血清IL-15 AAG水平与肺结核化疗患者预后的相关性

张天蔚， 彭 婷， 李永武， 王艳波， 钟业腾

(海南医学院第二附属医院检验科， 海南 海口 570311)

肺结核由结核分枝杆菌感染肺部而致，发病与病情进展均与促炎及炎性因子存在密切关系。目前，临床仍待探讨新型指标，以为肺结核患者预后评估提供指导。有研究指出，蛋白质参与机体物质交换、代谢、免疫等多种生理功能，对肺结核发病、治疗时药物靶点均有影响[1]。提示蛋白质可能与肺结核患者预后存在密切关系。此外，肺结核可诱发炎症级联反应，患者多项细胞因子水平出现变化。基于此，本研究选取急性时相反应蛋白α1-酸性糖蛋白(α1-Acid Glycoprotein，AAG)结合炎症因子白细胞介素-15(Inter Leukin-15，IL-15)作为研究指标，进一步探讨两者与肺结核化疗患者预后的关系，旨在指导临床合理评估肺结核化疗患者预后。

1 资料与方法

1.1一般资料:选择医院2017年2月至2019年2月收治221例肺结核患者，年龄22～46岁，平均(34.61±5.48)岁；男142例，女79例；病程2～6d，平均(4.72±1.14)d；吸烟史137例，饮酒史161例；合并气管支气管结核42例。本院伦理委员会批准研究的实施，患者及家属对研究的内容知情同意。

1.2入选标准:纳入标准：①均为活动性肺结核，符合有关诊断标准；②入组时尚未开始抗结核治疗；③行痰涂片镜检可见结核分枝杆菌或抗酸杆菌阳性，重复测量2～3次；④行胸部X线检查可见局限性或侵犯多肺段病变，呈增殖、渗出、纤维及干酪样病变，可伴钙化、空洞、支气管播散灶；⑤患者有咳嗽、咯血、低热等症状。排除标准：①近3个月服用过免疫调节剂的患者；②合并肺部肿瘤的患者；③合并肺纤维化、肺结节的患者；④合并免疫系统疾病的患者；⑤合并心、肝、肾功能等其他重要脏器相关疾病的患者。

1.3方法:基线资料及化疗治疗：采用自制调查表收集患者基线资料，包括年龄、性别、病程、吸烟史、饮酒史、合并气管支气管结核。气管支气管结核诊断：行支气管镜检查可见气管支气管病变，行痰涂片镜检可见结核分枝杆菌或抗酸杆菌阳性，行结核菌素试验呈现为阳性，支气管灌洗液支气管刷片阳性或抗酸染色阳性。患者均接受化疗治疗，前两个月实施强化期治疗，给予利福平、异烟肼、吡嗪酰胺、注射用链霉素进行化疗，强化期结束时，行痰涂片镜检，若仍为阳性，增加一个月强化期治疗。若阴性，进入巩固期治疗，持续六个月，给予利福平、异烟肼进行化疗。细胞因子水平检测：治疗2个月，采集患者空腹静脉血5mL，以3000r/min的速度离心10min，取血清，采用武汉华美CUSABIO公司提供的酶联免疫吸附试剂盒检测干扰素-γ(Interferon-γ，IFN-γ)、肿瘤坏死因子-α(Tumor Necrosis Factor-α，TNF-α)、巨噬细胞移动抑制因子(Mi-Gration Inhibitory Factor，MIF)及IL-15水平。AAG水平：治疗2个月，采集患者空腹静脉血5mL，以3000r/min的速度离心10min，取血清，采用上海费玛生物科技有限公司提供的α1酸性糖蛋白诊断试剂盒检测血清AAG水平，检测方法为免疫比浊法。预后评估：记录患者治疗8个月后痰涂片镜检转阴状况，结合胸部X线检查评估患者预后，若痰涂片镜检转阴，再行胸部X线检查，若患者病灶吸收≥原病灶1/2，则可判定为预后良好，不满足则判定为预后不良。

1.4统计学方法:采用SPSS24.0处理数据。全部计量资料均经Shapiro-Wilk正态性检验，符合正态分布以表示，组间用独立样本t检验；百分比表示计数资料，用χ2检验；采用回归分析检验肺结核化疗患者细胞因子水平、AAG水平与预后的关系；绘制受试者工作曲线(Receiver Operating Curve，ROC)，得到曲线下面积(Area Under Curve，AUC)，检验肺结核化疗患者细胞因子水平、AAG水平对预后的预测价值，AUC值>0.9表示预测性能高，0.71～0.90表示有一定的预测性能，0.5～0.7表示预测性能较差；P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1肺结核化疗预后良好组与预后不良组基线资料、细胞因子水平、AAG水平比较:221例肺结核患者治疗8个月时，有152例(68.78%)病灶吸收≥原病灶1/2，为预后良好，有69例(31.22%)预后不良。肺结核化疗预后不良组治疗2个月IFN-γ、TNF-α、MIF、IL-15均高于预后良好组，治疗2个月AAG均低于预后良好组，见表1。

表1 肺结核化疗预后良好组与预后不良组基线资料细胞因子水平AAG水平比较

2.2回归分析检验各主要因子与肺结核化疗患者预后的关系：将肺结核化疗患者治疗2个月的各细胞因子水平、AAG水平作为自变量，将患者预后作为因变量(1=预后较差，0=预后良好)，建立多元Logistic回归模型，结果显示，肺结核化疗患者治疗2个月IFN-γ、TNF-α、MIF、IL-15过表达，AAG表达下调均是患者预后不良的风险因子(OR>1，P<0.05)，见表2。

表2 回归分析检验各主要因子与肺结核化疗患者预后的关系

2.3肺结核化疗患者治疗2个月细胞因子水平、AAG水平预测预后风险的ROC结果:将肺结核化疗患者治疗2个月细胞因子水平、AAG水平作为检验变量，将患者预后作为状态变量(1=预后不良，0=预后良好)，绘制ROC曲线(见图1～2)发现，肺结核患者治疗2个月IFN-γ、TNF-α、MIF、IL-15、AAG水平预测预后不良风险的AUC分别为：0.760、0.719、0.726、0.788、0.838，均>0.71，均有一定预测价值，且以AAG预测AUC最高，检验相关参数详见表3。

表3 治疗2个月细胞因子水平AAG水平预测肺结核化疗预后不良风险的ROC检验结果

图1 治疗2个月细胞因子水平预测肺结核化疗预后不良风险的ROC曲线图

图2 治疗2个月AAG水平预测肺结核化疗预后不良风险的ROC曲线图

3 讨 论

刘杰等[2]研究显示，肺结核患者行常规化疗后，痰转阴率仅有75.0%，病灶吸收率仅有67.5%。本研究结果显示，肺结核患者病灶吸收率达68.78%。提示肺结核患者行化疗治疗的获益仍不理想，对预后相关指标进行研究尤为必要。

本研究结果显示，治疗2个月IFN-γ、TNF-α、MIF、IL-15过表达，AAG表达下调可增加肺结核化疗患者预后风险。分析原因：TNF-α可激活细胞免疫应答反应，发挥抗感染，抑制病原菌增殖的功能[3]。IFN-γ具有细胞毒性，可杀灭细胞内结核分枝杆菌；并通过激活巨噬细胞，产生活性氮、活性氧等物质，杀灭细胞内结核分枝杆菌[4]。MIF可活化外周血单核细胞，增加炎症介质产生，加速炎症反应，影响肺通气功能，促进肺结核病情进展[5]。在肺结核患者中，TNF-α、IFN-γ、MIF表达说明患者结核分枝杆菌增殖能力较强，患者病灶吸收慢，预后风险高。

IL-15可活化T淋巴细胞，与TNF-α共同作用，促进局部T淋巴细胞聚集，并增加IFN-γ分泌，进而溶解靶细胞，攻击细胞内结核分枝杆菌[6]。IL-15可活化B淋巴细胞，B淋巴细胞为抗原提呈细胞，可提呈细胞、产生抗体，并可刺激T淋巴细胞增殖、生长，发挥抗结核效果。IL-15表达水平越高，说明患者机体结核分枝杆菌越活跃，肺结核病情越严重，经治疗后，患者预后风险仍较高。AAG是急性时相蛋白，正常情况下在外周血中含量低，在感染、炎症等病理状态下，肝脏合成急性时相蛋白增多，血清中AAG表达上调[7]。而在肺结核患者中，AAG含量表现为显著降低，与合并肝损伤有关。因肺结核患者需接受化疗，选用药物较多，治疗时间较长，随疗程进展，可导致药物性肝功能损伤，肝脏分泌AAG能力降低。此外，化疗药物可产生免疫抑制，可造成肝脏合成AAG减少[8]。因此AAG表达下调时，患者对化疗的耐受性较差，结核分枝杆菌耐药性强，病灶吸收速度慢，患者预后风险较高。

绘制ROC发现，AAG及IL-15水平对肺结核患者化疗预后有更高预测价值。临床应在肺结核治疗期间定期检测AAG及IL-15水平，实施保肝、抗炎治疗。但因本研究观察时间尚短、纳入资料不够全面，结论尚有局限，还应在未来增加其他相关指标，延长观察时间，进一步分析肺结核患者预后的相关指标。