CTRP1、HMGB1、CAM水平变化与脑卒中患者神经功能损伤程度的关系研究

钱晶，谷丽丽

（河南省直第三人民医院 神经内科，河南 郑州 450000）

脑卒中的发生，能够导致患者短期内致残率和不良临床结局发生率的上升，从而增加患者的多器官功能障碍风险［1］。部分研究者认为，脑卒中的发病率可超过475/1 万人左右，部分高危地区脑卒中的发病率可进一步的上升［2］。临床上对于脑卒中患者的病情评估具有重要的意义，对于神经功能的评估，能够在疾病的治疗及临床预后随访方面发挥重要的作用。血清学炎症性相关因子，能够在病情的进展及临床预后随访方面发挥作用。肿瘤坏死因子相关蛋白（CTRP1）能够通过诱导炎症反应，加剧瀑布式炎症反应的激活，进而促进脑组织的炎症性损伤，加剧脑功能的障碍［3］；高迁移率族蛋白1（HMGB1）能够通过诱导趋化因子的富集，募集炎症因子的沉积，进而促进脑组织的损伤和功能的障碍［4］；钙调蛋白（CAM）的表达改变，能够通过影响到神经元细胞内钙离子的超载，进而诱导神经元细胞的线粒体损伤，促进神经元的凋亡［5］。为了揭示CTRP1、HMGB1、CAM 的表达及其与脑卒中患者的神经功能障碍的关系，本次研究选取选取2019 年6 月至2020 年6 月在河南省直第三人民医院接受治疗的脑卒中患者为研究对象，探讨了CTRP1、HMGB1、CAM 的表达情况，并分析了相关指标与脑卒中患者的病情关系。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2019 年6 月至2020 年6 月河南省直第三人民医院收治的92 例脑卒中患者，设为观察组，其中男50 例，女42 例；年龄54～75 岁，平均（63.74±4.33）岁。纳入标准：①年龄≥50 周岁；②经CT 或相关检查确诊为脑卒中；③无其他系统严重疾病者；④均为首次发病。排除标准：①临床资料不全者；②合并其他严重基础疾病者；③死亡病例。另选取来院体检的健康人士92 例作为对照组，其中男51 例，女41 例；年龄52～78岁，平均（63.86±4.45）岁。两组一般资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），具有可比性。本项研究经医院伦理委员会评审通过，且所有参与者均知情同意。

1.2 方法

取受试者静脉血4 mL，1 500 r/min 离心15 min，取上清液，在每个聚苯乙烯板中加入上述液体0.1 mL，4℃过夜孵育，加入磷酸盐缓冲液（PBS）洗涤3 次，每次3 min，在每个聚苯乙烯板孔中加入CTRP1、HMGB1、CAM 抗体（1∶800，购自南京伯斯金生物公司），37℃孵育30 min，加入PBS 洗涤3 次，3 min/次，每孔中加入四甲基联苯胺（TMB）溶液底物0.1 mL，37℃，20 min，加入2 M 硫酸0.05 mL 终止反应，采用Varioskan LUX 多功能酶标仪（上海赛默飞世尔科技有限公司）进行OD 值检测。

1.3 评价指标

观察两组研究对象CTRP1、HMGB1、CAM 水平，分析脑卒中患者CTRP1、HMGB1、CAM 与神经功能损伤程度的相关性。神经功能损伤程度采用美国国立卫生研究院卒中量表（NIHSS）评估（均在入院时完成）：小于7 分：轻型神经功能缺损；7～15 分：中型神经功能缺损；大于15 分：重型神经功能缺损。患者出院后第三个月月底进行电话随访，并采用改良的Rankin 量表（MRS）评估患者预后，满分5 分，≤2 分预后良好，＞2 分预后不良。

1.4 统计学方法

采用SPSS 20.0 软件对数据进行分析。计数资料以例表示；计量资料以均数±标准差（±s）表示，采用t检验和F检验（两两比较采用LSD-t检验）。相关性采用Pearson 相关分析法分析。P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组研究对象CTRP1、HMGB1、CAM 水平比较

观察组患者的CTRP1、HMGB1、CAM 水平均高于对照组，差异有统计学意义（P＜0.05），见表1。

表1 两组研究对象CTRP1、HMGB1、CAM 水平比较（n=92,±s）

表1 两组研究对象CTRP1、HMGB1、CAM 水平比较（n=92,±s）

2.2 不同神经功能损伤程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平比较

根据NIHSS 评分将患者分为轻型神经功能缺损39 例，中型神经功能缺损31 例，重型神经功能缺损22 例。不同神经功能损伤程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平存在明显不同，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 不同神经功能损伤程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平比较（±s）

表2 不同神经功能损伤程度患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平比较（±s）

2.3 脑卒中患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平与神经功能损伤程度的相关性

脑卒中患者的CTRP1、HMGB1、CAM 水平与神经功能损伤程度均呈正相关，差异有统计学意义（r=0.764、0.737、0.801,P＜0.05）。

2.4 不同预后患者CTRP1、HMGB1、CAM水平

预后不良组患者29 例，预后良好患者63 例。预后不良组患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平显著高于预后良好组，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 不同预后患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平（±s）

表3 不同预后患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平（±s）

3 讨论

临床上不同的病理性改变，能够通过诱导脑血管内皮细胞的损伤，加剧粥样斑块的沉积，进而提高脑卒中的发生风险。在具有基础性高血脂症或者动脉管壁硬化的患者中，脑卒中的发病率和病死率可进一步的恶化［6-7］。长期的观察发现，脑卒中患者的总体生存时间较短，其短期内病情变化较快，治疗后的神经功能缺损表现较为明显［8］。而临床上缺乏对于脑卒中患者神经功能缺损的相关评估性指标，虽然影像学指标能够在脑卒中患者的病情评估过程中发挥作用。但部分单中心的临床分析研究可见，磁共振或者头颅CT 检查，对于脑卒中患者神经功能评估的一致性率不足45%，其对于患者病情演变评估的灵敏度较低［9］。本次研究对于脑卒中患者血清中CTRP1、HMGB1、CAM 的表达分析研究，能够揭示脑卒中患者病情进展机理的同时，为临床上脑卒中患者的神经功能缺损评估提供参考。

CTRP1 是炎症性相关因子，其作为肿瘤坏死因子家族成员，能够通过直接诱导神经元细胞的损伤，促进神经元膜完整性的破坏，进而加剧脑组织的功能损伤和神经功能障碍的发生。相关研究还认为，CTRP1 能够在机理上诱导肿瘤坏死因子α 或者白细胞介素-6（IL-6）的富集，进而加剧炎症信号通路的激活，提高脑卒中患者的病情进展速度［10］；HMGB1 是趋化因子相关家族成员，其能够诱导补体成分C3、C4 的激活，进而提高其对于脑组织的浸润和损伤作用［11］；CAM 是钙离子调控相关蛋白，其能够提高钙离子的内流速度，加剧神经元细胞的钙超载负荷，进一步加剧神经元细胞的破坏［12］。部分研究者探讨了HMGB1 的表达与脑卒中的关系，认为在脑卒中患者中，HMGB1 的表达明显上升，但缺乏对于CTRP1、CAM 的分析研究。

对于脑卒中患者血清中CTRP1、HMGB1、CAM 的分析研究可见，在脑卒中病例组患者中，CTRP1、HMGB1、CAM 的表达浓度均明显上升，高于正常对照组人群，统计学差异较为明显，提示了CTRP1、HMGB1、CAM 的高表达均可能影响到了脑卒中的病情进展。其具体基础方面的机理，可能考虑与CTRP1、HMGB1、CAM 的下列几个方面的病理生理性改变有关［13-14］：①CTRP1 能够诱导肿瘤坏死因子家族成员的激活，提高了下游炎症性信号通路NF-KB 的激活程度，进而促进了脑组织的破坏；②HMGB1 能够提高趋化蛋白的富集，促进其对于脑血管内皮细胞的浸润和损伤，加剧了脑组织的缺血性氧化应激性损伤；③CAM能够提高线粒体钙离子的超载，导致线粒体的功能障碍，加剧了线粒体的功能损伤。沈显群等［15］研究者发现了与本次研究相似的结论，其发现在脑卒中患者中，HMGB1 的表达浓度可明显上升，平均上升幅度可超过35%以上，同时在具有明显的脑功能缺损的患者中，HMGB1 的表达波动更为显著。NIHSS 评分是评估患者脑功能缺损的评分指标，脑卒中患者的相关评分明显的上升，脑功能的缺损较为明显，提示了脑卒中患者的脑功能的障碍，这主要由于脑组织的缺血性损伤，促进了神经元细胞的凋亡，导致神经电冲动传递的异常，进而影响到了脑功能。相关关系分析研究可见，CTRP1、HMGB1、CAM 的表达与脑卒中患者的脑功能评分正相关，预后不良组患者CTRP1、HMGB1、CAM 水平显著高于预后良好组。进一步提示了CTRP1、HMGB1、CAM 的表达与脑卒中患者的病情关系，这主要由于相关指标的波动，能够反应患者神经胶质细胞或者神经元的损伤程度，进而评估病情进展。临床上可以通过检测CTRP1、HMGB1、CAM，分析脑卒中患者脑神经损伤情况，同时预测患者临床结局。

综上所述，在脑卒中患者中，CTRP1、HMGB1、CAM 的表达明显上升，同时CTRP1、HMGB1、CAM 的表达与脑卒中患者的脑功能评分密切相关。后续临床研究可以深入探讨相关指标的诊断学价值。