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MnSO4浸种对小麦芽苗菜生长和生理活性物质的影响

2021-12-20薛建福张慧芋祁泽伟刘凯凯刘昌斌赵文欣高志强

种子 2021年11期
关键词:芽苗菜发芽势叶绿素

马 茹,薛建福,张慧芋,祁泽伟,刘凯凯,徐 伟,刘昌斌,赵文欣,高志强

(山西农业大学农学院,作物生态与旱作栽培生理山西省重点实验室,山西 太谷 030801)

“隐性饥饿”严重威胁人体健康[1]。据统计,全球目前有将近20亿人口处于隐性饥饿状态,其体内缺乏一种或多种微量元素[2]。锰(Mn)是人体内多种酶的组成元素,在能量代谢、蛋白质代谢、延缓衰老和提高免疫力等方面具有重要作用[3]。人体缺Mn会导致发育不良、食欲不振和机体衰老等各种疾病[4]。但摄入过量Mn则会引起Mn中毒[5]。据中国营养学会推荐[6],成年人每人每日Mn的适宜摄入量为4.5~11 mg,由于日常摄入的食物中Mn含量较少[7],无法满足人体对Mn元素的需求,因此通过营养强化手段提高食物中Mn含量对保证人体每日必要的Mn摄入量,解决“隐性饥饿”有重要意义。

Mn也是植物生长所必需的微量元素之一[8]。适量Mn可以提高植物抗氧化酶活性,降低丙二醛(MDA)含量[9]。但缺Mn会导致植物生物量降低[10],Mn浓度过高则会对细胞产生氧化胁迫,抑制植物生长,破坏叶绿素合成[11-12]。侯典云等[13]研究表明,适宜浓度的MnCl2溶液可以促进小麦种子萌发和幼苗生长,提高其叶绿素含量。

芽苗菜培养过程中不添加化肥农药,具有较高的营养成分[17],因而作为一种绿色保健食品开始逐渐被人们所接受[14]。其富含叶绿素、维生素C等生物活性物质,具有良好的抗氧化和保健功能[15],并可以清除体内毒素,提高人体免疫力。

目前,市面上多为豆类芽苗菜,小麦芽苗菜较为少见[16],且研究大多集中于锰肥对小麦植株生长及生理活性[13]的影响,对小麦芽苗菜方面研究较少。本试验旨在通过研究不同浓度的MnSO4溶液浸种处理对小麦芽苗菜生长状况、生物活性物质以及Mn元素积累量的影响,明确最佳的MnSO4溶液浸种浓度,为促进小麦芽苗菜生长,提高其生理活性及实现功能性生产提供理论依据。

1 材料和方法

1.1 试验设计

试验于2019年4月在山西农业大学(山西省农业科学院)进行。供试小麦品种为运旱618,采用单因素随机区组设计,设置不同MnSO4溶液浓度分别为0(CMn 0)、0.1 g·L-1(CMn 0.1)、0.2 g·L-1(CMn 0.2)、0.4 g·L-1(CMn 0.4)、0.8 g·L-1(CMn 0.8)和1.6g·L-1(CMn 1.6)共6个处理,重复3次。浸种24 h后,选取50粒均匀饱满、无破损及病虫害的小麦籽粒,于清水中浸泡24 h后取出,将种子表面水分吸干,用镊子整齐地摆放在垫有托盘和纱布的塑料培养盒中(14 cm×8 cm×7 cm)在室温下培养,并于每日18:00时喷施蒸馏水,保持湿润环境,培养10 d后收获小麦芽苗菜。

1.2 测定项目及方法

1.2.1种子发芽特性的测定[18]

从开始培育小麦芽苗菜起,每天记录发芽种子数,用于计算发芽势、发芽率和发芽指数,结合芽苗菜鲜重计算活力指数。

GF=(G3/G)×100%;

GR=(G7/G)×100%;

GI=∑(Gt/Dt);

VI=S×∑(Gt/Dt);

式中,GF为发芽势,G3为在第3天内发芽种子数,G为供试种子总数。GR为发芽率,G7为在第7天内发芽种子数。GI为发芽指数,Gt为在t日内的发芽种子数,Dt为发芽日数。VI为活力指数,S为一定时期内幼苗生长势,用萌发结束时每株苗的平均鲜重表示。

1.2.2苗长及根长的测定

发芽第10天,各处理选取15株长势一致的小麦发芽植株,利用刻度尺测定其苗长和根长。

1.2.3鲜重和干重的测定

发芽第10天,各处理选取长势均匀的15株小麦发芽植株,测量鲜重后于105 ℃杀青15 min,80 ℃烘干至恒重,称量干重。

1.2.4生理活性物质和Mn元素积累量的测定

分光光度法测定小麦芽苗菜维生素C含量,采用丙酮-分光光度计法提取叶绿素,硫代巴比妥酸-分光光度计法测定MDA含量和可溶性糖含量,愈创木酚法测定过氧化物酶(POD)活性[19]。采用火焰原子吸收分光光度法测定Mn元素含量[20],并根据Mn含量和芽苗菜干鲜重计算干重Mn元素积累量及鲜重Mn元素积累量。

1.3 数据分析

采用Microsoft Excel 2011软件进行数据常规处理,SAS 9.3软件进行显著性分析(LSD方法,α=0.05),Microsoft Excel 2011软件和R 4.0.3软件制作相关性气泡图。

2 结果与分析

2.1 不同浓度MnSO4溶液浸种对小麦芽苗菜生长的影响

小麦芽苗菜的发芽势、发芽率、发芽指数及活力指数均随MnSO4溶液浓度的增加呈先增大后减小的趋势(图1),小麦芽苗菜发芽势介于84.0%~99.3%之间。与CMn 0处理相比,CMn 0.2和CMn 0.8处理下小麦芽苗菜发芽势分别显著提高了16.7%和18.3%(p<0.05),其他处理与之差异不显著。此外,CMn 0.2和CMn 0.8处理下小麦芽苗菜发芽势较CMn 1.6处理分别显著提高了14.0%和15.5%(p<0.05)。各处理下小麦芽苗菜发芽率为92.7%~100.0%。与CMn 0处理相比,CMn 0.2和CMn 0.8处理下小麦芽苗菜发芽率分别显著提高了5.7%和6.4%(p<0.05)。CMn 0.1、CMn 0.2、CMn 0.4、CMn 0.8处理较CMn 1.6处理显著提高了小麦芽苗菜发芽势,且4个处理间差异不显著。与CMn 0处理相比,浓度为CMn 0.1、CMn 0.2、CMn 0.4处理显著提高了小麦芽苗菜的发芽指数,为7.0%~13.9%(p<0.05),CMn 1.6处理下发芽指数显著降低了9.1%(p<0.05)。CMn 0.1和CMn 0.2处理下小麦芽苗菜发芽指数显著高于其他处理。与CMn 0处理相比,CMn 0.1、CMn 0.2、CMn 0.4处理下小麦芽苗菜活力指数显著提高了21.5%~44.7%,CMn 1.6处理较之显著降低了25.7%(p<0.05)。CMn 0.2和CMn 0.4处理较其他处理显著提高了小麦芽苗菜活力指数。

注:不同小写字母表示各处理在0.05水平上差异显著。下同。A、B、C和D分别代表不同浓度MnSO4溶液下小麦芽苗菜发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数。图1 不同浓度MnSO4溶液处理下小麦芽苗菜的发芽特性Fig.1 Comparison of germination characteristics of wheat sprouts under different concentrations of MnSO4 solution

随着MnSO4溶液浓度的升高,小麦芽苗菜苗长和根长均呈先升高后降低的变化趋势(图2),与CMn 0处理相比,CMn 0.4处理下小麦芽苗菜的苗长及根长分别显著提高了14.0%和57.3%,而CMn 1.6处理下苗长则显著降低了9.8%(p<0.05)。CMn 0.1、CMn 0.2、CMn 0.4、CMn 0.8处理下苗长和根长均较CMn 1.6处理下显著提高,CMn 0.4较CMn 0.8处理下苗长显著增加了9.8%。此外,CMn 0.1和CMn 0.2处理与CMn 0.4、CMn 0.8处理下小麦芽苗菜的苗长和根长差异均不显著。

注:不同小写字母表示各处理在0.05水平上的统计差异。图2 不同浓度MnSO4溶液处理下小麦芽苗菜的苗长和根长Fig.2 Comparison of seedling length and root length of wheat sprouts under different concentrations of MnSO4 solution

小麦芽苗菜单株的鲜重和干重均随MnSO4溶液浓度的升高呈先增加后减少的趋势(图3),与CMn 0处理相比,CMn 0.1和CMn 0.2处理下小麦芽苗菜鲜重分别显著增加了11.0%和27.1%,干重则分别显著增加9.0%和25.4%;而CMn 1.6处理下鲜重和干重则分别显著降低了18.3%和17.3%。CMn 0.2处理下小麦芽苗菜干重和鲜重显著高于CMn 0、CMn 0.1、CMn 0.8、CMn 1.6处理,与CMn 0.4差异不显著;且CMn 0.4处理下干重和鲜重显著高于CMn 0、CMn 0.8、CMn 1.6处理。

注:A和B分别代表不同浓度MnSO4溶液下小麦芽苗菜的鲜重和干重。图3 不同浓度MnSO4溶液处理下小麦芽苗菜单株的鲜重和干重Fig.3 Comparison of fresh weight and dry weight of wheat sprouts under different concentrations of MnSO4 solution

2.2 不同浓度MnSO4溶液浸种对小麦芽苗菜生理活性物质的影响

随着MnSO4溶液浓度的升高,小麦芽苗菜叶绿素a、叶绿素b和总叶绿素含量、叶绿素a/b(表1)、POD含量(图4 A)和维生素C含量(图5)均呈先升高后降低的趋势。而MDA含量和可溶性糖含量则表现为先降低后升高的变化趋势(图4 B、图4 C)。

注:A、B和C分别代表不同浓度MnSO4溶液处理下小麦芽苗菜POD活性、MDA含量和可溶性糖含量。图4 不同浓度MnSO4溶液下小麦芽苗菜的抗氧化活性物质的影响Fig.4 Effects of different concentrations of MnSO4 solution on antioxidant activity of wheat sprouts

与CMn 0处理相比,CMn 1.6处理下小麦芽苗菜的叶绿素a含量、叶绿素b含量、总叶绿素含量及叶绿素a/b分别降低了34.9%、31.7%、34.2%和4.6%,差异达显著水平,其他处理间没有显著差异(表1);与CMn 0.8和CMn 1.6处理相比,CMn 0.2处理下叶绿素a含量、叶绿素b含量、总叶绿素含量及叶绿素a/b显著增加,增幅分别为31.3%~74.8%、27.7%~65.8%、30.5%~72.8%和2.8%~5.4%,但是与其他处理间差异不显著,且CMn 0、CMn 0.1、CMn 0.2和CMn 0.4各处理间差异均不显著。

表1 不同浓度MnSO4溶液处理下小麦芽苗菜的叶绿素含量Table 1 Comparison of chlorophyll content in wheat sprouts under different concentrations of MnSO4 solution

小麦芽苗菜POD活性于CMn 0.2处理下达最大值,364.3 U·(g·min)-1(图4 A),与其他处理相比显著提高了24.7%~56.7%。与CMn 0处理相比,CMn 0.2和CMn 0.4处理下POD活性分别显著提高了58.5%和19.4%,而CMn 1.6处理较之显著降低了31.4%。

小麦芽苗菜MDA和可溶性糖含量分别为2.2~3.6 μmol·g-1和10.7~13.9 mg·g-1(图4 B、图4 C)。对于MDA含量,与CMn 0处理相比,CMn 0.2处理显著降低了25.7%,而CMn 1.6处理则显著提高了22.3%,其他处理与之差异不显著。MDA含量于CMn 0.2处理下达最小值,且较CMn 0、CMn 0.8和CMn 1.6处理显著降低了25.7%~39.3%。CMn 1.6处理下MDA含量最高,且较CMn 0、CMn 0.1、CMn 0.2和CMn 0.4处理显著增加了22.2%~64.7%。对于小麦芽苗菜的可溶性糖含量,CMn 0处理与其他各处理间差异均不显著,CMn 0.2处理下可溶性糖含量较CMn 0.8处理显著降低了23.4%,较其他处理差异不显著。

在不同浓度MnSO4溶液处理下,小麦芽苗菜的维生素C含量为0.3~0.5 mg·g-1(图5)。与CMn 0处理相比,CMn 0.1、CMn 0.2和CMn 0.4处理下维生素C含量显著提高了21.7%~41.5%,而CMn 1.6处理则显著降低了21.5%。CMn 0.2处理下维生素C含量达到最大值,与CMn 0.1处理差异不显著,较其他处理显著提高了14.0%~44.5%。

图5 不同浓度MnSO4溶液处理下小麦芽苗菜维生素C含量Fig.5 Effects of different concentrations of MnSO4 solution on vitamin C content in wheat sprouts

2.3 不同浓度MnSO4溶液浸种对小麦芽苗菜Mn元素积累量的影响

小麦芽苗菜鲜重Mn元素积累量和干重Mn元素积累量均随Mn浓度的增加而增加(图6)。与CMn 0处理相比,CMn 0.1、CMn 0.2、CMn 0.4、CMn 0.8和CMn 1.6处理下小麦芽苗菜鲜重的Mn元素积累量分别显著增加了7.5、10.9、13.8、20.6、29.3倍,干重的Mn元素积累量分别显著增加了7.3、10.7、13.4、20.0、29.7倍。

注:A和B分别代表不同浓度MnSO4溶液下小麦芽苗菜鲜重Mn元素积累量和干重Mn元素积累量图6 不同浓度MnSO4溶液处理下小麦芽苗菜的Mn元素积累量Fig.6 Effects of Different concentrations of MnSO4 solution on Mn accumulation in wheat sprouts

小麦芽苗菜生长状况、生理活性物质和Mn元素积累量的相关分析表明(图7),小麦芽苗菜发芽势和发芽指数与发芽率呈显著正相关(p<0.05)。发芽指数、活力指数、叶绿素含量和POD活性之间均呈显著正相关,且均与维生素C含量呈显著正相关,而与MDA含量呈显著负相关。MDA含量与维生素C含量呈显著负相关,与可溶性糖含量呈显著正相关(p<0.05)。鲜重Mn元素积累量和干重Mn元素积累量与其他指标间无显著相关。

注:图中×代表在0.05水平上不显著。图7 不同浓度MnSO4溶液下小麦芽苗菜生长状况、生理活性物质和Mn元素积累量的关系Fig.7 Relationship between growth status, physiological active substances and Mn accumulation of wheat sprouts under different concentrations of MnSO4 solution

3 讨 论

3.1 不同浓度MnSO4溶液浸种对小麦芽苗菜生长的影响

种子活力常用来衡量植物对环境因子的适应程度,据报道,采用MnSO4浸种可提高种子发芽率和发芽势,从而提高种子活力[21-22]。本研究结果表明,不同浓度MnSO4溶液浸种下小麦发芽势、发芽率、发芽指数和活力指数不同,整体上表现为较低浓度(0.2~0.8 g·L-1)促进,较高浓度(0.8~1.6 g·L-1)抑制,这种变化规律与侯典云等[13]的研究结果类似,原因可能是锰胁迫环境下种子内部储存物质的分解及转化受到抑制,进而影响种子萌发[23]。有研究表明,小麦芽苗菜苗长、根长、鲜重和干重均表现为“低促高抑”[23]。较高浓度Mn溶液浸种会对小麦植株根系生长造成显著的抑制作用[24],本研究结果与之基本一致。本试验条件下,与对照相比MnSO4溶液浸种浓度在0.1~0.8 g·L-1之间时,小麦芽苗菜的4个发芽指标和根系长度有促进作用,在浓度为1.6 g·L-1时则表现为抑制作用。而小麦芽苗菜的鲜重则在MnSO4溶液浸种浓度为0.1~0.4 g·L-1和0.8~1.6 g·L-1时分别表现为升高和降低趋势。

3.2 不同浓度MnSO4溶液浸种对小麦芽苗菜生理活性物质的影响

Mn是叶绿体的结构成分,是维持叶绿体结构所必需的元素。有研究表明,随着Mn溶液浓度升高,小麦幼苗叶绿素含量呈先升高后降低的趋势,在浓度为0.06 g·L-1时光合特性最佳[25];而MnSO4过量(≥200 mol·L-1)则会显著降低柱花草叶绿素含量[26],本研究结果与之一致,即MnSO4溶液浓度为0.8~1.6 g·L-1时降低了小麦芽苗菜的叶绿素含量,MnSO4溶液浓度较低时(0.1~0.4 g·L-1)增加了叶绿素含量。俞慧娜等[27]研究表明,随着Mn浓度的增加,POD活性先增加后减小,MDA含量先降低后升高,可溶性糖含量先升高后降低再升高。还有研究表明,随着Mn浓度增加,野大豆幼苗POD活性先增加后减小,MDA含量先降低后升高,可溶性糖含量增加[28],本研究结果与之有所不同。本研究结果表明,随着MnSO4溶液浓度升高,小麦芽苗菜POD活性先升高后降低,MDA含量和可溶性糖含量先降低后升高。这可能是由于不同品种小麦和不同类型的作物对MnSO4溶液耐受性不同,低浓度激发了小麦芽苗菜自身防御性反应,未对其产生毒害作用;同时低浓度MnSO4溶液还有利于清除叶片产生的活性氧,减少膜脂过氧化损伤。与ck相比,本试验条件下较低浓度MnSO4溶液(0.1~0.4 g·L-1)提高了小麦芽苗菜POD活性,降低了MDA含量;较高浓度MnSO4溶液表现则相反。本研究结果中的MnSO4溶液浸种最适浓度可能与作物类型和供试的生长条件有关,本试验为水培培养,因此有待进一步研究。

3.3 不同浓度MnSO4溶液浸种对小麦芽苗菜Mn积累的影响

Mn是植物和动物生长发育必需的微量元素之一,无论植物还是动物,体内Mn含量缺乏或者过高都会对个体健康造成威胁。本研究结果表明,随着Mn浓度的增加,小麦籽粒Mn积累量上升,与曾建国等[29]研究类似。小麦芽苗菜的Mn积累量为33.9~58.5 μg·g-1,《中国居民膳食营养素参考摄入量》(2013)[6]推荐成人每天的Mn摄入量为4.5~11.0 mg。为满足人体的需求又不至于食用超标,按照饮食习惯,如果每日摄入100 g鲜食小麦芽苗菜,则本试验条件下浓度为0.1 g·L-1及0.2 g·L-1的MnSO4溶液对小麦籽粒进行浸种,可实现小麦芽苗菜Mn含量的最佳富集以供食用。

4 结 论

本试验研究条件下,较低浓度(0.1~0.8 g·L-1)MnSO4溶液浸种对小麦的发芽指标、根长和苗长均有促进作用;且低浓度(0.1~0.4 g·L-1)对小麦芽苗菜的干鲜重、POD活性和维生素C含量等有显著的促进作用,而对MDA含量和可溶性糖含量有一定抑制作用。高浓度(1.6 g·L-1)MnSO4溶液浸种会抑制小麦芽苗菜生长和生理活性。在MnSO4溶液浓度为0.1 g·L-1和0.2 g·L-1时培育出的小麦芽苗菜既可以满足人体的需求又不至于食用超标。综上,本研究中MnSO4溶液浓度为0.2 g·L-1时有利于小麦芽苗菜生长及促进Mn元素的积累,为小麦芽苗菜栽培最佳浸种浓度。

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