MMP-9(基质金属蛋白酶)在妊高症患者胎盘中的表达水平与母婴结局的相关性研究

李厦洁，朱立茎，梁丽华

（东莞市石碣医院，广东 东莞 523290）

对于妇女在妊娠中的高血压则是属于妊娠期比较特有的一种疾病，以妊娠中晚期出有高血压、水肿、蛋白尿等临床特征。其病例变化主要是通过全身的小动脉一般发生痉挛，一般在我国这种疾病的并发为10%左右。另外就是在此过程中，金属基质的蛋白酶（MMPS）能够比较好的降低相关的外基质的蛋白酶，各种成份可被其组织抑制物(tissueinhibitorsofmetalloproteinases, TIMPs)具有一定的抑制性, 其活性依赖于钙、镁等金属性的离子浓度，参与创伤修复、肿瘤侵袭、转移等过程，与排卵、受精卵着床、一般在胎盘形成的过程中，月经已经宫颈的扩张等一些生殖系统的密切程度具有一定的相关性。另外就是对于MMP9 和TIMP1 则是互相的影响以及滋养层细胞的重要生化性的介质，另外就是在癫痫的前期（PE）则是出现相关的高血压、尿蛋白以及出现的各种的头疼等眼花等针状的发生，严重的患者则会出现相关的溶血以及血小板不断的减少，对于妊娠期间的高血压疾病主要威胁母婴的健康，进一步的严重会导致母婴的死亡以及婴儿发病率的不断增加主要原因之一。根据相关的研究发现，该病对于细胞的滋养以及侵蚀子宫的螺旋的动脉的线等以及胎盘生理性障碍具有一定的关系。一旦MMP-9 的滋养细胞植入到细胞中，则是发挥重要的作用。妊娠期高血压疾病患者胎盘MMP-9 表达明显低于正常妊娠，MMP-9 的相关的趋势在不断的下降，再有就是在妊娠期的高血压患者MMP-9 比较低的，这样长期以往导致相关的细胞的能力不断的出现下降的趋势，继而抑制了相关的细胞的侵入性，最后导致相关的发育不良，MMP-9 的滋养细胞的这种能力下降，进一步的滋养润了细胞的各种的润侵性。最后导致的因素就是发育不良。MMP-9 具有一定的降解相关的细胞的外基质的相关成分的作用，在ITMP-1 调控作用下，MMP-9 在相关的绒毛的滋养不断的进入相关的母体的细胞，这种进入母体的细胞可以说发挥着一定的作用，随着近些年人们对于妊娠的高血压的发病率可以说不断上升，其中对于孕妇、新生儿的死亡主要原因，但是就目前为止，对于其中的妊娠的高血压的一些发病机理，医生并不是非常的清楚，这个主要的核心可能是和胎盘的组织中的MMP-9 和ITMP-1 的相关表达具有一定的关系，其中根据我们相关的组织中的MMP-9 的表达能力在不断的出现下降，进一步的引起胎盘的局部出现缺血以及缺氧，最后导致相关的胎盘的妊娠的高血压。

该研究通过测定正常孕妇、妊高症、子痫前期、子痫前期重度各个级别的孕妇各15 例共60 例胎盘组织MMP9 的表达，本文的主要核心就是探索相关的基质蛋白酶的9 在妊娠的高血压期间的发病机理以及作用。

1 资料与方法

1.1 病例选择标准

纳入标准:①符合《妇产科学》中有关子痫前期的诊断及分类标准；②单胎妊娠，产前无明显子宫收缩；③患者及其家属知情同意后自愿参与本研究，并签署知情同意书。排除标准：①存在慢性高血压、心脏病、糖尿病、慢性肾病及免疫性疾病等病史；②临床资料不完整；③不配合本研究者。1.2 一般资料

自2019年12月至2021年12月，我院正常孕妇、妊高症、子痫前期、子痫前期重度各个级别的孕妇各15 例共60例为研究对象。病例均无其他产科并发症及原发性肝肾疾病，年龄（27±1.7）周岁，平均孕周（37±1.1）周，各组间年龄及孕周均无显著差异。1.3 方法

①标本采集及处理：组织块样本提取，待胎盘娩出后，切取胎盘中央肉眼观察无病变的组织1g，立即置于-20 摄氏度冰冻保存。②Western blot 测定组织中MMP-9 相关的表达水平，大约将相关的500mg 的组织以及样本的加入其中大约是400ul%NP-40 的裂解溶液中上海江莱生物科技有限公司）混匀，一般在一定数量的蛋白酶进行印制以后的4 摄氏度，转速为10000r/min 下离心5min，不断的进行相关的溶液的测定以及蛋白的浓度，在相关的蛋白的20ug 上清野，加入相关的8%SDS 聚丙烯的凝胶中进行相关的垂直电泳测定，然后在转速的纤维的进行互相的转化。硝化纤维素膜与Anti-MMP9抗体（BA0573，boster）于4 摄氏度下过夜孵育（1:200）。③结果判定：通过灰度值计算得到MMP-9 的量, 其含量处于总体水平5%之下的样本判定为阴性(-), 5% ～15%判定为弱阳性(+), 16% ～50%判定为阳性(++), >50%判定为强阳性(+++)。

1.4 统计学处理

所得数据用SPSS13.0 软件包进行统计分析，根据资料性质采用Kruskal-Wallis 秩和检验和Spearman 秩相关，P<0.05有统计学意义。

2 结果

2.1 两组比较，差异显著性（P<0.01）即妊娠期高血压疾病患者胎盘中MMP-9 含量明显低于正常。详见表1。

表1 MMP-9 在妊娠期高血压疾病患者与正常妊娠患者胎盘母面中的表达及比较

2.2 结果显示，妊高症组的母婴不良结局发生率显著高于正常组，P<0.05，详见表2。

表2 两组母婴不良并发症发生率比较

2.3 结果显示，MMP-9 表达水平与孕周、胎盘重量、胎儿体质量均成正相关，P<0.05,详见表3。

表3 MMP-9 表达水平与临床相关因素的相关性

3 讨论

近些年研究表明，妊娠的高血压的并发疾病的发生的妊娠的早期的滋养不断的侵蚀各种的相关的妊娠高血压的患病以及各种的螺旋的小动脉的血管的异常的现象，绒毛的滋养的相关侵蚀能力不断的下降以及范围不断的缩小。这个过程的与MMP-9 失去的密切的相关。国外的学者对于MMP 的妊娠的高血压疾病的相关的研究，在Kolben 等[11]利用相关的ELLSA 法子检测提前的提前的溶液的MMP-9 的含量，发现了相关的HELLP 综合的患者的低于正常。Lim 等[12]对于癫痫的患者以及正常胎盘的滋养的进行细胞的体外的培养，发现一些癫痫前期的组织以及各种的滋养的层的细胞的侵蚀能力以及各种的体外的培养，发现了癫痫期间组织以及各种的滋养的细胞的侵蚀能力在不断的降低，表达的MMP-9 能力不断的下降，滋养细胞表达MMP-9 能力不断下贱，滋养的细胞的对于子宫螺旋的动脉的侵蚀不足，是的相关的胎盘入过浅，侵入脱膜段，在子宫的动脉的没有经历正常的妊娠的生时候，妊娠的变化但是实际的保持的相对的狭窄的管径的对于缩管的物质的反应，进而造成相关的胎盘缺血。另外就是对于相关的胎盘的血管的不足以及发育的缺陷，最终导致母体的系统性管的内皮的损失组织以及相关妊娠出现高血压等一些列的针状，因此, 妊娠期高血压疾病患者可能由于母胎免疫平衡失调，导致MMP-9 的分泌减少。

该研究发现在胎盘上子痫前期组中MMP-9 的表达明显少于正常孕足月组 (P<0.05), 提示MMP-9 水平变化在妊娠期高血压疾病的发生、发展中起重要作用。妊娠期高血压疾病各组胎盘上MMP-9 的减少与其胎盘病理改变有密切的关系, MMP-9 的减少直接影响胎盘滋养细胞对螺旋小动脉的逆向侵润, 即胎盘对子宫肌层组织的侵蚀深度不足 (胎盘浅着床)以致发生胎盘缺血、缺氧等一系列病理变化, 引起妊娠期高血压疾病的发生。 因此认为妊娠MMP-9 的紊乱参与了妊娠期高血压疾病的病理生理变化, 其表达的异常对于妊娠期高血压疾病的发生具有重要意义, 为妊娠期高血压的预防和治疗有了一个大致方向，对其进一步的研究为妊娠期高血压疾病的病因学开辟了新的途径。