血清Vaspin、MMP-2联合Lp-PLA2对CAS斑块稳定性的诊断价值

蒋海昌 郭亚鹏 王枫 郭道骝 李磊

作者单位：1.南京医科大学附属无锡市人民医院神经内科，江苏，无锡214000

2.皖南医学院附属弋矶山医院神经内科，安徽，芜湖241000

颈动脉粥样硬化是一种常见的心脑血管疾病，多发生于中老年人群，病死率和致残率较高［1］。颈动脉不稳定斑块脱落后成为血流中栓子，随血流到达大脑会堵塞远端脑动脉，导致血管堵塞和狭窄，引发缺血性脑血管事件发生［2］。准确评估患者劲动脉斑块稳定性，进行针对性治疗对患者预后意义重大。临床主要采用彩色多普勒超声、CT 血管造影等评估斑块稳定性，但缺乏定量指标［3］。近年来有研究认为脂蛋白相关磷脂酶A2（Lipoprotein associated phospholipase A2，Lp-PLA2）活性升高与急性脑梗死发生和复发有关［4］。血清内脏脂肪组织来源的丝氨酸蛋白酶抑制剂（visceral adipose tissue-derived serine protease inhibitor，Vaspin）是一种新发现的脂肪细胞因子，可以抑制内皮细胞凋亡与高糖刺激血管平滑肌细胞增殖，与2 型糖尿病及血管病变密切相关［5］。基质金属蛋白酶-2（Matrix metalloproteinase-2，MMP-2）不仅能够降解细胞外基质蛋白质，还可以促进血管收缩MMP2基因C 端非催化片段形成［6］。本研究将探究颈动脉粥样硬化患者血清Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平变化及其临床意义，为临床治疗方案提供理论参考依据。

1 资料与方法

1.1 一般资料

选取2018年1月至2019年12月在本院接受治疗的98 例颈动脉粥样硬化患者。纳入标准：①参照《中国头颈部动脉粥样硬化诊治共识》［7］的标准，经超声检测发现存在高回声、异质回声、等回声以及低回声斑块，提示颈动脉粥样硬化斑块形成；②无颈部肿块等器质性病变；③治疗依从性高；④患者或家属知情且自愿参与研究并签署知情同意书。排除标准：①严重感染患者；②合并恶性肿瘤者；③既往有脑梗死病史；④免疫缺陷患者；⑤合并血液系统疾病。根据超声检查结果分为稳定斑块组（n=48 例）和不稳性斑块组（n=50例）。选取同期45 例健康体检者作为对照组。三组受试者的基本资料比较差异无统计学意义（P＞0.05），见表1。本研究经医院医学伦理委员会批准通过。

表1 3 组受试者基本资料比较［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of basic data among 3 groups［n（%），（±s）］

表1 3 组受试者基本资料比较［n（%），（±s）］Table 1 Comparison of basic data among 3 groups［n（%），（±s）］

组别不稳定斑块组稳定斑块组对照组F/χ2值P 值n 50 48 45性别（男/女）32/18 28/20 26/19 0.481 0.786年龄（岁）54.82±12.51 53.61±11.24 52.29±11.67 0.541 0.583 BMI（kg/m2）23.14±4.58 22.39±4.35 23.25±4.81 0.496 0.610饮酒史20（40.00）21（43.75）17（37.78）0.354 0.838吸烟史19（38.00）18（37.50）19（42.22）0.261 0.878

1.2 方法

Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2 检测方法：患者入院第2 d、对照组体检当日清晨空腹静脉取血5 mL，2 000 r/min 离心8 min，取上清液待测。采用双抗体一步夹心法酶联免疫吸附法检测Vaspin、Lp-PLA2，试剂盒均购自上海臻科生物科技有限公司，采用明胶酶谱法检测MMP-2，试剂盒购自上海信帆生物科技有限公司，严格按照试剂盒说明操作。

1.3 斑块稳定性的评估标准［8］

颈动脉斑块分类：①扁平斑：内膜回声不光滑，局部增厚1.5～2.0 mm；②软斑：呈局限性均匀或不均匀低回声、弱回声斑块，隆起厚度超过1.5 mm，表面有连续性轮廓回声；③硬斑：局部回声增强，后方声衰减较明显，颈动脉与斑块基底附着处基底宽为宽基底，附着处基底窄为窄基底；④溃疡型斑：斑块粗糙不平，溃疡边缘为低回声，斑块表面缺损呈火山口样，长度、深度均大于2 mm。

稳定斑块：扁平斑、宽底硬斑，不稳定型斑块：溃疡斑、软斑、窄底硬斑。

1.4 观察指标

①检测并比较三组受试者的Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平差异。②采用Pearson 相关性及散点图分析Lp-PLA2水平与Vaspin、MMP-2的相关性。③采用ROC 曲线评估Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2 三个指标及其联合检测对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的诊断价值。

1.5 统计学分析

采用SPSS 18.0 统计软件统计分析数据，计数资料采用n（%）表示，行χ2检验；计量资料采用（）表示，两两比较应用t检验，多组间比较行方差分析，以P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 3 组Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平比较

Vaspin水平：不稳定斑块组＜稳定斑块组＜对照组，MMP-2、Lp-PLA2水平：不稳定斑块组＞稳定斑块组＞对照组，差异均有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 3 组Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平比较（±s）Table 2 Comparison of vaspin，MMP-2 and Lp-PLA2 levels among the 3 groups（±s）

表2 3 组Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平比较（±s）Table 2 Comparison of vaspin，MMP-2 and Lp-PLA2 levels among the 3 groups（±s）

注：与对照组比较，aP＜0.05，与稳定斑块组比较，bP＜0.05。

组别不稳定斑块组稳定斑块组对照组F 值P 值n 50 48 45 Vaspin(μg/L)1.16±0.18ab 1.57±0.26a 1.92±0.38 86.629＜0.001 MMP-2(ng/mL)382.46±57.93ab 263.76±44.39a 215.48±42.64 147.536＜0.001 Lp-PLA2（g/L）116.78±33.89ab 84.59±21.76a 53.77±12.74 76.972＜0.001

2.2 颈动脉粥样硬化斑块不稳定组患者Lp-PLA2与Vaspin、MMP-2的相关性

Pearson 相关性分析结果显示，Lp-PLA2 与MMP-2 呈正相关（r=-0.489，P＜0.05），与Vaspin 呈负相关（r=0.579，P＜0.05）。Lp-PLA2 与Vaspin、MMP-2 存在直线相关性（R2=0.118、0.112）。见图1。

图1 Lp-PLA2 与Vaspin、MMP-2 的直线相关性散点图Figure 1 Scatter plot of linear correlation between Lp-PLA2 and vaspin，MMP-2

2.3 Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的诊断价值

ROC 曲线结果显示，Vaspin、MMP-2联合Lp-PLA2 检测诊断效能最大，AUC 为0.946，特异性为0.967，灵敏性为0.933。见表3、图2。

表3 Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2水平对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的诊断价值Table 3 Diagnostic value of vaspin，MMP-2 and Lp-PLA2 levels for the stability of CAS plaques

图2 ROC 曲线Figure 2 ROC curve

3 讨论

缺血性脑卒中发生与颈动脉粥样硬化斑块形成关系密切，动脉粥样硬化不稳定斑块破裂出血、脱落会增加血管狭窄甚至栓塞风险，进而发生缺血性中风［9］。医生会根据病人血管狭窄程度和斑块状况分析患者病情进而制定后续治疗方案，可见准确评估并预测颈动脉粥样硬化斑块稳定性对治疗和预防缺血性脑卒中意义重大［10］。

本研究发现不稳定斑块组、稳定斑块组、对照组Vaspin 依次增加上升，MMP-2、Lp-PLA2水平依次下降，显示Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2 参与介导斑块形成整个过程。分析认为炎症反应在颈动脉粥样硬化斑块的形成过程中起到重要作用，Vaspin则可以经由抑制炎症反应来延缓动脉粥样硬化过程，而存在斑块患者Vaspin水平下降导致机体对于炎症抑制作用减弱；MMP-2 经由增加细胞核密度、降解细胞外基质成分以及上调内膜面积而为斑块形成提供有利条件，因此MMP-2水平上升显示机体斑块形成增多；Lp-pla2 作为一种血管特异性炎症介质，参与斑块炎症过程，即斑块形成和斑块破裂过程，Lp-pla2 上升显示斑块形成和斑块破裂增加［11］。国内研究者认为随着冠心病患者病情加重，血清Vaspin水平明显下降，这种下降趋势增加了斑块不稳定性［12］。Chen 等［13］研究发现颈动脉粥样硬化斑块稳定患者的血清MMP-2水平显著高于不稳定斑块患者和健康者，与本研究结果基本一致。Pearson 相关性分析结果显示，Lp-PLA2与MMP-2 成正相关，与Vaspin 成负相关，散点图结果显示Lp-PLA2 与Vaspin、MMP-2 存在直线相关性，表明在颈动脉粥样硬化斑块不稳定患者体内随着Lp-PLA2、MMP-2 相应升高，Vaspin 会相应降低，显示三指标可能一同介导动脉粥样硬化过程。Wang 等［14］研究认为Lp-pla2水平上升会增加动脉粥样硬化斑块破裂的风险，Lp-pla2 有助于预测中风发生与复发。国内研究则发现MMP-9、Lp-PLA2 以及C 反应蛋白单一指标用于评估斑块性质AUC 值均超过0.7，而三指标联合用于评估斑块性质AUC 值接近0.9，显示各指标联合可以有效提高对于斑块性质评估价值［15］。本研究中ROC 曲线显示，Vaspin、MMP-2联合Lp-PLA2 检测诊断效能最大，AUC 为0.946，特异性为0.967，灵敏性为0.933，也显示三种指标联合有助于提高对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的预测价值。虽然Lp-PLA2在诊断颈动脉粥样硬化斑块稳定性的AUC 值较高，但特异性不高，对颈动脉粥样硬化斑块稳定性的诊断仍有一定的局限性，三者联合检测诊断效能较高，可作为临床诊断的新方式。

综上所述，Vaspin、MMP-2、Lp-PLA2 对颈动脉粥样硬化斑块稳定性具有一定诊断价值，三者联合检测具有更好诊断效能，可为临床上预防缺血性脑卒中提供评估依据。