鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤组织中HPV/补体C3C4表达及意义

马汝显 周玲

作者单位：安徽省宿州市第一人民医院耳鼻喉科，安徽，宿州234000

鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤（nasalcavity orparana-Sinonasalinvertedpapilloma，NIP）是一种具有潜在的复发和癌变倾向特征的良性肿瘤，其恶化大部分是由于人乳头状瘤病毒（human papillomavirus，HPV）HPV？感染所导致，以涕中带血丝、脓性涕、反复头疼为症状表现［1］。近些年来，随着人们工作以及生活压力的增大，该病的患病频率逐渐升高，对患者的生活质量和生命健康影响巨大［2］。目前临床治疗该病的方法为鼻腔乳头状瘤摘除术，其治疗效果随着医疗水平的上升而提高，但有关文献报道［3］，该病具有高复发率特点。HPV 是一种感染皮肤、黏膜的嗜皮性DNA 病毒，能够引起机体免疫反应。而补体C3、C4 是补体系统中最常见的组分，在机体免疫反应中异常激活，从而导致其外周血中的表达升高。已有研究将补体C3C4 运用于红斑狼疮的诊断。但目前关于其在鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤中的诊断应用鲜有研究。基于此，本研究探讨鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤组织中HPV/补体C3C4表达及意义。

1 一般资料与方法

1.1 一般资料

选取2017年3月至2020年9月本院收治的鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者为观察组（73例），选取同期收治的无鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者为对照组（32例）。两组患者一般资料差异无统计学意义（P＞0.05）。本研究经医院医学伦理委员会批准。见表1。

表1 一般资料比较（±s）Table 1 Complement of Table 1 General information（±s）

表1 一般资料比较（±s）Table 1 Complement of Table 1 General information（±s）

组别观察组对照组t/χ2值P 值n 73 32年龄（岁）57.14±7.23 57.18±7.25 0.026 0.979性别男/女38/35 17/15 0.010 0.919

1.2 诊断标准

参照《乳头状瘤。实用耳鼻咽喉头颈外科学》［4］拟定：①单侧病变，持续性鼻塞；②嗅觉退化；③面部僵硬；④涕血、头部疼痛、鼻息肉、浓性涕；⑤经影像学确诊。

纳入标准：符合鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的诊断标准；年龄20～64 岁；意识清醒并签署同意书；排除标准：严重的基础性疾病；患有精神疾病；同时患有其他鼻病；妊娠期妇女；月经期女性；依从性较差患者。

1.3 方法

①患者在检查前不可食用高嘌呤、高蛋白食品，且抽取静脉血必须要在空腹10 小时后的次日清晨。②补体C3、C4水平检测：使用散射比浊法检测。采集患者3 mL 的静脉血液放入采血管，离心吸取外周血血清，放入冰箱保存待检验。血清补体C3、C4，应用全自动生化分析仪（山东科博有限公司，型号：BK-600）及原装配套试剂检测。正常范围值：补体C3 为（0.85～2.00）g/L；C4 为（0.12～0.40）g/L。③HPV 检测：取鼻腔鼻窦组织和局部粘液制作样本进行检测，标本常规经4%甲醛（规格：溶液剂20 mL 西安天正药用辅料有限公司国字准号H53031618）固定石蜡（规格：500 mL 西安天正药用辅料有限公司国字准号H49815831）包埋4 μm厚连续切片。采用免疫组织化学Envision 二步法染色。用山羊IgG（Normal Goat IgG）代替一抗作阴性对照，用抗体稀释液作1∶100 稀释。用DAB（北京纪宁生物工程有限公司）显色后进行染色、封片。两组切片在四百倍光学显微镜下观察，阳性细胞为浅黄颗粒；阳性细胞数小于四分之一（-）；阳性细胞数大于四分之一（+）。感染率= 有/无鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者标本阳性数/总调查例数×100%。

1.4 统计学方法

使用软件统计SPSS 22.0 处理数据。符合正态分布以及方差齐性的计量资用（）表示，行独立样本t检验；计数资料计数资料用n（%）表示，行χ2检验。采用ROC 曲线分析C3、C4 对其预测价值；P＜0.05 为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 两组补体C3、C4水平比较

观察组鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者的补体C3、C4水平较对照组明无鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者明显更高，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表2。

表2 两组补体C3、C4水平比较（±s）Table 2 The expression of two groups of complement C3 and C4（±s）

表2 两组补体C3、C4水平比较（±s）Table 2 The expression of two groups of complement C3 and C4（±s）

组别观察组对照组t 值P 值n 73 32--C3（g/L）1.03±0.24 0.85±0.22 3.626＜0.001 C4（g/L）0.28±0.05 0.17±0.06 9.751＜0.001

2.2 两组HPV 阳性率表达

观察组HPV 呈阳性表达患者较对照组明显更多，差异有统计学意义（P＜0.05）。见表3。

表3 两组HPV 阳性表达［n（%）］Table 3 Positive expression of HPV levels in the two groups［n（%）］

2.3 补体C3、C4 诊断价值分析

ROC 分析结果显示，补体C3、C4及两项联合指标的ROC 曲线下面积AUC 分别为0.701、0.739、0.919（P＜0.05）。由此可得，两项联合指标价值明显更高，其敏感度分别为91.8%、75.3%、87.7%，特异度分别为50.0%、75.0%、87.5%，cut-off 值分别为0.760、0.235、0.708（P＜0.05）。见表4、表5、图1。

图1 补体C3、C4及联合指标的ROC 曲线Figure 1 ROC curve of C3，C4 and combined indicators

表4 补体C3、C4 诊断价值分析ROC 曲线下面积AUC 分析Table 4 Complement C3，C4 diagnostic value analysis ROC area under the curve AUC analysis

表5 补体C3、C4 诊断效能分析Table 5 Efficacy analysis of C3 and C4 in diagnosing stroke outcome

3 讨论

鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤是一种DNA 病毒，该病的发病机制尚未明确，但有研究表示可能与HPV、炎症因子有关［5］；如不及时治疗可能会发生恶化对人的危害严重影响鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者的生命安全［6］，也给家庭造成了巨大经济负担。目前，临床治疗该病的方法是鼻腔乳头状瘤摘除术，但其特点为高复发率，在手术的过程中尽量做到一次切除干净，如术中未做到，必然会增加该病的复发率［7］。因此，鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的早期诊断是提高预后的关键［8］。

补体是存于人体血清和组织液内免疫的一道重要的防线［9］。当补体系统被激活后各组分以酶原形式存在于血清中［10］，其具有杀菌、溶菌的免疫活性［11］。而补体C3、C4 是最为常见的补体组分［12］。在发生炎症时，肝脏内会产生较多的补体C3、C4；但巨噬细胞在肝外也能产生，且补体C3、C4 大于肝内产生［13］。在本研究中，鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者的补体C3、C4水平高于无鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者，其原因可能与补体C3、C4大量激活有关［14］，当炎症反应发生时，肝脏与巨噬细胞同时产生补体C3、C4 抵抗细菌侵入，而当微生物以及细菌过多且无外界干预时，体内的补体C3、C4 激活过度将会产生降低鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者抵抗细菌能力、加重炎症、损伤组织等一系列危害［15］。在本研究中，使用散射比浊法检验补体水平，结果显示观察组鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者补体C3、C4水平较对与照组无鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤患者明显更高。补体C3、C4 以及二者联合预测ROC 曲线下面积AUC 分别为0.701、0.739、0.919；补体C3、C4 的二者联合预测的敏感度分别为91.8%、75.3%、87.7%；特异度分别为：50.0%、75.0%、87.5%；临界值分别为0.760、0.235、0.708，均具有良好的敏感度、特异性。提示补体C3、C4 以及二者联合均可预测检测鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤，且其预测效能由高到低依次为联合检测、补体C4、补体C3，这与有关研究报道内容一致。

HPV 是一种无囊膜的病毒，可通过母婴感染，性交，公共泳池、浴室、马桶等接触感染身体表层皮肤、粘膜，其主要分布在口咽、肛周、生殖道［16］。有研究报道，百分之八十的女性都曾感染过HPV［17］，该病毒不仅潜伏期较长，而且感染率极高，当人体免疫力正常时其症状不显，因自身免疫可把大多数病毒清除；但在免疫力下降时，开始显现［18］，该病会引起呼吸道癌、子宫癌、宫颈癌等疾病。目前，治疗该病的方式主要以切除术为主预防为辅，其具有易复发的特点［19］。但因早期HPV 症状不显，所以检测尤为重要。在本研究结果提示该HPV 阳性表达结果表示HPV可能与鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的发生有关。

综上所述，HPV 可能参与了鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的发生；补体C4、补体C3及二者联合均可作为鼻腔鼻窦内翻性乳头状瘤的诊断指标，值得临床应用。但本研究属于单中心小样本研究，还需大样本多中心研究、考证。同时随访观察时间有限，故还有待进一步开展远期观察的研究检验。