能力验证过程中出现的问题及解决方法

鹤壁市农产品检验检测中心 张艳丽 刘宏伟 宋保军 刘小丽 王丽娟 王风英 张斌

能力验证是通过实验室间的比对结果来确定实验室检测能力的活动。通过能力验证，可使实验室了解分析项目的整体水平和自己所处的位置，进一步提高自身技术能力和管理水平。笔者将近10 年的能力验证分享如下：

一、标液不出峰

（一）问题

2008 年9 月27 日，检测15 号样品，标液浓度2.0 μg·mL-1，稀释成0.2 μg·mL-1，发现久效磷不出峰，其他峰也较之前峰面积减小，判断可能有漏气地方。

（二）解决方法

检查进样垫、衬管上的“O”型圈、检查色谱柱两端的石墨垫，发现接检测器的石墨垫有松动，重新拧紧，进样后久效磷出峰。

二、标液重合

（一）有机磷标液重合问题

2012 年2 月21 日，检测10 号样品，标液进样后，发现二嗪农与氧化乐果完全重合，用DB1701 色谱柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）。

（二）解决方法

10 号样品中出峰时间与标液中的二嗪农或氧化乐果重合，改变程序升温后，仍不分离，更换相同型号的VF1701 色谱柱，二嗪农与氧化乐果分离，判断出10 号样品中添加的是二嗪农。

三、标液定性

要求使用未失效新打开的标液。如果标液稀释后放的时间较长，可能会降解。如果出现多峰，定性成了问题。

（一）丙溴磷出2 个峰

2020 年10 月8 日，115 号样品，准备过程中先进标液确定保留时间，丙溴磷标液是3 个月前打开的，进气相色谱仪后，出现2 个峰，但是用新买的丙溴磷标液打开后，只出1 个峰。

（二）解决方法

将新买的2 支丙溴磷标液都打开，进行稀释进样，只出1 个峰，同时盲样样品中也只出1 个峰，确定旧丙溴磷降解，不能使用。标液最好现用现买，放的时间长了会降解。

（三）三唑酮、三氯杀螨醇的定性

气相色谱仪以保留时间定性，当2 种农药完全重合时无法判断，这时要更换柱子或用气质联用仪或液质联用仪进行判断。

（四）解决方法

如果想让它们分离，要换不同极性的色谱柱，比如要用DB1701 色谱柱，还可以用气质联用仪，用MRM 方法扫描，用4 个离子对来判断。

四、标液重现性

仪器稳定，标液重现性较好时，才能准确计算样品的结果。

（一）峰面积越来越小

2012 年2 月21 日，做10 号能力验证样品，配甲拌磷与二嗪农混合标液0.2 μg·mL-1，在第1 天早上、晚上及第2 天早上分别进样，甲拌磷标液的峰面积越来越小，但二嗪农标液的峰面积稳定。

（二）解决方法

配混合标液进样，如果两种标液峰面积同时增大或减小，与仪器有关，可能与进样垫、衬管、色谱柱等漏气或污染有关。但一种标液正常，另外一种标液峰面积不断减小，可能与标液质量有关。打开另外1支新的甲拌磷，还是同样的问题，可能是这一批次的标液都有问题。购买其他批次的甲拌磷，稀释后进样，2 天内峰面积稳定。

（三）峰面积越来越大

配制敌敌畏、甲基对硫磷的标液0.5 μg·mL-1，随着进样次数的增加，峰面积逐渐增大。

（四）解决方法

峰面积逐渐增大，与衬管污染、色谱柱污染有关，色谱柱要老化，切柱头，需要关机再开机，时间太长。因此，可以先换衬管，使用新的高惰性衬管，再次进样，峰面积稳定。

五、平行样品不平行

（一）前处理问题

2012 年的能力验证，10 号样品，按照NY/T 761-2008 标准要求进行前处理，2 个平行样品的结果相差近一半，相对偏差较大。

（二）解决方法

先排查仪器的问题，认为问题出在前处理上，取空白样品，在样品中做加标试验，氮吹时在同一根氮吹针上完成，2 个平行样品结果相近，取盲样所剩的乙腈液体，在这根氮吹针上重新做前处理，得出的数据与原样品平行。原因是不同的氮吹针上调节的气流不同，氮吹近干环节没有把握好，导致平行样品不平行。

（三）样品问题

2018 年能力验证时，一盒笋瓜样品、一盒苹果样品，从每盒里取3 个平行样品进行检测，得出的结果不平行。

（四）解决方法

当能力验证样品是1 个空白样和1 个盲样，需要一次性解冻所有样品，用玻璃棒充分搅匀，再进行超声，混匀器上混匀后，把所有盲样同时分装成三等份样品。取1 份先进行检测，即定性实验和初步定量实验，需要通过对比盲样与空白样确认出添加的农药和各自的添加水平，在定性实验和初步定量实验结果确定后，再拿出另外2 个盲样做正式实验，同时进行与加标浓度同一水平的加标实验，计算不同农药的回收率。这样处理是为了避免样品多次解冻、多次称量造成的误差。

六、回收率低

能力验证时，除了做盲样，同时要做加标回收，确保前处理过程及仪器没问题。

（一）加标回收率低问题

甲胺磷、敌敌畏、氯氰菊酯、氟氰戊菊酯等都出现过回收率低的问题。有机磷回收率低大都出现在氮吹环节，有机氯及菊酯类大都出现在氮吹、用弗罗里矽柱净化等环节。

（二）解决方法

有机磷类在氮吹时，氮吹近干的状态是烧杯里面有一滴时，取出，用吸耳球吹一下，烧杯底下潮湿即可。如果烧杯底完全干了，则回收率低。有机氯及菊酯类在氮吹时要注意，用弗罗里矽柱净化时，要先淋洗弗罗里矽柱，再倒入样品液，弗罗里矽柱不能干。洗脱过程要自然流下，不要用外力挤压，容易造成样品不平行。

七、基质效应

（一）农残检测基质效应问题

2014 年能力验证时，做14 号样品，用丙酮配制混标，同时做加标回收，发现水胺硫磷的回收率高达140%，其他组分的回收率也较高。

（二）解决方法

用笋瓜基质配混合标液，使用高惰性衬管进样减少目标物的吸附，农药加标回收率正常。用标液的峰面积来计算盲样，得出最终结果。

八、重现性不好

（一）问题

重现性不好，多是漏气、衬管污染、色谱柱污染、进样针堵塞等引起的。2020 年6 月8 日能力验证时，样品峰面积，连进2 针，重现性相差21%。

（二）解决方法

检查进样口与色谱柱等都未发现问题。检查进样针，进样针无折断，卸下清洗时，发现针芯有一段变黑，可能是磨损所致，更换新的进样针，重新进2 针，重现性在3%以内，问题解决。

九、出平头峰

（一）问题

2020 年6 月8 日能力验证时，三唑酮标液配制0.1μg·mL-1时出现平头峰，盲样进样后，三唑酮也出现平头峰。

（二）解决方法

出现平头峰，可能是浓度超载后峰面积不准确。解决平头峰有两种方法：一是稀释样品，标液也同样进行稀释，稀释时要注意计算准确，得出准确的稀释倍数。二是调节仪器的灵敏度，GC450 气相色谱仪上ECD 检测器有1 与10 两种灵敏度，数字越大，响应值越大，峰面积越大，两者相差10 倍，调节成1 的灵敏度后，不再出平头峰，峰高且尖锐，准确计算出样品含量。

为顺利通过能力验证，必须要加强培训与练习，对能力验证出现的问题进行总结，对关键点进行严格把控，组织人员进行加标回收、质控样等试验，对出现的问题及时解决。