紫花杜鹃及其混淆品的微性状及显微鉴别研究

夏 静，郑夏生，张慧晔*，林蔚兰，植柏毅，王德勤

（1. 广州白云山和记黄埔中药有限公司，广东 广州 510515；2. 广州中医药大学 中药学院 药用植物生理生态研究所，广东 广州 510006）

紫花杜鹃是岭南地区民间常用于止咳的一种药材，来源于杜鹃花科植物广东紫花杜鹃（岭南杜鹃）Rhododendron mariaeHance 的干燥叶或带叶嫩枝[1]，味微苦、辛，性微温，具有止咳、祛痰的功效，主要用于治疗慢性支气管炎、咳嗽多痰、气喘、跌打损伤、对口疮等症[2]。紫花杜鹃曾被收载于1977 年版《中国药典》（一部）和《广东省中药材标准》（第三册）。

紫花杜鹃药材主要来源于野生资源采集，与其近缘种外观十分相似，很难区分。调查中发现部分药农将南昆杜鹃R. naamkwanenseMerr.、杜鹃R.simsiiPlanch.、满山红R. mariesiiHemsl. et Wils.等作紫花杜鹃采集，广东省云浮市、福建省武平县等小型药材种植基地将广东杜鹃R. kwangtungenseMerr.et Chun、溪畔杜鹃R. rivulareHand.-Mazz. 等近缘物种当做紫花杜鹃移栽种植。为保障中药饮片、中成药生产和临床安全用药安全，亟需开展紫花杜鹃及其混淆品的物种鉴别研究。通过微性状能简捷、直观地观察到一些肉眼辨识不清的外观特征，可用于易混淆品的鉴别[3-5]。目前尚缺乏紫花杜鹃及其混淆品的微性状比较研究及鉴别方法[3]，本研究利用显微技术对紫花杜鹃及近缘混淆品的微性状比较分析，旨在为紫花杜鹃药材鉴别提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 材料

共收集6 种杜鹃属植物样品，由广州白云山和纪黄埔中药有限公司高级制药工程师张慧晔鉴定，具体信息见表1，药材标本及腊叶标本保存于国家中医药管理局南药资源综合开发国际重点实验室。

表1 实验样品信息表Tab. 1 Experimental sample information table

1.2 实验仪器

尼康D7000 型数码照相机（日本尼康公司）；徕卡EZ4HD 型体视显微镜（德国徕卡公司）；MZ201型体视显微镜（广州市明美光电技术有限公司）；蔡司Axio scope A1 型显微镜（德国卡尔蔡司公司）；奥林巴斯BX41 型双目显微镜（奥林巴斯＜中国＞有限公司）；拍照软件MShot Image；图像处理软件Adobe Photoshop CS3。

1.3 实验方法

1.3.1 微性状特征鉴别 采用体视显微镜观察样品的茎、叶、花及果实等各部位微性状特征，采用自动景深叠加拍摄。

1.3.2 显微特征鉴别 参考2020 年版 《中国药典》（四部）显微鉴别法[6]，对样品的茎、叶表面和粉末进行制片，观察各部位组织结构及特征。

2 结果与分析

2.1 紫花杜鹃及其混淆品的原植物形态特征

紫花杜鹃及其混淆品的原植物形态特征见表2，除杜鹃为冬季落叶外，其余均为常绿灌木。6 种近缘种植物中，除南昆杜鹃具有比较典型的倒披针形叶片外，组内其它植物叶片为卵形、狭卵形、椭圆形，种间差异不明显；杜鹃花萼裂片明显，卵形或长卵形，（4 ～ 5） mm ×（2 ～ 4） mm；溪畔杜鹃花萼裂片狭三角形，2 ～ 5 mm，其它4 种植物花萼裂片不明显。杜鹃花色、雄蕊数目与其它种明显不同，杜鹃花为红色、雄蕊10 枚，其它为紫色或粉紫色、雄蕊5 枚。

表2 紫花杜鹃及其混淆品的原植物形态特征Tab. 2 Morphological characteristics of R. mariae and its adulterants

2.2 紫花杜鹃及其混淆品的微性状特征

2.2.1 紫花杜鹃的微性状特征 由紫花杜鹃的微性状特征可知，紫花杜鹃叶片正面中脉被糙伏毛，叶背面散生红棕色糙伏毛，以中脉为多，中脉和叶脉在叶面凹陷，叶背隆起；叶柄密被红棕色糙伏毛；花梗密被锈色柔毛，花萼不明显，被锈色柔毛；茎表面可见多数黄棕色糙伏毛，30° ～ 60°着生；子房密被绢状红棕色长糙伏毛；花丝无毛或有时下部被极稀疏微毛；蒴果密被红褐色糙伏毛，见图1。

图1 紫花杜鹃的微性状特征Fig. 1 Micro-chracters of R. mariae

2.2.2 紫花杜鹃混淆品的微性状特征 由表3 可知，紫花杜鹃及其混淆品的微形态特征差异明显。紫花杜鹃、杜鹃和南昆杜鹃小枝和叶柄均被糙伏毛，

表3 紫花杜鹃及其混淆品的微性状特征Tab. 3 Micro-chracters of R. mariae and its adulterants

无腺头毛或刚毛，紫花杜鹃被红棕色糙伏毛，混淆品杜鹃和南昆杜鹃茎皮上的毛边缘和先端多呈丝状开裂；广东杜鹃、溪畔杜鹃、乳源杜鹃的嫩茎或花梗有腺头毛和刚毛，且刚毛多与茎呈60° ～ 90°着生，可明显区分真伪。

2.3 紫花杜鹃及其混淆品的显微特征

2.3.1 紫花杜鹃的显微特征 紫花杜鹃叶上表皮细胞多边形，垂周壁式样平直-弓形；下表皮细胞多边形，垂周壁式浅波状，气孔长椭圆形，不定式，副卫细胞有环纹角质层纹；木质化非腺毛众多，红棕色，由数十个细胞组成，长118 ～ 975 μm；偶见簇晶散在；茎表皮非腺毛长55 ～ 330 μm，叶柄非腺毛长81 ～253 μm，见图2。2.3.2 紫花杜鹃混淆品的显微特征 由表4 可知，紫花杜鹃及其混淆品的的叶片上下表皮细胞形状、垂周壁样式差异不大，叶片或多或少均能观察到簇晶，其中以杜鹃和南昆杜鹃最多。木质化非腺毛、腺毛形态和长度存在较大差异。5 个混淆品中，溪畔杜鹃、广东杜鹃、乳源杜鹃均有腺毛，其中，溪畔杜鹃的腺毛柄部较长，乳源杜鹃腺毛较多；木质化腺毛也有较大区别，广东杜鹃茎上非腺毛基部有乳头状隆起，溪畔杜鹃花萼非腺毛多弯曲；杜鹃、南昆杜鹃、乳源杜鹃的木质化非腺毛边缘或先端均成丝状开裂，且南昆杜鹃花萼非腺毛先端多呈鱼尾状不规则分叉，辨识度非常高，与正品紫花杜鹃平滑且长的木质化非腺毛相区别。

图2 紫花杜鹃的显微特征Fig. 2 Microscopic characteristics of R. mariae

表4 紫花杜鹃及其混淆品的显微特征Tab. 4 Microscopic characteristics of R. mariae and its adulterants

3 讨论

传统的表观性状鉴别在花果期时鉴定起来较容易，但紫花杜鹃药材采收时间为4 月至5 月，紫花杜鹃花期为1 月至4 月，加之采收部位为嫩枝叶，全年均可采集，采收的药材往往缺乏花、果，给辨识带来困难。研究发现杜鹃花科植物中，一些广布种的叶形变异较大，无法利用叶形来区分紫花杜鹃及近缘种[7]；叶型、花、果实等器官特征也变化较大，种间差异不明显。实验发现，虽然紫花杜鹃及近缘种的毛被疏密情况种内差异也很大，但毛被着生的角度、类型、长短、形态等具有一定规律。

有学者将广东杜鹃R. kwangtungense作为溪畔杜鹃R. rivulare的变种处理[8]，笔者通过比较鉴定，发现两者在表观形态、微性状和显微特征中均存在明显差异，依照《中国植物志》的观点，认为它们应该属于两个差别较大的独立的种。

4 结论

紫花杜鹃具扁平糙伏毛、不具刚毛、腺头毛，毛被与茎干成30° ～ 60°着生，显微镜下可见木质化非腺毛较长，且先端平滑，基部呈半球形隆起；其混淆品毛被着生的角度、类型、长短、形态等与之不同，显微镜下木质化非腺毛、腺毛形态和长度也有明显差异。采用微性状和显微特征，可快速、简便地鉴别紫花杜鹃及其近缘混淆品，为紫花杜鹃药材质量控制提供依据。