铁皮石斛提取物不同极性部位对自发性高血压大鼠血压的影响研究

李艳华（河南科技大学附属许昌市中心医院,河南 许昌 461000）

铁皮石斛是兰科石斛属植物的干燥茎，在我国传统名贵中药材，具有滋阴清热、益胃生津的功效[1]。近年来药理学研究表明铁皮石斛具有多种药理学活性，如抗氧化、降血糖和免疫调节等，其中对心血管系统性疾病具有特异性得到关注和重视[2-3]。本课题组前期对铁皮石斛提取物(Dendrobium officinale extracts，DOe)的治疗高血压活性进行系统性的研究，发现DOe对自发性高血压大鼠有一定疗效，但同时也注意到DOe的治疗高血压的活性不是很强，故笔者开展DOe不同极性部位对自发性高血压大鼠疗效的进一步研究。汇报如下。

1 材料与方法

1.1 动物及药材 8周龄正常Wistar大鼠和SHR大鼠均购于北京维通利华实验动物技术有限公司，动物许可证号：SCXK(京)2020-0012，于屏障环境适应性喂养1周后进行实验研究。

铁皮石斛购于安徽亳州滕王药业有限公司，批号为20020141，为干燥状态。

1.2 试剂 石油醚、乙酸乙酯、正丁醇购于国药化试。

1.3 仪器 超声波清洗仪（KQ-500，昆山市超声仪器有限公司）；无创尾动脉血压测量仪（BP-98A，日本软融株式会社）；HH-60L型恒温水浴锅（常州国华电器有限公司）。

1.4 DOe不同极性部位的制备 取铁皮石斛干燥茎，粉碎过40目筛备用。称取10.0kg铁皮石斛干燥茎，纯化水作为提取溶剂（料液比1∶20），浸提24h后，加热回流提取1h，真空抽滤后滤渣重复上操作2次，最后合并滤液，得到铁皮石斛水提液；对铁皮石斛水提液采用不同极性溶剂进行依次萃取，依次为：石油醚、乙酸乙酯、正丁醇。减压浓缩干燥后分别得到DOe不同极性部位粉末或浸膏，石油醚极性部位10.7g（得率为0.107%），乙酸乙酯极性部位90.6g（得率为0.906%），正丁醇极性部位140.5g（得率为1.405%）；剩余的水液减压浓缩干燥，得到水层极性部位320.9g（得率为3.209%）。

1.5 样品溶液的制备 实验临用前用纯化水将DOe不同极性部位粉末或浸膏超声混悬后，稀释至所需的浓度，使用前需充分摇匀。

1.6 动物试验 随机将40只自发性高血压大鼠分成五组，分DOe不同极性部位组和模型组，雌雄各半；8只正常Wistar大鼠为对照组，雌雄各半。模型组和对照组给予等量饮水，DOe不同极性部位组给药剂量以生药量计均为3.0g/kg，各组均等容量经口给药。实验疗程为8周。

1.7 观察指标 治疗前及治疗后每周监测一次给药2h后的血压，主要观察指标有：体质量、收缩压和舒张压。

1.8 统计学方法 采用SPSS19.0软件统计分析。组间计量数据比较采用t检验。P＜0.05表示差异有统计学意义。

2 结果

2.1 DOe不同极性部位对大鼠体重的影响 治疗前模型组及DOe不同极性部位组体重无明显差异（P＞0.05），说明具有可比性；各组治疗前后体重均无明显差异（P＞0.05），说明治疗方式对大鼠的体重没有明显的影响；正常组大鼠的体重均明显大于模型组及DOe不同极性部位组（P＜0.05），这与由于所用大鼠品系不同所致。如表1所示。

表1 DOe不同极性部位对大鼠体重的影响（±s,n=8）

表1 DOe不同极性部位对大鼠体重的影响（±s,n=8）

注：与正常组相比较，*P＜0.05。

组别 治疗前体重/g 终末体重/g正常组 251.6±38.7 310.4±42.1模型组 192.7±25.8* 220.7±31.7*DOe不同极性部位组石油醚极性部位 185.4±30.7* 227.9±41.7*乙酸乙酯极性部位 190.8±26.7* 225.8±45.2*正丁醇极性部位 187.4±31.2* 234.3±54.7*水极性部位 182.8±28.4* 238.7±46.8*

2.2 DOe不同极性部位对大鼠血压的影响 治疗前的模型组和DOe不同极性部位组的血压数值（收缩压和舒张压）不存在明显差异（P＞0.05），但均明显高于正常组大鼠（P＜0.05）；收缩压指标比较：与本组治疗前相比较，治疗后仅DOe乙酸乙酯极性部位组和正丁醇极性部位组，治疗后1周、4周和8周均有明显下降（P＜0.05），且与同期模型组相比有显著性差异（P＜0.05），同时也注意到DOe乙酸乙酯极性部位下降幅度明显大于同期的DOe正丁醇极性部位组（P＜0.05）。舒张压指标比较：与本组治疗前相比较，治疗后仅DOe乙酸乙酯极性部位组（治疗后1周、4周、8周）和正丁醇极性部位组（治疗后4周、8周）均有明显下降（P＜0.05）；与同期模型组相比较，仅DOe乙酸乙酯极性部位组（治疗后1周、4周、8周）和正丁醇极性部位组（治疗后4周、8周）均有明显下降（P＜0.05）；同时也注意到DOe乙酸乙酯极性部位在8周时下降幅度明显大于同期的DOe正丁醇极性部位组（P＜0.05）。如表2、表3所示。

表2 DOe不同极性部位对大鼠收缩压的影响（±s,n=8）

表2 DOe不同极性部位对大鼠收缩压的影响（±s,n=8）

注：与本组治疗前相比，aP＜0.05；与同期正常组相比较，bP＜0.05；与同期模型组相比较，cP＜0.05；与同期乙酸乙酯极性部位组相比，dP＜0.05。

组别 治疗前/mmHg 治疗1周/mmHg 治疗4周/mmHg 治疗8周/mmHg正常组 140.2±3.7 138.7±2.7 136.9±4.2 142.7±3.9模型组 211.2±7.9b 213.3±6.8b 215.9±9.7b 220.7±8.3ab DOe不同极性部位组石油醚极性部位 210.4±6.4b 211.7±7.7bd 209.8±12.7bd 214.6±9.8bd乙酸乙酯极性部位 205.7±7.7b 180.4±8.7abc 175.4±9.3abc 170.1±9.5abc正丁醇极性部位 209.7±6.3b 190.6±9.1abcd 184.3±6.7abcd 180.6±11.2abcd水极性部位 208.5±7.4b 209.7±6.6bd 210.8±10.1bd 215.7±8.7bd

表3 DOe不同极性部位对大鼠舒张压的影响（±s,n=8）

表3 DOe不同极性部位对大鼠舒张压的影响（±s,n=8）

注：与本组治疗前相比，aP＜0.05；与同期正常组相比较，bP＜0.05；与同期模型组相比较，cP＜0.05；与同期乙酸乙酯极性部位组相比，dP＜0.05。

组别 治疗前/mmHg 治疗1周/mmHg 治疗4周/mmHg 治疗8周/mmHg正常组 104.3±3.2 105.7±2.9 106.4±4.1 107.7±4.7模型组 155.2±7.8b 156.3±6.7b 157.9±9.4b 158.7±8.8b DOe不同极性部位组石油醚极性部位 156.4±6.9b 157.7±7.8bd 159.8±10.7bd 158.6±8.1bd乙酸乙酯极性部位 155.7±7.8b 150.4±6.3abc 145.6±9.8abc 140.9±7.8abc正丁醇极性部位 157.7±6.8b 152.6±9.4b 148.7±6.3abc 145.3±6.1abcd水极性部位 158.5±7.9b 156.7±6.8bd 157.8±9.5bd 159.7±9.0bd

3 讨论

铁皮石斛在我国有较广泛的分布，作为一种名贵中药材，有悠久的用药历史，临床上多用于阴液不足和改善气阴两虚的治疗，中医认为高血压是阴虚阳亢的热性疾病，从机理分析有对因治疗的作用。铁皮石斛化学成分较为复杂，主要有生物碱、多糖、茋类、氨基酸等[4-7]。

本课题组前期对DOe抗高血压活性进行研究，发现有一定活性，但用量较高；笔者对DOe通过萃取得到不同极性部位，发现DOe乙酸乙酯部位活性最高，在生药量计3.0g/kg就有明显的生物活性，此时以萃取物的用量计约30mg/kg。但DOe乙酸乙酯部位其中化学成分也较为复杂，有些化合物可能并不具有抗高血压活性。这些都十分值得进一步的深入研究，这也是本课题组下一步的主要研究方向。

综上所述，DOe乙酸乙酯部位对自发性高血压大鼠有较高的抗高血压活性，其中可能相应机制需进一步的研究。