慢性乙型肝炎患者血清几丁质酶3样蛋白1水平变化及其临床意义

孙言非 佟成媛

作者单位：佳木斯市中心医院检验科，黑龙江 佳木斯 154000

乙型肝炎病毒（HBV）感染是较为严重的全球性公共卫生问题，据世界卫生组织统计，全球约有2.4 亿HBV 感染者，每年约有60 万人死于HBV 感染所致的急性或慢性并发症。尽管乙肝疫苗的广泛应用降低了HBV 的感染率，但我国仍然有9 300万慢性HBV 感染者[1]。相关研究显示[2，3]，HBV 持续感染除引起肝脏炎症损伤外，还会导致患者出现全身多发器官损伤，其中肾脏也是主要累及器官。有研究显示[4]，随着慢性乙型肝炎的治疗，患者会出现不同程度肾小球过滤估计值下降的情况，并引起血清肌酐、血钙、血磷、尿肌酐出现改变，导致患者肝损伤加剧，逐渐从肝纤维化进展为肝硬化，最终可能诱发肝癌。乙肝肝硬化是一种常见疾病，是各种慢性肝病发展的晚期阶段，病理特征是肝脏弥漫性纤维化、假小叶、再生结节，起病隐匿，病程长，病情发展缓慢，具有较高的死亡率，给患者的身体健康带来严重的负面影响[5]。乙肝肝损伤与肝硬化病变难以控制，会严重影响患者的生存时间及生存质量。因此，监测肝损伤病情进展对判断疾病预后具有重要的参考价值。本研究选取我院2019年1月～2021年1月收治的60 例慢性乙型肝炎患者作为研究对象，探讨慢性乙型肝炎患者血清几丁质酶3样蛋白1（Chitinase 3-like protein 1，CHI3L1）水平变化及其临床意义。

1 材料与方法

1.1 一般资料选取我院2019年1月～2021年1月收治的60 例慢性乙型肝炎患者作为研究对象，依照肝损伤情况分为肝损伤组（n=25）和非肝损伤组（n=35），另取同期30 例来我院体检的健康者作为对照组。纳入标准：符合中华医学会肝病学分会、中华医学会感染病学分会2015年发布的《慢性乙型肝炎防治指南》乙型肝炎诊断标准[6]。近30d 内无免疫抑制剂使用史；可以配合完成各项检查；患者及家属均在了解研究目的后签署知情同意书；患者依从性好，自愿参加临床试验，且有完整的病历资料。排除标准：合并酒精性肝病、病毒性肝炎、寄生虫感染、自身免疫性疾病者；入院后7d内死亡者；妊娠期、哺乳期；精神疾病及意识障碍者；因其他原因转院或家属放弃治疗者。本研究经我院医学伦理委员会批准。3 组受检者一般资料对比差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。

表1 3 组患者一般资料对比

1.2 方法入院第2 天门诊患者及对照组健康者清晨抽取3ml 静脉血，转速3 000r/min，4℃下离心10min，留取上清，于冰箱-80℃保存。应用美国Bio-Tek 公司的ELX800 型酶标仪，应用酶联免疫吸附法，对3 组受检者的CHI3L1 蛋白水平进行测定，应用杭州普望生物技术有限公司提供的测定试剂盒，具体步骤按照试剂盒说明书操作；血清甲胎蛋白（Alpha fetoprotein，AFP）与血清铁蛋白（Ferritin，FER）应用电化学发光法检测，应用雅培化学发光仪与配套试剂，依照说明书操作；应用化学发光法对3组受检者血清的纤维连接蛋白（Fibronection，FN）、Ⅲ型前胶原氨基端肽（PⅢNP）、Ⅳ型胶原（CollagenⅣ，CⅣ）、层黏蛋白（Laminin，LN）以及透明质酸（Hyaluronic acid，HA）水平进行检测，试剂盒由潍坊市康华生物技术有限公司提供，全自动发光仪由科斯迈公司提供，型号为SMART3000S，依照试剂盒说明书步骤进行操作[7，8]。

1.3 统计学方法本研究数据采用统计学软件SPSS 23.0 进行分析，计数资料以例数（百分比）[n（%）]表示，进行χ2检验；符合正态分布的计量资料用均数±标准差（±s）表示，多组间比较采用F检验；采用Spearman 相关分析法分析FN、PⅢNP、CⅣ、LN、HA 与CHI3L1 蛋白水平的相关性；采用Logistic 回归分析法分析产生三指标联合预测概率的新变量；P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组受检者FER、AFP、CHI3L1 水平对比3 组受检者FER、AFP、CHI3L1 水平对比差异有统计学意义，肝损伤组高于非肝损伤组及对照组（P＜0.05），见表2。

表2 3 组受检者FER、AFP、CHI3L1 蛋白水平对比（±s，ng/ml）

表2 3 组受检者FER、AFP、CHI3L1 蛋白水平对比（±s，ng/ml）

注：与肝损伤组比较，*P＜0.05；与对照组比较，#P＜0.05

组别例数FERAFPCHI3L1肝损伤组25 156.59±38.78 4.24±2.34218.23±49.11非肝损伤组 35 119.28±21.19*# 2.85±1.25*# 143.46±39.34*#对照组30 104.76±23.89* 1.07±0.36*39.54±11.30*F 24.58432.225170.041 P＜0.001＜0.001＜0.001

2.2 血清FER、AFP、CHI3L1 单项及联合检测的诊断价值比较以CHI3L1、AFP 及FER 三项指标的检测结果为协变量，以诊断结果为因变量，进行Logistic 回归分析，预测概率模型用似然比校验，差异具有统计学意义（P＜0.001）。3 个指标联合检测的AUC为0.865（95%CI0.814～1.235，P＜0.001）。且3 项指标联合检测的诊断价值高于单项检测（P＜0.05），见表3。

表3 血清FER、AFP、CHI3L1 单项及联合检测的诊断价值比较

2.3 3 组受检者肝纤维五项检测水平对比3 组受检者FN、PⅢNP、CⅣ、LN 以及HA 表达水平对比差异有统计学意义（P＜0.05），见表4。

表4 3 组受检者肝纤维五项检测水平对比（±s）

表4 3 组受检者肝纤维五项检测水平对比（±s）

注：与肝损伤组比较，*P＜0.05；与对照组比较，#P＜0.05

组别例数FN（μg/ml）PⅢNP（ng/ml）CⅣ（ng/ml）LN（ng/ml）HA（ng/ml）肝损伤组25155.43±23.1421.34±5.31142.42±24.24 212.58±67.42 317.43±87.32非肝损伤组35 110.32±19.32*#8.35±2.43*#62.41±7.46*# 72.43±21.42*# 126.32±32.55*#对照组30122.65±23.42*2.14±0.47*15.32±3.24*55.63±15.34* 81.45±12.43*F 32.022254.069594.454132.150164.003 P＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001＜0.001

2.4 肝纤维五项与CHl3L1 表达的相关性分析Spearman 相关分析结果显示：FN 与CHI3L1 水平无相关性（P＞0.05），PⅢNP、CⅣ、LN、HA 与CHI3L1水平呈正相关（P＜0.05），见表5。

表5 肝纤维五项与CHI3L1 表达的相关性分析

3 讨论

CHI3L1 也称为软骨糖蛋白-39（Cartilage glycoprotein-39，HC-gp39）或YKL-40，位于人类染色体1q31-q32 的高度保守区域，是一段含有10 个外显子、基因组长约10.9kb 的染色体DNA，包含383个氨基酸[9]。相关研究发现[10]，CHI3L1 在单核细胞与中性粒细胞中少量表达，但因巨噬细胞晚期诱导分化阶段会呈现高表达状态，因此有学者认为CHI3L1 为巨噬细胞分化成熟的一个重要标志。目前CHI3L1 的具体生物学机制还尚未明确，相关研究发现CHI3L1 和RAGE 结合会促进肿瘤的发生，而且通过激活ERK1/2-MAPK 细胞信号通路，可诱导肿瘤细胞增殖效果。研究显示[11]，CHI3L1 对于慢性丙型肝炎和肝移植手术后肝脏纤维化进展具有预测作用，但是对于乙型肝炎的研究较少。

本研究结果表明，3 组受检者FER、AFP、CHI3L1水平对比差异有统计学意义，肝损伤组高于非肝损伤组及对照组（P＜0.05），提示CHI3L1 与FER 和AFP一样在慢性乙型肝炎与肝炎肝纤维化等方面具有重要的检测价值。FER 是一种由肝脏合成的糖蛋白，是体内铁贮存的主要形式。相关研究发现[12]，肝纤维化进展加剧会导致FER 合成分泌增多。AFP 是临床上原发肝癌早期筛查应用比较广泛的一种血清肿瘤标志物。研究发现[13]，AFP 在健康成人血液中水平较低，随着肝纤维化加剧，AFP 水平呈现上升状态。而CHI3L1 水平表达升高可能会比炎症反应更加明显，而且CHI3L1 水平对于病变的性质具有一定判断作用；以CHI3L1、AFP 及FER 三项指标的检测结果为协变量，以诊断结果为因变量，进行Logistic 回归分析，预测概率模型使用似然比校验，差异具有统计学意义（P＜0.001）。3 个指标联合检测的AUC 为0.865（95%CI0.814～1.235，P＜0.001），3 项指标联合检测的诊断价值高于单项检测（P＜0.05），提示CHI3L1、AFP及FER 三项指标对于慢性乙型肝炎肝损伤诊断均具有一定准确性和特异性，并且也有研究证明AFP与FER 关系比较密切[14]；3 组受检者FN、PⅢNP、CⅣ、LN 以及HA 表达水平对比差异有统计学意义（P＜0.05），肝纤维五项是肝脏纤维化的重要标志物，其中FN 参与干细胞损伤修复、调节网状内皮系统、胶原代谢等功能，FN 的水平会随着肝脏纤维化程度加重而增加。PⅢNP 是反映肝脏内部Ⅲ型胶原合成的一个重要指标，其血清含量与肝纤维化发展程度相一致，随肝脏纤维化程度加重呈上升趋势。LN 是基底膜中特有的非胶原性结构蛋白，其水平和纤维化发展程度也呈正相关。HA 属于基质IDE 成分之一，也是肝硬化与肝纤维化的敏感指标之一。从本研究结果可以看出，肝损伤、非肝损伤以及健康者肝纤维五项指标差异显著；Spearman 相关分析结果显示：FN 与CHI3L1 水平无相关性（P＞0.05），PⅢNP、CⅣ、LN、HA 与CHI3L1 水平呈正相关（P＜0.05），说明CHI3L1 水平与PⅢNP、CⅣ、LN、HA 水平均能够判断慢性乙型肝炎肝损伤情况。相关研究显示[15]，CHI3L1 是一种与炎症相关的生物标志物，为结缔组织细胞生长因子，并且在血管异常、抗凋亡、癌细胞增殖以及组织重塑中具有重要作用。

综上所述，慢性乙型肝炎肝损伤患者血清CHI3L1 水平高于未出现肝损伤的患者及健康者。FER、AFP、CHI3L1 三种蛋白联合检测对慢性乙型肝炎患者预后预测价值更高，且CHI3L1表达与肝纤维五项检测水平具有一定相关性，因此可以根据血清CHI3L1 水平来判断慢性乙型肝炎患者的疾病严重程度。