参芪消脂方对ICR 肥胖小鼠食欲的影响

刘应科 任昕昕 李天鑫 杨 晔 王秋莉 张 辰

1.北京市和平里医院儿科，北京 100013；2.北京中医药大学第一临床医学院，北京 100029

肥胖症已经成为一个全球的公共卫生热点问题，近年在我国尤其凸显。目前最新监测结果显示，我国成年居民肥胖率达11.9%，超重率则有30.1%，两者总和为42.0%[1]。截止至2012 年统计，中国约有4.4 亿成年人超重，其中1.3 亿人肥胖，我国学龄儿童、青少年中超重和肥胖已经达到16%[2]。肥胖症有巨大的隐形危害，是万病之源，成年人超重和肥胖可以增加死亡和疾病的危险性，导致预期寿命的减损和过早死亡率的增加[3]。本病的具体发生机制尚不明确[4]。对本病多为行为、饮食干预，成年人有药物干预，但各类药物均有一定的不良反应[5]。儿童尚无药物可用。肥胖症已经成为一种常见病、疑难病，且药物治疗有限。寻求绿色、安全、有效的干预方法显得非常必要。中医药对肥胖早有认识，对病因病机、治疗原则、治疗方剂亦有一定的认识及经验积累[6-7]。笔者师从国医大师孙光荣教授，秉承中和的学术思想，根据“调气血、平升降、衡出入”“中和辨证、中和组方、中和用药”的指导原则[8]，自拟了参芪消脂方，临床验之有效[9]，并进行了基础实验[10]，提示具有明确的纠正脂代谢紊乱的作用，尤其在儿童肥胖症中疗效凸显，并且发现了患者摄食量主动下降。基于此现象，特从基础实验角度加以验证，为本病的治疗累积更多经验及数据。

1 材料与方法

1.1 材料

1.1.1 动物 雄性SPF 级ICR 小鼠（鼠龄8 周），体重（250±10）g，均购自北京维通利华生物科技有限公司，许可证号：SCXK（京）2019-0016，饲养于北京中医药大学屏障环境动物实验室。实验过程中动物采取自由摄食及饮水，其中饲料予普通饲料及高脂饲料（24%脂肪、41%碳水化合物、24%蛋白质），室温均保持在22～24℃，相对湿度（40±10）%，日光照时间为12 h，合格证号：SYXK（京）2019-0042。

1.1.2 仪器 电子天平（0.001 g）（上海精天电子仪器有限公司），Echo MRI 身体成分分析仪（汇佳生物股份有限公司）。

1.1.3 药物“参芪消脂方”制剂，主要组成包括太子参10 g、生黄芪10 g、丹参10 g、广陈皮12 g、生山楂12 g、玉米须15 g 组成。规格为100 ml/瓶，1.56 g/ml。由北京市和平里医院提供制剂。

1.2 研究方法

1.2.1 动物模型制备及分组 ICR 小鼠50 只，按体重从1～50 编号，适应性饲养1 周，从随机数字表中抽取8 个编号数字，与之相应的小鼠设为正常组，予普通饲料，其他小鼠予高脂饲料。饲养12 周后，大于正常组体重10%提示肥胖症造模成功[11-13]，造模成功的小鼠，按照随机数字表法分成模型组和给药组，每组再抽取8 只用于实验。随后，各组均给予普通饲料喂养。

1.2.2 给药方法 给药组予参芪消脂方制剂灌胃干预，给药体积为0.2 ml/10 g，其他两组给予等量蒸馏水灌胃。各组均灌胃12 周，每天灌胃1 次。

1.2.3 体脂检测方法 灌胃6 周和12 周时，分别对正常组、模型组、给药组进行体脂成分检测，并计算体脂比。具体方法：启动身体成分分析仪Echo MRI 软件，将实验小鼠放入合适Holder，插入机器侧面圆形体腔内；将标准品放入机器腔体内5～15 min进行系统校正及测试；点击Folder 选项创建新文件夹并重命名；点击Start scan 按钮输入实验小鼠编号，实验时间及体重等相关，并在扫描结束后，保存并导出数据。

1.2.4 实验室指标检测 灌胃6 周和12 周时，记录各组进食量和体重。计算方法：体重净增加（g）=实验末体重-实验初体重；体脂比（%）=体脂总重/实验末体重×100%。

1.3 统计学方法

采用SPSS 20.0 软件对所得数据进行统计分析。计量资料以均数±标准差（）表示，采用t 检验。计数资料以例数或百分比表示，采用χ2检验。以P ＜0.05为差异有统计学意义。

2 结果

2.1 参芪消脂方对肥胖小鼠进食量的影响

与模型组比较，给药组灌胃6 周及12 周进食量明显下降，差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表1。

表1 参芪消脂方对肥胖小鼠进食量的影响（g，）

表1 参芪消脂方对肥胖小鼠进食量的影响（g，）

注：与模型组同期比较，aP ＜0.05

2.2 参芪消脂方对肥胖小鼠体重净增加的影响

与正常组比较，模型组灌胃12 周后体重净增加显著增高，差异有统计学意义（P ＜0.05）；与模型组比较，给药组灌胃6 周及12 周体重净增加均显著降低，差异有统计学意义（P ＜0.05）。模型组与给药组灌胃12 周体重净增加与灌胃6 周比较，差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表2。

表2 参芪消脂方对肥胖小鼠体重净增加的影响（g，）

表2 参芪消脂方对肥胖小鼠体重净增加的影响（g，）

注：与模型组同期比较，aP ＜0.05；与正常组同期比较，bP ＜0.05；与本组灌胃6 周比较，cP ＜0.05

2.3 参芪消脂方对肥胖小鼠体脂比的影响

与正常组比较，模型组灌胃6 周及12 周体脂比增加，差异有统计学意义（P ＜0.05）。灌胃12 周，模型组体脂比高于灌胃6 周，差异有统计学意义（P ＜0.05）。见表3。

表3 参芪消脂方对肥胖小鼠体脂比的影响（%，）

表3 参芪消脂方对肥胖小鼠体脂比的影响（%，）

注：与正常组比较，aP ＜0.05；与本组灌胃6 周比较，bP ＜0.05

3 讨论

肥胖症的一个重要病因就是营养过剩导致了脂肪蓄积，造成脂肪细胞增多、脂肪细胞体积增大而变成肥胖。其中进食量过多、进食速度过快、不能及时预警饱食中枢、造成营养过多、饮食结构不合理等多种因素属于跟食物密切相关。减少、控制食量是确切防止体重过增，甚至降低体重的良好举措[14]。然而，管控饮食，尤其在儿童患者中，显得非常困难，对于食物的欲望及自控力差大大降低了患者的治疗依从性[15]。

探究肥胖症的食欲调节通路，进而进行干预调整显得非常有意义。食欲的调控主要由神经中枢或外周产生的食欲调节因子起作用，这些调节因子，具有促进或抑制作用，并通过其在下丘脑形成的严密、精确而又复杂的调控网络，起到控制饮食的作用[16]。与瘦素通路[17]、食欲素通路和饥饿素通路等多条通路有关[18]。研究显示[19]，瘦素神经元功能异常往往和肥胖症、心脑血管疾病和糖尿病等息息相关，是主要的致病机制之一。瘦素能够通过外周和中枢的共同调节机制，使脂肪代谢率提高、进食量减少，从而达到调节体重的目的[14,20]。食欲素能够促进细胞对葡萄糖的摄取并将多余能量转化为脂肪储存起来[21]，可增加大鼠神经肽Y 的释放从而增加食欲，饥饿素则可以抑制POMC mRNA 表达，促进AGRP mRNA 的表达，从而增强大鼠食欲[22]。

本研究中发现，造模后的模型组小鼠灌胃6 周、12 周的进食量与正常组比较，差异无统计学意义（P >0.05），给予参芪消脂方后的给药组小鼠其6周、12 周的进食量较模型组小鼠均明显减少（P ＜0.05），提示本方可以有效的抑制小鼠的食欲，当中机制可能跟调节瘦素、食欲素、饥饿素等调节因子的水平有关，尚可进一步探寻当中机制。在体重净增量方面，给药组小鼠给药6 周、12 周体重净增加较模型组均显著降低（P ＜0.01），提示本方可显著改善体重，进而缓解肥胖。在体脂比例方面，给药组小鼠较模型组小鼠体脂总重显著下降[9]，体脂比虽也有下降趋势，但数据无统计学意义，可能与样本量及观察时间不够有关，还有待进一步的研究。

组内比较显示，干预6 周和12 周在进食量上没有变化，但是在体重净增加量上有变化，模型组尚在持续增长体重，继续肥胖，而给药组继续降低体重，并随着时间的延长，降低体重效果越好，而正常体重保持稳定，表明已经接近成年鼠的体重。在体脂比方面，正常组和给药组无组间差异，但模型组存在差异，提示随着肥胖时间的延长，体脂含量有所增加。综合来看，延长治疗时间，有益与降低体重。

参芪消脂方是笔者根据指导老师国医大师孙光荣教授“中和学术思想”拟定[23]，主要药物包括太子参、黄芪、丹参、陈皮、生山楂、玉米须等，本方按照孙教授三联药组组方原则拟方。第一组即太子参、黄芪、丹参，三者共为君药，主要行益气活血之功，活血则血行，气足则津液行，使体内气血畅通，创立津液代谢的环境；第二组即陈皮、生山楂，二者共为臣药，行健脾祛湿脾之功，健脾的关键在于运而不在补，脾胃运化功能正常，则津液代谢通畅，痰湿自去，其中温燥之品半夏祛湿更佳；第三组主要为玉米须，有化湿醒脾之效。全方兼顾虚实、标本，气血共调，能益气活血，健脾祛湿，消脂化浊，为笔者验之临床的有效方。肥胖症患者多有食欲亢进，缺乏饱腹感的症状，盖因湿浊困阻中焦，阻遏气机，导致脾失健运，食纳增多，然后转化能力又不足，导致痰、浊、湿进一步酿生，造成恶性循环[24]。本方根据病机确立祛湿泻浊的治则，选方用药，精准祛除痰湿，健运脾胃，继而恢复正常的食欲。

本研究尚存在一定的不足，在食欲观测方面应该更加精准，可以细化到每一天、每一个阶段，进而反应更加细致的进食量。在食欲通路中，应该设立观察指标，进一步明确相关的作用机制。

综上所述，参芪消脂方可以有效地控制ICR 肥胖小鼠的食欲并显著降低其体重，作用机制可能与下丘脑食欲调控网络有关，但具体药物作用靶点及与各种食欲调节因子的关系仍不明确，有待于进一步的深入探索。