Wnt/β-catenin信号通路在胎儿生长受限新生儿外周血中表达及临床意义*

冷茂东，黄和缓

(1.郑州大学附属儿童医院 郑州市儿童医院感染与免疫重点实验室检验科，郑州 450018；2.郑州大学第三附属医院科研中心，郑州 450000)

胎儿生长受限 (fetal growth restriction，FGR)是指胎儿难以达到基因生长潜力的状态，即胎儿胎盘质量、头围、身长、体质量及肾脏组织发育状态与孕周不符，严重影响新生儿的生长发育及生命安全[1-2]。随着分子生物学的不断发展，靶标筛查及靶向治疗已成为现代医学研究的焦点，研究[3-5]发现Wnt/β-连环蛋白(β-catenin)信号通路与骨代谢、骨发育、胚胎头颈发育及肾脏发育密切相关。然而现阶段关于Wnt/β-catenin信号通路与FGR新生儿生长参数关联报道较少。基于此，本研究检测了FGR新生儿外周血中Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达情况，并与新生儿生长参数进行相关性分析，为临床FGR新生儿生长发育干预方案提供一定的基础依据及理论支持,报道如下。

1 对象与方法

1.1 对象 选取2019年5月—2020年12月于郑州大学第三附属医院分娩的73例孕妇作为研究对象，分娩后根据胎龄及出生体质量百分位数之间的关系[6]分为FGR组22例、适于胎龄儿组(AGA组)34例及大于胎龄儿组(LGA组)17例。纳入标准：单胎孕妇；FGR组新生儿符合FGR有关诊断标准[7]；新生儿Apgar评分均大于8分[8]；临床资料完整；产检时未发现畸形征象。排除标准：出现羊水污染、宫内窒息、宫内感染、遗传病等；巨大儿；妊娠期肝内胆汁淤积症或妊娠期高血压等并发症者；既往存在吸烟饮酒史者。全部孕妇均已知情同意，且本研究通过医学伦理委员会审批。3组孕妇年龄、孕周及胎儿性别差异无统计学意义(P>0.05)，具有可比性。见表1。

表1 3组孕妇、胎儿一般资料比较

1.2 方法

1.2.1 检测方法 Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白：在产妇分娩后立即采集起脐静脉血5 mL，离心取上清，根据酶联免疫吸附试验(ELISA)试剂盒说明书操作步骤检测Wnt信号蛋白中7a(Wnt7a)、Wnt信号蛋白中7b(Wnt7b)、β-catenin、轴抑制蛋白2(Axin2)、糖原合酶激酶3(GSK-3β)表达水平，ELISA试剂盒购于贝克曼库尔特公司。

1.2.2 观察指标 新生儿生长参数：在新生儿断脐后，检测并记录新生儿的体质量指数(BMI)、头围、身长、胎盘质量、体质量，其中BMI=体质量(kg)/身高2(m2)。对Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白水平与新生儿生长参数进行相关性分析。

2 结果

2.1 3组新生儿生长参数比较 3组新生儿BMI、头围、身长、胎盘质量、体质量比较，差异有统计学意义(P<0.05)；与LGA组比较，FGR组和AGA组新生儿BMI、头围、身长、胎盘质量、体质量降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与AGA组比较，FGR组新生儿BMI、头围、身长、胎盘质量、体质量降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表2。

表2 3组新生儿生长参数比较

2.2 3组Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白比较 3组新生儿脐血中Wnt7a、Wnt7b、β-catenin、Axin2、GSK-3β水平比较，差异有统计学意义(P<0.05)；与LGA组比较，FGR组和AGA组新生儿脐血中Wnt7a、Wnt7b、β-catenin、Axin2、GSK-3β水平降低，差异有统计学意义(P<0.05)；与AGA组比较，FGR组新生儿脐血中Wnt7a、Wnt7b、β-catenin、Axin2、GSK-3β水平降低，差异有统计学意义(P<0.05)。见表3。

表3 3组Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白比较

2.3 Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白与FGR新生儿生长参数的相关性 FGR新生儿脐血中Wnt7a、Axin2 及GSK-3β水平与新生儿生长参数呈正相关(P<0.05)，而Wnt7b与新生儿身长无明显相关(P>0.05)，β-catenin与头围及体质量无明显相关(P>0.05)。见表4。

表4 Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白与FGR新生儿生长参数的相关性

3 讨论

近些年来FGR在妇产科发病率呈逐年上升趋势，研究[9]表明FGR的发生可能会影响新生儿体质量、BMI、胎盘质量、身长、头围等生长参数，导致其生长发育受限，甚至病情严重可造成新生儿死亡。本研究结果显示，BMI、头围、身长、胎盘质量、体质量在LGA组、AGA组及FGR组中依次呈降低趋势。进一步证实FGR新生儿生长发育受限，这一结果与张巧璇等[10]报道相符，其认为胎儿的生长发育与多种因素影响有关，如孕妇病理生理条件、胎儿所处环境、脐带及胎盘等。因此，了解参与FGR发生发展的相关因素，对其临床诊治方案的制订具有推动意义。

研究[11]表明，Wnt/β-catenin信号通路是一条与细胞生长分化及发育有关的传统信号通路，其控制许多细胞和组织器官发育过程，包括细胞增殖、细胞命运决定和组织稳态，影响Wnt/β-catenin通路的突变通常会导致疾病、癌症进展和发育缺陷。THEKA等[11]研究发现，多种因素控制着胚胎干细胞的多能性，包括Wnt/β-catenin信号通路，这对胚胎干细胞的分化和增殖至关重要，还发现持续的Wnt/β-catenin信号可维持正常的印记控制区甲基化和胚胎干细胞的稳态，是基因组稳定性的关键调控因子。因此，本研究推测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白与FGR新生儿生长参数存在一定的关联。然而现阶段临床上关于此类报道并不多见。

Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白包括Wnt7a、Wnt7b、β-catenin、Axin2、GSK-3β等因子，其中Wnt7a、Wnt7b 属于经典的Wnt 信号通路的关键配体，与肾脏发育及血管内皮的形成相关[12-13]。Axin2作为Wnt/β-catenin特异性的转录靶点，发育中的肾脏Axin2与Wnt7b呈现依赖性表达[14-15]。GSK-3β可对β-catenin氨基端进行磷酸化，此外，GSK-3β蛋白当被其上游激酶降解磷酸化后，可抑制Wnt/β-catenin信号通路表达[16]。

本研究结果显示，新生儿脐血中Wnt7a、Wnt7b、β-catenin、Axin2、GSK-3β水平在LGA组、AGA组及FGR组中依次呈降低趋势，与新生儿生长参数降低趋势一致。因此，本研究推测Wnt/β-catenin信号通路相关蛋白表达与FGR新生儿生长参数存在一定的相关性。为进一步验证这一推测，本研究相关性结果显示，FGR新生儿脐血中Wnt7a、Axin2及GSK-3β水平与新生儿生长参数呈正相关，提示Wnt/β-catenin信号通路的激活可促进新生儿的生长发育，而FGR新生儿的生长发育受限与Wnt/β-catenin信号通路被抑制有关。分析原因可能是：该通路的活性在FGR发生发展过程中逐渐沉默，导致许多印迹控制区DNA甲基化丢失，染色质抑制因子的缺失和反转录转座子的激活，导致胚胎干细胞分化受损，进而难以维持胚胎干细胞的稳态，导致FGR新生儿生长发育受限，具体生物学作用机制有待进一步深入研究。

综上所述，与正常新生儿相比，FGR新生儿生长发育受限，可能与Wnt/β-catenin信号通路活性降低有关。