保育猪42.98%,育肥猪次之为27.11%,公猪最低为8.33%；阻断率为40%～70%时,比例最高为保育猪为35.76%,育肥猪次之为34.91%,公猪最低为22.04%；阻断率为70%～90%时,比例最高为公猪为54.30%,母猪次之为48.48%,保育猪最低为19.73%；阻断率＞90%时,比例最高的后备母猪为20.71%,公猪次之为15.32%,保育猪最低为1.53%（图7）。

图7 不同阶段猪群CSF抗体在不同区间比例

2.9不同阶段猪群PRRS抗体在不同区间比例不阶段猪群PRRS抗体在不同区间比例不同。S/P值＜0.4时,比例最高为保育猪49.98%,仔猪次之为29.89%,育肥猪最低为8.69%；S/P值在0.4～2.5时,比例最高为母猪为72.19%,育肥猪次之为69.39%,保育猪最低为40.37%；S/P值为2.5～3.5时,比例最高为公猪为21.66%,后备猪次之为20.82%,仔猪最低为7.80%；S/P值＞3.5时,比例最高为公猪为0.79%,母猪次之为0.69%,仔猪最低为0.11%（图8）。

图8 不同阶段猪群PRRSV抗体在不同区间比例

2.10不同阶段猪群PR-GE抗体在不同区间比例不阶段猪群PR-GE抗体在不同区间比例为:S/N值＜0.6时,比例最高为公猪33.98%,仔猪次之为32.90%,后备母猪最低为19.17%；S/N值在0.6～0.7时,比例最高为保育猪为2.94%,育肥猪次之为2.31%,后备母猪最低为1.24%；S/N值＞0.7时,比例最高为后备母猪为79.59%,育肥次之为76.56%,公猪最低为64.74%（图9）。

图9 不同阶段猪群PR-GE抗体在不同区间比例

3 讨论

本研究对2018年我国部分地区不同阶段猪群（公猪、母猪、后备母猪、仔猪、保育猪、育肥猪）的14 580份血清样品进行了CSF、PRRS与PR等3种病毒病的抗体监测。所检样品中母猪比例最高,后备猪最低。不同区域福建最高,其次为江苏。由此可见,我国猪场对母猪健康的关注度最高,送检最频繁,建议猪场管理人员还需加强对其他阶段猪群尤其后备猪的健康监测,保证猪场稳定生产。福建与江苏送检样品多原因为当地养殖意识好,猪场规模化程度高,疫病防控意识强有关。

CSF作为猪场防控的基础性疫病,其抗体的检测也备受关注,检测发现CSF抗体平均阳性率为78.84%,不同阶段猪群中公猪阳性率最高,保育最低。离散度保育猪最高。保育猪抗体水平较低可能与免疫后受母源抗体干扰有关[1],我们对仔猪进行CSF防控时要按照CSF抗体的消长规律进行,切勿盲目免疫。母猪、公猪及后备母猪抗体水平较高,均达到85%,此结果具有良好保护率,这与王琴[2]的研究结果相一致,但其他阶段可能受到隐性感染或与猪群存在免疫抑制有关。离散度代表个体抗体的差异性,它是判断猪群是否稳定的一个重要指标,肉猪离散度一般要求在25%以下,种猪离散度一般要求在20%以下[3],通过检测发现我国的CSF抗体离散度均高于此数值,应引起高度重视,此结果也说明我国很多区域对猪瘟的防控还需进一步加强。

通过对PRRS抗体与离散度的检测发现,我国整体猪群PRRS比较稳定,育肥猪、母猪及后备母猪防控效果较好,但要关注保育猪的防疫,因为保育猪抗体阴性率高达49.98%,较其他阶段猪群比例高。但由于PRRS抗体检测ELISA试剂盒不能有效区分疫苗抗体和感染抗体,因此这对结果分析存在一定的局限性[4]。据报道,不同厂家生产的PRRS疫苗免疫效果不同；不同毒株型的PRRS疫苗免疫效果也不同[5-6]。PRRS为影响我国养猪业最严重的疫病之一,造成蓝耳病不能得到有效控制的一个重要原因就是蓝耳病毒的快速变异[7],因此我们应对其防控及净化高度重视,建议养殖者根据猪场抗体水平、流行毒株情况,合理科学安排免疫程序,并要结合生物安全措施尽可能达到蓝耳病的净化要求。

PR主要引起仔猪死亡、神经症状及母猪产死胎、木乃伊胎及反情等症状,另外,PR具有疱疹病毒科病毒能建立潜伏感染的特性,猪在耐过PR感染后能在体内建立终生潜伏,且不表现临床症状[8],近几年全国各地均有点状散发。本试验结果表明,PR-GE抗体阳性率为27.47%,此结果与覃庆玉等[9]研究结果（未免疫猪场PR-GE抗体抗阳性率为21.43%）相一致；不同阶段PR-GE抗体阳性率公猪最高为33.98%,后备母猪最低为19.17%。因此,在未来的防疫中我们要对PR在公猪的流行更加警惕,以防因公猪精液带毒而影响全部猪群。另外,GLOSTER等[10]试验研究表明,PR的暴发与空气传播有关,其空间传播距离大于2 km,因此,在对PR的防控中一定要做好生物安全及灭鼠防蚊工作。

纵观CSF、PRRS、PR等3种疾病抗体均在保育猪较低,推测其原因:（1）保育猪阶段因母源抗体的消减本身抗体处于最低点,疫苗免疫时间不合理极易造成抗体空白期；（2）保育猪阶段为猪体机能不完善时期,容易受到各种疾病的侵害,疾病的侵袭会造成猪群抵抗力的下降；（3）保育猪阶段正是仔猪断奶后第1次应激,饮食环境、饲养环境的改变容易造成对猪体应激而引起体质下降造成抗体偏低。针对此现象建议对保育猪采取以下措施:（1）对保育猪进行免疫时应进行抗体检测,合理化免疫,减少抗体空白期；（2）加强生物安全管理,保证猪群健康,减少疾病对保育猪的侵袭,同时添加增强体质的中药或多维氨基酸等；（3）对仔猪转为保育猪时尽量减少应激,在转栏过程中要提高保育栏温度减少转栏应激,饲料的转换要逐步完成不能过快,减少所有应激环节才能使保育猪体况更好,抗体更高。

随着我国养殖业的不断发展,猪病毒性疫病的防控压力越来越大,疫病危害也越来越重,一种疫病多个亚型的出现也给我们防控带来更多困难。因此猪场管理者一定要对猪场进行定时监测跟踪,根据监测结果进行科学防疫,进一步完善生物安全体系,培养种群净化思维才能有效控制疫病的流行与发生。