多次同时单采血小板和血浆对献血者血小板和血液质量的影响

庞婷婷，陈绍鹏，谭鲲

湛江市中心血站质管科，广东湛江 524002

目前临床使用的血小板多数来源于单采血小板，少数来源于由全血分离制备的浓缩血小板，新鲜冰冻血浆现主要来源于全血分离，含有包括Ⅷ凝血因子在内的全部凝血因子和血浆蛋白。Ⅷ凝血因子在治疗和预防出凝血疾病及大剂量输血所导致的凝血功能障碍方面起非常重要的作用[1]；而血浆蛋白包括白蛋白和球蛋白，白蛋白是肝脏产生的小分子量蛋白质，对维持和调节身体内环境与营养状态具有明显作用；免疫球蛋白是具有抗体活性或化学结构与抗体分子相似的球蛋白，它在人体的体液免疫反应中发挥重要的作用，具有组织修复、促进创面愈合和抗炎等作用[2]。该研究文通过观察2017年1月—2019年12月180例不同频率同时单采血小板和新鲜冰冻血浆对献血者血小板和血液制品质量的影响，探讨是否能同时单采血小板和新鲜冰冻血浆，既可为临床提供止血的血小板也可为临床提供促进血液凝集的凝血因子和维持血液胶体渗透压、增强免疫力的血浆蛋白（白蛋白和免疫球蛋白），缓解目前血液短缺的状况，现报道如下。

1 对象与方法

1.1 研究对象

随机选择曾在该站连续5次每半个月、1个月、3个月同时单采血小板和新鲜冰冻血浆一次的长期固定献血者各60名，每组年龄范围分别为17～55岁、18～55岁；男性患者例数分别为38、39、40例；组间差异无统计学意义（P＞0.05）。患者皆符合《献血法》中献血者健康检查要求和成分血血液检测要求。献血者每次单采1个治疗量血小板同时采集200 mL新鲜冰冻血浆。

1.2 仪器与试剂

血常规使用日本sysmex自动血液分析仪进行检测，Ⅷ因子和FIB检测使用日本sysmex的CA-560全自动血凝仪及其配套的凝血因子Ⅷ测量试剂盒、纤维蛋白原测量试剂盒；血浆TP检测使用德国photometer4040半自动生化分析仪和北京瑞尔达生物科技有限公司生产的总蛋白测定试剂盒进行检测；单采血小板使用美国Trima血细胞分离机；冷沉淀速冻使用深圳爱康Oceanus-F13B血浆速冻机。

1.3 标本的采集及检测指标

每次单采血小板前从献血者肘静脉抽取5 mL血液标本，采集后立即进行检测：血小板计数（Plt）、平均血小板体积（MPV），每次单采血小板时采集的新鲜血浆立刻速冻，然后-18℃以下冰冻保存，制备冷沉淀后速冻再冰冻保存，冷沉淀集中进行Ⅷ因子和FIB含量检测。

1.4 冷沉淀和去冷沉淀血浆的制备方法

将新鲜冰冻血浆置2～6℃冰箱中过夜融化，当血浆基本融化时，在2～6℃的大容量离心机下重离心，将大部分上层血浆移至空袋，制成去冷沉淀的冰冻血浆，将留下的40～50 mL血浆与沉淀物混合，制成冷沉淀凝血因子，并立刻速冻。

1.5 统计方法

该文所有数据均使用SPSS 19.0统计学软件进行计算分析。计量资料以（±s）表示，将不同次数采集的数据采用配对t检验，不同频率采集的数据进行单因素方差分析，P＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 连续5次不同频率同时单采血小板和新鲜冰冻血浆对献血者PLT、MPV的影响

连续半个月一次同时单采血小板和新鲜冰冻血浆的献血者，从第2次开始PLT升高（258.75±11.75）×109/L，MPV下降（10.33±0.43）fl，差异有统计学意义（P＜0.05）；而1个月一次和3个月一次捐献的献血者PLT、MPV差异无统计学意义（P＞0.05）。见表1。

表1 连续5次不同频率同时单采血小板和新鲜冰冻血浆对献血者PLT、MPV的影响（±s）

表1 连续5次不同频率同时单采血小板和新鲜冰冻血浆对献血者PLT、MPV的影响（±s）

注：与第1次采集组比较：a P＜0.05

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2.2 连续5次不同频率血小板单采副产品新鲜冰冻血浆制备冷沉淀Ⅷ因子含量、FIB含量分析

连续半个月和1个月一次血小板单采新鲜冰冻血浆制备冷沉淀，Ⅷ因子含量从第2次[分别为（80.11±1.29）IU和（83.22±1.89）IU]开始下降，差异有统计学意义（P＜0.05）；连续半个月一次的FIB含量从第3次（178.25±6.65）mg，开始下降，差异有统计学意义（P＜0.05），第4次开始下降较第3次更明显（170.55±5.55）mg，差异有统计学意义（P＜0.05）；而3个月一次的Ⅷ因子含量、FIB含量则差异无统计学意义（P＞0.05）。见表2。

表2 连续5次不同频率血小板单采副产品新鲜冰冻血浆制备冷沉淀Ⅷ因子含量、FIB含量分析(±s)

表2 连续5次不同频率血小板单采副产品新鲜冰冻血浆制备冷沉淀Ⅷ因子含量、FIB含量分析(±s)

注：与第1次采集组比较,b P＜0.05

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2.3 连续5次不同频率血小板单采副产品新鲜冰冻血浆制备去冷沉淀血浆总蛋白含量分析

连续5次不同频率血小板单采副产品新鲜冰冻血浆制备去冷沉淀血浆总蛋白含量差异无统计学意义（P＞0.05）。见表3。

表3 连续5次不同频率血小板单采副产品新鲜冰冻血浆制备去冷沉淀血浆TP含量分析[(±s),g/L]

表3 连续5次不同频率血小板单采副产品新鲜冰冻血浆制备去冷沉淀血浆TP含量分析[(±s),g/L]

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3 讨论

为缓解血液供应紧张局面，采供血机构一直“开源节流”，一方面加强宣传招募，另一方面应积极研究血液及其成分的合理制备与应用[3]。单采血小板是目前一种有效节约献血资源的重要方法，该研究通过对比连续5次不同频率同时单采血小板和新鲜冰冻血浆对献血者和血液制品质量的影响，探讨同时单采血小板和新鲜冰冻血浆的可行性。结果证实不同频率同时单采血小板和新鲜冰冻血浆对献血者PLT、MPV和新鲜冰冻血浆制备冷沉淀的Ⅷ因子、FIB含量影响不同。

连续每半个月一次同时单采血小板和新鲜冰冻血浆的献血者，与第1次相比，第2次PLT （258.75±11.75）×109/L升高，MPV（10.33±0.43）fl]下降（P＜0.05）。这些献血者已有多年的献血经历，而且是按时、积极踊跃的参加献血，其骨髓造血功能比非献血者活跃[1，4-7]。文献报道多次捐献血小板献血者外周血小板计数为（239.5±53.49）×109/L～（247.31±52.63）×109/L，末次采集后外周血小板计数为（236.52±52.71）×109/L～（279.89±70.31）×109/L。血小板的生成受自身反馈机制调节，包括：刺激机制和抑制机制。刺激血小板生成的主要有：血小板生成素（TPO）、巨核细胞集落刺激因子（Meg-CSF）、巨核细胞增幅因子（Meg-POT）可刺激血小板的生成。白细胞介素（如IL-3、IL-6、IL-11），红细胞生成素（EPO）等分别在多能干细胞演变成巨核细胞及血小板生成的各个阶段发挥不同的作用。抑制血小板生成的抑制因子主要来自血小板本身，如血小板第4因子、β‐血小板球蛋白及其前体、结缔组织活化肽Ⅲ、β转化生长因子等，它们通过抑制巨核细胞或抑制巨核细胞系的祖细胞的生长而抑制血小板生成。连续多次半个月捐献者，血小板连续多次频繁地大量丢失刺激巨核细胞向血小板分化，血小板代偿性增多；但是新生的血小板分化尚未成熟，以网织血小板增多为主，与成熟血小板相比体积偏小所以MPV下降，连续采集模式可使捐献者外周血循环年轻，血小板体积因此而缩减[4]。

冷沉淀是新鲜冰冻血浆在2～6℃解冻后，不溶解的白色沉淀物，是Ⅷ因子、纤维蛋白原等的浓缩制品，目前已在深度烧伤、肿瘤手术、皮肤、黏膜疾病、角膜疾病多发伤和手术创伤、自发性气胸等疾病治疗中得到广泛应用[8-10]。连续半个月和1个月一次同时单采血小板和新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀，Ⅷ因子含量较第一次采集有所下降[第1次Ⅷ因子含量分别为（86.74±0.56）IU和（86.88±0.23）IU]（P＜0.05）；与第1次相比，连续半个月一次的FIB因子含量[第1次FIB因子含量为（183.56±17.22）mg]从第3次[（178.25±6.65）mg]开始下降，第4次开始下降更明显[第4次FIB因子含量（170.55±5.55）mg]（P＜0.05）。

内、外源凝血途径被激活后，凝血因子和血小板粘连在一起参与止血。该研究与国外报道的“单采后可能出现潜在前凝血状态”相似，单采后的血小板处于激活状态，血小板膜糖蛋白GPⅡb和GPⅢa是纤维蛋白原受体，促进血小板凝集，凝块形成[11-13]。该次研究显示，半个月或1个月一次同时单采血小板和新鲜冰冻血浆制备的冷沉淀Ⅷ因子和纤维蛋白原含量偏低，与忻黎娜等[14]研究指出单采2 U血小板后Ⅷ因子较单采前下降相似。凝血因子是参与血液凝固的各种蛋白质组分，考虑半个月或1个月一次同时单采血小板和新鲜冰冻血浆时，凝血因子的消耗大于合成[15-16]，而且单采时间比捐献全血时间长，大剂量的抗凝剂进入献血者血循环，凝血酶原复合物增加使凝血酶产生增多，通过正常凝血的负反馈调节破坏凝血因子[17-18]。该研究显示同时单采血小板和新鲜冰冻血浆对血浆总蛋白含量无显著影响，捐献后会出现血浆蛋白浓度暂时降低，但同时献血可刺激肝脏合成蛋白，使献血者在献血后血浆蛋白水平应激性升高，不会影响献血者的身体健康及造成低蛋白血症[19-20]。

综上所述，为了最大程度地利用有限的血液资源，更好地保障临床用血，鉴于1个月一次的献血者PLT、MPV无明显区别，建议献血者3个月一次同时单采血小板和新鲜冰冻血浆，期间可以每个月捐献一次血小板。