桑黄多糖对育成期蛋鸡生长性能、血液生化及免疫相关指标的影响

宫汝淳,田小东,欧小女,李思岩,马 力,何晓燕,苗婷婷

(通化师范学院生命科学学院,吉林 通化 134002)

桑黄(Phellinuslinteus)属于担子菌纲，多孔菌目，多孔菌科，其作为药食两用的食用菌，大量研究都表明其具有抗炎、抗氧化和抗肿瘤等作用[1]。近些年，通过化学提取等方法，将中草药中有效成分进行分离能够更好地发挥其药用价值，如多糖、黄酮以及皂苷等[2]。中草药多糖价格低廉，效果显著，目前广泛的应用于畜牧业，如黄芪多糖能够显著提高仔猪的抗病力，沙葱多糖能够显著提高肉羊的屠宰率等[3]。研究表明，桑黄多糖具有化学性质稳定、无毒副作用、抗肿瘤、免疫调节、抗感染以及降血糖等生理功能[4-6]。然而，目前对于桑黄多糖在畜牧业中的应用研究较少，对于桑黄多糖在蛋鸡育成期研究更少，本试验通过在育成期蛋鸡中添加100、300 mg/(kg·bw)和600 mg/(kg·bw)桑黄多糖，探究其对育成期蛋鸡生长发育、血液指标以及免疫相关指标的影响，为桑黄多糖在蛋鸡中的应用提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 试验材料与动物 桑黄由通化三肽松茸科技有限公司提供，桑黄多糖由通化师范学院人体及动物生理教研室提取、富集制备得到(醇提，得率：1.63%，纯度：>97%)；试验所用试剂盒均购自南京建成生物有限公司。试验动物：选取720只健康无病、体重基本一致的8周龄海兰褐蛋鸡。

1.2 试验地点及时间 时间为2019年7-10月，地点为通化县旺丁生态养殖合作社。

1.3 试验动物饲养管理 蛋鸡采取4层阶梯式笼养方式，蛋鸡饮水与采食自由，每天早晨6:00和中午11:00喂料2次。采食量每日饲喂结束后进行计算。光照程序按照海兰褐饲养标准进行。按照鸡场常规程序进行饲养管理，定时清理粪便和栏舍消毒。

1.4 试验设计与日粮 试验选取720只蛋鸡，随机分成4组，每组180只，每组6个重复，每个重复30只。对照组(Control group,CK)仅饲喂基础日粮；其他3组为桑黄多糖添加组，分别在基础日粮中添加100、300 mg/(kg·bw)和600 mg/(kg·bw)桑黄多糖，预试验为7 d，试验周期为9周，第10周开始检测各项指标。各组间除添加桑黄多糖外，保证其余饲养管理无差异。基础日粮配制方法参照我国行业标准《NY/T33—2004蛋鸡饲养标准》和美国National Research Council (NRC)《家禽营养需要》(1994年)配制而成，基础日粮组成和营养水平参考文献[7]。

1.5 样品采集 每天记录采食量、体重，试验结束后测定胫骨长度、血液生化指标；采集肝脏、胰腺、肠道(十二指肠、空肠、回肠和盲肠)进行器官指数测定。

1.6 指标测定及方法

1.6.1 采食量测定方法 在每日投喂前进行饲料称重，之后将料槽中剩余饲料进行收集，按公式计算采食量：平均采食量=耗料量/试验天数/试验鸡数。

1.6.2 日增重测定方法 试验期间每天开灯前(早4：30)，每组每个重复随机选取6只蛋鸡进行称重，按公式计算日增重：平均日增重=(末期体重-初期体重)/试验天数/试验鸡数。

1.6.3 胫骨长度测定方法 试验结束后，每组每个重复随机选取12只蛋鸡进行胫骨长度测定。胫骨长度指从跗关节顶部到脚爪底部的垂直距离，使用游标卡尺进行测定。

1.6.4 血液生化指标测定方法 试验结束后，以重复为单位，每个重复选择3只蛋鸡，每组9只，禁食24 h后，采用翅静脉采血，制备血清。血清指标使用日立7600全自动生化分析仪测定，测定指标包括谷丙转氨酶(ALT)、谷草转氨酶(AST)、总蛋白(TP)、白蛋白(ALB)、甘油三酯(TG)、高密度脂蛋白(HDLC)和低密度脂蛋白(LDLC)。

1.6.5 器官指数测定方法 试验结束后，每组每个重复随机抽取3只鸡进行剖检，对组织器官进行称重，按公式计算器官指数：器官相对指数(%)=(器官的绝对重量/鸡的体重)×100%。

1.6.6 血清免疫指标测定方法 取制备好的血清，按照试剂盒(南京建成生物有限公司)说明书测定血清中IgA、IgG和IgM的含量。取剖检鸡的部分回肠肠断，去除肠道内容物，冰浴匀浆，5 000 r/min 冷冻离心10 min，酶标法测定肠黏膜sIgA的OD值，计算sIgA浓度。

1.7 数据分析 试验数据采用Excel 2007处理，使用SPSS 20.0统计软件进行方差分析，用Duncan氏法进行多重比较，试验结果采用平均值±标准差表示。P<0.05表示差异显著，P<0.01表示差异极显著。

2 结果

2.1 桑黄多糖对育成期蛋鸡采食量的影响 结果如表1所示：相对于对照组，桑黄多糖添加组的蛋鸡采食量在试验的第10、12、14、15、16周和第17周显著提高(P<0.05)；在试验第11周和第18周，300 mg/(kg·bw)组和600 mg/(kg·bw)组显著提高(P<0.05)；在试验第13周，100 mg/(kg·bw)组和300 mg/(kg·bw)组显著提高(P<0.05)。桑黄多糖添加组间对比，300 mg/(kg·bw)组显著高于100 mg/(kg·bw)组和600 mg/(kg·bw)组(P<0.05)。

2.2 桑黄多糖对育成期蛋鸡生长性能的影响 结果如表2所示，与对照组相比，桑黄多糖添加组日增重和胫骨长度显著升高(P<0.05)；桑黄多糖添加组间对比，300 mg/(kg·bw)组和600 mg/(kg·bw)组日增重显著高于100 mg/(kg·bw)组(P<0.05)，300 mg/(kg·bw)组胫骨长度显著高于100 mg/(kg·bw)组和600 mg/(kg·bw)组(P<0.05)。

表1 不同剂量桑黄多糖对育成期蛋鸡采食量的影响Table 1 Effect of different doses of Phellinus linteus ploysaccharide on feed intake of growing-laying hens (g/d)

表2 不同剂量桑黄多糖对育成期蛋鸡生长性能的影响Table 2 Effect of different doses of Phellinus linteus ploysaccharide on growth performance of growing-laying hens

2.3 桑黄多糖对育成期蛋鸡器官指数的影响 结果如表3所示，与对照组相比，桑黄多糖显著提高育成期蛋鸡的器官指数；桑黄多糖组间对比，300 mg/(kg·bw)组显著高于100 mg/(kg·bw)组和600 mg/(kg·bw)组(P<0.05)。

表3 不同剂量桑黄多糖对育成期蛋鸡器官指数的影响Table 3 Effect of different doses of Phellinus linteus ploysaccharide on organ index of growing-laying hens (%)

2.4 桑黄多糖对育成期蛋鸡血液指标的影响 结果如表4所示，与对照组相比，随着桑黄多糖添加量的增加桑黄多糖添加组的ALT、AST和HDLG呈现先降低后升高趋势，且降低显著(P<0.05)；而桑黄多糖添加组的AST、TP、TG和LDLG显著降低(P<0.05)，其中300 mg/(kg·bw)组降低趋势最大。

表4 不同剂量桑黄多糖对育成期蛋鸡血液指标的影响Table 4 Effect of different doses of Phellinus linteus ploysaccharide on hematological parameters of growing-laying hens

2.5 桑黄多糖对育成期蛋鸡免疫指标的影响 结果如表5所示，与对照组相比，桑黄多糖添加组免疫指标显著提高(P<0.05)，其中300 mg/(kg·bw)组提高最为显著。

表5 不同剂量桑黄多糖对育成期蛋鸡免疫指标的影响Table 5 Effect of different doses of Phellinus linteus ploysaccharide on immunological indexes of growing-laying hens (μg/mL)

3 讨论

近些年，大量研究表明，植物提取物以及中草药多糖能促进肠道的消化吸收、提高畜禽抗病力、提高饲料转化率，从而提高畜禽生产性能[8]。Zhu等[9]通过对肉鸡饲喂植物提取物后发现，其能显著降低肠道内致病菌量，减少应激，增加消化酶的分泌，因而改变肠道对营养的吸收，因此增加肉鸡的生长性能。李瑞萍等[10]研究表明，蝉花多糖能够显著提高雁荡麻鸡的生长性能、降低炎症发生，其最优的添加剂量为50 mg/(kg·bw)。王琳等[11]通过白术多糖饲喂育成期蛋鸡后发现，白术多糖能够显著提高日增重和采食量。桑黄多糖作为中草药多糖的一种，能够显著降低炎症反应的发生，其机制主要是通过调节MAPK信号通路，抑制通路中IL-6、IL-1β和TNF-α相对表达量，减轻炎症反应的发生[12]。此外，Xie等[13]研究发现，桑黄多糖能够显著降低LSP诱导细胞炎症反应，其机制主要是通过降低促炎细胞因子(TNF-α、IL-1β、IL-2、IL-6和IL-12)的含量和mRNA表达水平，增加抗炎细胞因子(IL-4 和 IL-10)含量和 mRNA 表达水平。肠道作为营养吸收的重要部分，炎症反应的大小决定着营养吸收的多少，桑黄多糖降低炎症的发生能够增加肠道的营养吸收，本试验中，日粮中添加桑黄多糖能显著提高采食量和日增重，可能与桑黄多糖降低了肠道内炎症反应有关，营养吸收的增加，能够显著提高机体的生长性能，此外，桑黄多糖还能提高育成期蛋鸡的胫骨长度和器官指数，其中最适添加量为300 mg/(kg·bw)。

血液生化指标可反映机体的健康状态。而血液中ALT和AST作为反映肝脏功能的重要指标，当肝脏代谢功能受到影响时，肝脏中ALT和AST大量进入血液中，导致其在血液中含量显著增高。大量研究表明，中草药能够显著降低热应激蛋鸡血清中ALT和AST含量。官丽辉等[14]研究表明，黄芪多糖能够显著降低产蛋后期蛋鸡血清中TG、AST和ALT含量，因而具有一定的降血脂功能。研究表明，桑黄多糖能够调节AST和体内的ALT活性，调节糖代谢和脂代谢活性[4]。本试验结果与之前报道相似，日粮中添加桑黄多糖能够显著降低育成期蛋鸡AST、ALT、TG和LDLG含量，显著提高HDLG含量，表现出降低血脂功能，这可能与桑黄多糖对AST和ALT调节有关。杨秋霞等[15]通过将黄芪多糖饲喂蛋鸡后发现，其对血液生化指标有显著改变，主要表现在显著降低甘油三酯(TG)和总胆固醇(TC)含量。有报道显示，桑黄多糖具有降低肝癌细胞增殖的特性[16]。肝脏作为糖代谢和脂代谢的重要器官，桑黄多糖对于育成期蛋鸡脂代谢的调节，可能与其提高了肝脏的代谢能力有关。血清TP和ALB是反映机体蛋白代谢的重要指标，ALB是由肝脏分泌，当肝细胞功能降低或其破裂时，血清中ALB会降低，本试验中，桑黄多糖显著提高育成期蛋鸡血液中TP和ALB含量，同样暗示着肝脏功能的提升。

血清和肠道中免疫球蛋白的含量与机体抗病力息息相关。研究表明，中草药多糖类物质能够提高机体免疫力。马明等[17]研究表明，五味子多糖能够显著提高蛋鸡血清中IgG含量，对蛋鸡血清中IgA含量也有一定提升作用，同时五味子多糖能够显著提高蛋鸡新城疫和禽流感免疫后抗体效价。研究表明，桑黄多糖具有一定的免疫调节功能，其主要机制是通过调节髓样分化因子以及肿瘤坏死因子相关受体进行免疫调节。与先前研究结果相似，本试验中，桑黄多糖显著提高育成期蛋鸡IgA、IgM和IgG。荆佳林等[18]研究发现，白术多糖能够显著提高血清中免疫球蛋白含量(IgA、IgG和IgM)，其中最适添加量为0.4%。肠道IgA作为先天免疫的重要球蛋白，在抗病毒以及细菌感染时发挥重要作用。张立永等[19]通过对坝上长尾鸡饲喂甘露寡糖后发现，其能显著提高sIgA含量。研究表明，桑黄多糖，能够显著增强单核-巨噬细胞功能、增强自然杀伤细胞活力功能[20]。桑黄多糖对于育成鸡蛋鸡免疫的提高，可能与桑黄多糖提高了免疫细胞的活性有关，免疫力的提高能够提高蛋鸡的抗病能力，减少疾病的发生，从而提升经济效益。