副猪嗜血杆菌研究概况

陈娟，李潇，何菊，罗元宇，陈志

（1.六盘水市农业科学研究院，贵州六盘水 553001；2.盘州市动物防疫监测服务站，贵州盘州 553537；3.水城区动物疫病预防控制中心,贵州六盘水 553600；4.六盘水市畜牧水产业发展中心，贵州六盘水 553001）

1 病原学

HPS是具有菌毛和荚膜结构的形态多变的革兰氏阴性菌[1]。HPS对外界环境较敏感，常规消毒便可杀死。温度37℃、pH 7.6～7.8、CO2浓度为5%为HPS体外培养最佳环境，HPS存活时限与环境温度不同有关。HPS体外分离培养难度系数大，需在培养基中加入一定浓度胎牛血清和NAD。在TSA培养基（含胎牛血清和NAD）上呈边缘整齐半透明的小菌落，血平板上无溶血现象，可在葡萄球菌周边生长形成卫星现象。迄今为止，被发现的副猪嗜血杆菌血清型有15种，其中，血清1、2、3、4、5、8、10、12、13、14和15可能引起疾病或死亡为强毒株，血清6、7、9和11被认为是弱毒力的，血清4、5、13型在德、美、加、日等国最流行，血清4和5型在中国最流行[2]。

2 流行病学

HPS是1910年德国科学家Glosser发现的一种烟酰胺腺嘌呤二核苷酸依赖性革兰氏阴性杆菌，不同阶段猪群均可发病，带菌猪群和发病猪群是主要传染源，通过呼吸道、消化道和皮肤接触等途径传播，以脑膜炎、关节炎等为主要发病特征。1999年在中国从疑似患HPS病感染病猪体内分离鉴定到HPS。近年来，HPS的在我国报道越来越多，呈急骤上升趋势[3]。HPS可单独感染猪群，也可与E.coli、APP、SS、Bb等细菌病和PCV2、CSFV、PRRSV等病毒形成单一或多重混合感染，是导致我国保育阶段猪群死亡率持续性上升的主要原因，对养猪业危害日渐严重，阻碍了我国养猪业发展。

3 临床症状及病理变化

HPS定殖猪群体内早期，一般不表现致病性，当断奶、饲养环境改变等应激反应发生时，给HPS致病性了提供可乘之机，导致副猪嗜血杆菌病发生。HPS感染病猪后表现精神沉郁、体温达41℃以上，喘气、打喷嚏、呼吸困难、跛行、便秘、眼脸膜潮红、卧地不起等症状[4]。病死猪解剖可常见胸腔积液，肺脏水肿、出血，肝脏肿大、黄染、表面有白色病灶；脾脏质地柔软、肿大、边缘增厚等病理变化。

4 诊断

目前，HPS呈全球性分布，全球养猪业经济损失严重[5]。方法HPS体外培养条件严苛，且分离鉴定成功几率低，HPS病急性发病期病猪病料中容易分离获得HPS菌株。免疫组化(IHC)技术和寡核昔酸特异性捕获圆盘杂交(OSCPH)实验等均为当前诊断HPS的方法。Oliveira等通过16 S rRNA序列设计引物建立HPS PCR诊断方法，该方法灵敏性和特异性都很高[6]，但无法区分HPS菌株是否致病菌。迄今为止，已经报道了HPS血清学检测方法主要有补体结合试验法（CF），间接血凝试验（IHA）和酶联免疫吸附测定法（ELISA）等。

5 耐药性

近年来，抗菌药物的长期不合理使用导致HPS耐药性不断增强，耐药谱逐步扩大，HPS对抗菌药物的耐药性问题的显著突出，HPS的耐药性机理成为研究HPS的热点。目前，已有多个国家（丹麦，西班牙，中国，澳大利亚等）对HPS的耐药性进行了研究，HPS的地方差异性是导致不同地区同一血清型HPS对同一抗菌药物的耐药性不同的主要原因[7]。在我国，由于临床上常滥用抗生素预防和治疗HPS病，导致我国大部分省市HPS分离株对四环素、头孢噻肟、氯霉素、庆大霉素、阿莫西林、青霉素、卡那霉素、恩诺沙星、氨苄青霉素、林可霉素等常用抗生素产生耐药性[8]。HPS抗生素耐药性在贵州报道极少。

6 防治

HPS是一种猪群体内是条件性致病常在菌，常定殖健康猪群上呼吸道黏膜上。一旦猪群抵抗力低或受到应急，HPS会大量繁殖，导致猪群发病，因此养猪场应对猪群加强饲养管理和减少各种应激。目前，疫苗接种和血清抗体（IgG或IgA）反应通常被认为是控制HPS病的有效手段。迄今为止，已经报道了的HPS疫苗有HPS灭活疫苗，亚单位疫苗、DNA疫苗和减毒H等[9]。由于HPS具有地方特异性，导致HPS的血清型有差异，且不同血清型之间缺乏交叉免疫保护，因此在接种疫苗要对养殖场发病猪群血清型进行检查，确保疫苗高效性。对养猪场严格执行消毒制度，定期消毒，保持养猪场良好的卫生环境。加强防控病毒性疫病。HPS临床上除了与CSFV、PRRSV、PCV2、PRV等混合感染外，还常与E.coli、APP、SS、Bb等病原菌混合感染，因此合理制定CSFV、PRRSV、PCV2、PRV等病免疫程并做好免疫接种工作，也减少HPS发病的重要途经之一。