大天鹅痛风组织病理学观察

(1.北京动物园，北京 100044；2.圈养野生动物技术北京市重点实验室，北京 100044)

0 引言

在野生动物饲养管理工作中，疾病防治工作是其重要的组成部分。近年来，随着国内圈养野生动物数量的增加以及野生动物诊疗工作的深入，禽痛风发病率呈现逐年上升的迹象[1]。然而由于专业的野生动物病理学诊断技术的匮乏，对于珍稀野生动物来说，如何快速进行痛风确诊，成为了现阶段需要关注的问题。

北京动物园兽医院曾接收1例死亡大天鹅样本，临床初步诊断为痛风死亡。后经病理学诊断确诊为禽痛风。本文以此为例，从组织病理学角度对该病例进行探讨，以期为今后珍稀野生动物痛风病的诊断提供基础资料。

1 材料与方法

1.1 病料

北京动物园饲养大天鹅，编号5Q623，于2017年10月30日早上发现死亡，后及时送至北京动物园兽医院进行死后诊断。

1.2 试验方法

1.2.1 病理样本采集

剖检后取心、肝、肾、肠、胰腺组织，迅速投入10%的福尔马林液，进行病理组织切片前处理。

1.2.2 H.E.染色

石蜡切片分别经二甲苯Ⅰ、Ⅱ脱蜡5 min，之后浸入无水乙醇/二甲苯(1：1)混合液中5 min，依次经无水乙醇Ⅰ、无水乙醇Ⅱ、95%乙醇、85%乙醇、75%乙醇、50%乙醇梯度复水，下行至双蒸水中，苏木精染色10 min，1%盐酸酒精分色数秒，水洗返蓝15 min，再依次通过50%乙醇、75%乙醇、85%乙醇、95%乙醇梯度脱水后，伊红染色1 min，95%乙醇洗涤3次，再经无水乙醇Ⅰ、Ⅱ各5 min，二甲苯Ⅰ、Ⅱ各透明5 min，最后用中性树胶封片。切片放置于37℃温箱内过夜烘干后镜检。光学显微镜下观察大天鹅组织病理学变化情况。

2 结果

2.1 大天鹅临床剖检观察结果

大天鹅膘情良好，被毛整洁，剖检腹腔可见大量灰白色粉末状物质附着于肝(见图1A)、肠系膜(见图1B)表面；肾脏肿大，色泽变淡，轻微出血，表面呈白褐色花纹，手触硬实(见图1C)；肠黏膜水肿，出血(见图1D)；心肌出血，心外膜附着灰白色粉末状物质(见图1E)；胰腺点状出血，表面附着灰白色粉末状物质(见图1F)。

图1 大天鹅临床剖检观察图

2.2 大天鹅组织病理诊断结果

肠道：肠道组织结构松散，绒毛层脱落较为严重，基层水肿，肠腺组织肿大，蓝染，部分肠腺脱落；残存的绒毛中大量红细胞聚集，肠绒毛出血严重，大量红细胞聚集在肠绒毛上皮细胞间隙，炎性粒细胞浸润，肠绒毛上皮细胞水肿明显如图2A所示。

胰腺：胰腺组织结构基本完整，胰腺泡间可见多量红细胞；部分区域可见胰腺泡存在淡粉染无结构絮状物；胰腺泡内糖原颗粒增多，胰腺泡排列紊乱如图2B所示。

肾：肾脏组织大面积坏死，坏死组织被结缔组织替代；集合管上皮细胞坏死、脱落明显，集合管仅存轮廓；肾小囊-肾小球高度扭曲，失去原有形态，肾小囊扩张，囊内可见多量脱落的上皮细胞，肾小球坏死、结缔组织增生如图2C所示。

心：心肌结构松散，心肌大面积出血，心肌间可见淡粉染无结构絮状物；心肌细胞颗粒变性；絮状物中可见淋巴细胞如图2D所示。

肝：肝组织大面积坏死，坏死区域可见大量淡粉染无结构絮状物，未坏死区域肝细胞排列紊乱，同时肝组织出血明显；残存肝细胞发生不同程度水泡样变性，坏死的肝细胞仅存细胞轮廓如图2E所示。

对肝组织进行Masson染色(三色，胶原纤维蓝色、组织细胞红色、细胞核黑色)，染色后可见：肝组织HE染色中无结构絮状物为纤维结缔组织；肝细胞Masson染色为红色，表明肝组织发生大面积纤维化，肝组织发生纤维化表现如图2F所示。

图2 大天鹅病理学观察图

3 诊断

经临床剖检与组织病理学诊断，大天鹅患有痛风，表现为肝、肾大面积坏死，纤维化显著；出血性卡他性肠炎；心肌出血、坏死；胰腺水肿、出血，最后引起死亡。

4 讨论

痛风(Gout)，也称之为尿酸盐沉症，通常指血液中尿酸浓度升高，以尿酸盐(钠)的形式附着于体内器官组织表面而引起的疾病[2]。临床表现上，尿酸盐常附着于肾脏、肝脏、肠道等内脏器官的浆膜上，以及关节间隙、腱鞘、软骨等部位。在禽痛风疾病中，若尿酸盐大量沉着于趾关节，可形成痛风石(Tophi)[3]。

关于痛风发生的原因和机理现阶段不完全清楚，在家禽养殖业，禽痛风的发生原因倾向于饲料核蛋白含量过多。其发病机理为：禽饲料中添加了鱼粉、肉粉等高蛋白饲料，其核蛋白含量丰富，核蛋白在体内水解后生成蛋白质和核酸。核酸进一步分解为戊糖、嘌呤和嘧啶类碱性化合物。嘌呤类化合物在体内氧化，最后形成尿酸。而尿酸在禽血液中蓄积过多，会以结晶的方式沉积在内脏器官或关节内，从而形成痛风[4-5]。

对于动物园圈养野生动物，由于其饲料比例规范、合理，除其他致病因素外，饲养导致痛风发生的概率极低。而游客在园内游玩过程中对动物进行不文明投喂现象屡禁不止，根据园

内现场调研，发现游客在不文明投喂过程中以饼干、面包、薯片居多，而这些零食中多富含高蛋白，因此动物园内游客的不文明投喂与禽类痛风的发生有直接的关系。除痛风外，游人投喂导致的动物患病、致死情况也时有发生，这一情况应该引起有关部门的重视。

5 结论

本研究通过临床诊断与结合病理学观察相结合的方法，对圈养大天鹅进行死后诊断，最终确诊为痛风。此病例的完成，为动物园提供了对游客不文明投喂行为进行劝导、教育的实际案例的同时，为今后野生动物相关疾病的病理学诊断提供了较为可靠的基础资料。