血清TK1、SF、CA199联合检测在非小细胞肺癌诊断中的应用价值

杨 雪，许亚丽，张 蕾，古爱虎

在我国，肺癌发病率和病死率逐年上升，占癌症死亡比例达20%以上[1]。非小细胞肺癌(nonsmall cell lung cancer,NSCLC)发生早期无特异性临床症状，当确诊时大多处于中晚期，且容易发生侵袭或转移，患者5 年生存率较低[2]。胸苷激酶1(thymidine kinase 1,TK1)是一种DNA 修复酶，最初是在胎儿组织中被发现[3]。TK1 参与DNA 合成与修复，与细胞增殖有关，其可反映肿瘤治疗疗效和复发风险，在多种实体肿瘤中呈现高表达，这可能与肿瘤细胞转化存在关联[4]。TK1作为常见的肿瘤标志物，其在血清或胸腔积液中的变化在早期肺癌筛查中具有重要意义。血清铁蛋白(serum ferritin,SF)一种以无机铁化合物为辅基的大分子糖蛋白，通常在肿瘤患者体内合成活跃，使得浓度急剧增加，常作为肿瘤的血清标志物[5]；越来越多的研究提示SF 对肺癌的诊断灵敏度较高[6]。糖类抗原199(carbohydrate antigen 199,CA199)以唾液黏蛋白的形式存在于血清中，在正常情况下，外周血中含量极低，但当发生肿瘤细胞异常分化时，血清CA199水平会明显上升[7]。CA199 在NSCLC 患者癌组织中的表达明显多于癌旁组织[8]，这对早期诊断肺癌有重要价值。NSCLC 患者早发现、早诊断及早治疗，已成为提高疾病疗效、降低病死率和提高生存质量的关键。血清肿瘤标志物检测作为非侵袭性检查，为早诊断早治疗提供了可能，单一指标检测难满足临床精准诊断，且三项指标联合检测的研究尚缺乏。因此本研究旨在探讨血清TK1、SF、CA199联合检测对于NSCLC诊断的临床应用价值，现报道如下。

1 材料与方法

1.1 一般资料 选取2017 年1 月-2021 年12 月芜湖市第一人民医院收治的90例NSCLC 患者作为研究对象。纳入标准：①均经过胸部CT 检查及病理学检查确诊；②在获取血清实验检测前患者无放化疗史。排除标准：①严重心肝肾疾病；②合并其他恶性肿瘤；③感染性疾病；④免疫系统疾病。NSCLC组有男性49 例，女性41 例；年龄40～82 岁，平均(61.34±8.70)岁；病理分型：鳞癌45 例，腺癌40 例，其他5 例；TNM 分期：I 期12 例，II 期34 例，III 期25例，IV 期19 例；分化程度：42 例低分化，29 例中分化，19 例高分化。选取同期收治的肺部良性疾病患者患者90例作为良性疾病组，有男性48例，女性42 例；年龄39～82 岁，平均(62.27±6.33)岁。选取同期到我院进行健康体检的人群90 例作为对照组，有男性49 例，女性41 例；年龄38～82 岁，平均(61.53±5.16)岁。3 组研究对象的一般资料差异均无统计学意义(P＞0.05)，具有可比性。本研究经过本院医学伦理委员会批准（编号：20160108），所有患者均知情同意。

1.2 检测方法 抽取所有患者清晨空腹静脉血5 mL，室温静置1 h，离心仪（贝克库曼尔特，Microfuge 20R）以3 800 r/min，离心半径8 cm，离心10 min 后分离获得血清。采用TK-1 检测试剂盒（上海臻科生物科技有限公司）对TK-1 进行检测，检测方法为化学发光法。使用全自动化学发光分析仪（安图公司，Auto-mo A2000）检测CA199及SF水平。联合检测的阳性标准为三项指标有一项或一项以上检测结果为阳性即为阳性。

1.3 统计学处理 应用SPSS 23.0 软件对数据结果进行分析，计量资料以均数±标准差()表示，两组间比较采用独立样本t检验；三组比较采用方差分析(F检验)，进一步两两比较采用SNK-q 检验。计数资料用[n(%)]表示，组间比较采用χ2检验。采用多因素Logistic回归分析筛选NSCLC疾病的独立危险因素。诊断效能评价以灵敏度、特异度、准确度表示，以病理诊断为金标准来分析，计算各诊断效能指标，同时制作受试者工作特征(ROC)曲线，并计算曲线下面积。当P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 三组间一般资料比较 三组研究对象的年龄、性别均无统计学意义，具有可比性。在病理分型、TNM 分期、分化程度方面比较差异有统计学意义(χ2=5.551、4.541、4.530，P＜0.05)。见表1。

表1 三组研究对象一般资料比较[n(%)]

2.2 三组间血清TK1、SF、CA199水平的比较 NSCLC组患者血清TK1、SF、CA199 水平均显著高于良性疾病组和对照组(F=32.274、27.783、20.135，均P＜0.05)。与对照组比较，良性疾病组患者血清SF 水平高于对照组（P＜0.05），TK1、CA199 水平无统计学差异。见表2。2.3 Logistic 多因素回归分析 以是否患有NSCLC疾病作为因变量（否=0、是=1），以TK1、SF、CA199等单因素分析有统计学意义的检验指标为自变量，采用逐步回归法进行二元多因素Logistic 回归分析，结果显示，TK1、SF、CA199 是影响患者患有NSCLC疾病的独立危险因素(OR=1.589、1.384、1.493，P＜0.05)，得到的Logistic 回归方程为Pre=1/[1+e-(0.463*TK1+0.325*SF+0.401*CA)]。见表3。

表2 三组间血清TK1、SF、CA199水平的比较

表3 影响NSCLC的多因素Logistic回归分析

2.4 三者联合对NSCLC 诊断价值的比较 应用ROC 曲线分别对TK1、SF、CA199 以及Logistic 回归方程得到的联合指标Pre 进行ROC 曲线分析，其中联合指标Pre 的ROC 曲线下面积最大，表明该联合指标的区分度较其他三个诊断模型更好。

此外，表4 为这4 个指标诊断NSCLC 的灵敏度、特异度及准确度。其中，联合指标Pre 的诊断灵敏度、特异度及准确度最高，分别为82.8%、77.8%、88.5%，显著高于利用TK1、SF 及CA199 单独诊断的结果(P＜0.05)。

表4 4个指标对NSCLC诊断价值的比较(%)

图1 4个指标对NSCLC的ROC的曲线分析

3 讨论

NSCLC是最常见的一种肺癌类型，约占肺癌患者的80%以上。NSCLC 具有早期隐匿、缺乏典型性的特点，因此其早期诊断率很低，导致疾病的预后差、病死率高[9]。目前临床上组织病理学检测的特异性较高，但是该方法是一种侵入性操作，取材难度较大，患者的耐受性差，导致灵敏度不高。近年来，随着分子生物学的快速发展，通过对肿瘤标志物的检测，能有效对肿瘤疾病进行筛查、诊断、效果评估及预后监测，该方法操作简单，且患者创伤小，对临床有重要应用价值[10]。

TK 是嘧啶代谢循环中的一类关键酶，可催化脱氧胸苷形成脱氧胸苷酸，属于DNA 修复酶，与细胞增殖有关，当TK1 含量和活性增加时，细胞DNA合成速度加快，在多种实体肿瘤中均可检测到高表达[11]。王总飞等[12]研究表明，NSCLC 患者血清SF、基质金属蛋白酶9(MMP-9)、STK1水平明显上升，三者之间呈正相关，协同参与NSCLC 的发生、进展。SF 是人体内铁代谢的重要蛋白质，血清铁主要存在于肝、脾、骨髓中，在健康人体内，血清SF 含量很少，当发生炎症、慢性疾病、恶性肿瘤时，SF 表达会上升[13]。NSCLC 患者血清SF 水平高表达直接影响了肿瘤增殖和侵袭[14]。莫飞等[15]研究表明，肺癌患者的SF 水平显著升高，联合其他肿瘤标志物可显著提高诊断特异度和准确度。CA199 是一种黏蛋白型糖类抗原，无器官特异性、也无肿瘤特异性，起血清含量在多种恶性肿瘤中均显著升高。在正常情况下，血清中CA199 含量极低，但是出现肿瘤细胞的异常分化情况时，CA199会大量合成进入外周血[16]。王莉等[17]研究表明，NSCLC 组患者CA199 水平显著高于肺良性病变组与健康对照组；Ⅲ～Ⅳ期NSCLC 患者CA199 水平显著高于Ⅰ～Ⅱ期；生存时间≥1 年患者CA199 水平显著低于生存时间＜1 年患者，CA199 联合其他指标的检测对NSCLC 的早期诊断、分期及预后判断具有一定临床价值。

本文研究结果表明，NSCLC 组患者血清TK1、SF、CA199 水平均显著高于良性疾病组和对照组，提示TK1、SF、CA199与NSCLC疾病有密切关系，同时血清肿瘤标志物的检测对NSCLC 的辅助诊断具有一定鉴别意义。回归分析发现TK1、SF、CA199是影响患者患有NSCLC 疾病的独立危险因素，这可能原因是TK1参与细胞周期调控，与肿瘤细胞的转化有关，其能导致S 期调控异常，G/S 期时，TK1水平持续上升，到M 期时水平达到最高值[18]；致癌因子能影响机体的铁代谢过程，导致铁排出量减少，铁储备量增多，因此血清SF 升高；肿瘤细胞会合成大量CA199，并随着癌细胞的凋亡进入外周血，导致其血清水平上升。以上三项指标与NSCLC的发生、发展均有密切联系，但是通过不同的途径，后续有待进一步研究。本研究探讨了TK1、SF 及CA199 三者联合检测对于NSCLC 诊断的临床价值，结果显示，3 项指标联合检测的AUC 最大，为0.845，三指标联合灵敏度、特异度及准确度分别为82.8%、77.8%、88.5%，这均显著高于TK1、SF 及CA199 单独诊断结果。说明三者联合检测对NSCLC 的诊断价值及临床效能评价均优于三指标单独检测，本研究认为，联合检测能够起到互补作用，提高诊断敏感度和准确度，三者联合检测时对NSCLC的诊断更具有价值，这可能作为临床筛查和治疗NSCLC提供新的参考指标和方案。

综上所述，血清TK1、SF 及CA199 联合检测对NSCLC早期诊断具有重要的临床意义；联合检测对于早期发现、早期干预以及提高NSCIC患者的生存期具有一定的临床指导性价值。