薄层色谱技术在中药检验中的运用探讨

彭严

（贵州神奇药业有限公司，贵州 贵阳 550000）

薄层色谱技术是将中药的测试品溶液点于薄层板中，用展开剂展开和分离中药测试品的成分，并与色谱图进行比对，得出中药的成分与含量。其可以用于中成药的检测和中药材的含量测定，薄层色谱技术具有直观性、灵活性、时效性的特点，因此在中药的检验中运用非常广泛[1]。研究薄层色谱技术在中药检测中的具体运用，可以有效保证中药检测的质量，提高中成药的临床运用效应。

一、薄层色谱技术的原理以及运用

（一）薄层色谱技术的概念和原理解析

薄层色谱鉴别法最早在20 世纪20 年代起开始运用，其在临床实践中，主要用于对中药成分的分析和中药品质的鉴定。由于薄层色谱技术具有分离和鉴定的双重功效，而且操作起来比较简单，因此可以广泛应用于各种中药的临床测试。随着薄层色谱技术的发展，中药的成分检测可以利用薄层扫描仪进行扫描或鉴定。薄层色谱技术根据固定相的支持物不同，可以分为薄层吸附层析法、薄层分配层析法、薄层离子交换层析法和薄层凝胶层析法，主要通过移动相，也就是溶剂流过固定相的过程中完成吸附和分解，通过吸附和分解吸附达到中药成分相互分离的目标[2]。在中药成分的实验中运用次数较多的方法是薄层吸附层析法，吸附性是薄层色谱技术中最重要的一个性质，无论是哪种形式的中药都可能发生吸附现象，因此，运用薄层色谱技术，中药成分的确定和检测结果是十分准确的。

（二）高效薄层色谱法的应用

高效薄层色谱法是采用颗粒较细的吸附剂，运用喷雾法的方法进行中药的检测，由于其具有涂层均匀、重现性良好的特性，因此可以准确地鉴定中药的成分和中药的质量。高效薄层色谱法的点样配备了新的装备，可以进行自动或者半自动的操作，而且其对传统的薄层色谱法进行了优化和改进，吸附剂具有疏水和清水两方面的性能，既可以完成正相色谱分离，也能完成反相薄层色谱分离。色谱的选择具有多样化的特征，展开方式也有了新的变化，不仅可以完成圆心式展开，也能实现向心式展开。高效薄层色谱法除可以对药材进行定性分析，还可以对药材进行定量分析，对诸如生物碱、黄酮类物质进行检测。

在中药药物的分析和中药材料的分离时，高效薄层色谱法可以采用更均匀、更细的硅胶和纤维素，将其作为固定相对药材进行色谱分离和分析，由于吸附剂的疏水和清水性有更改，因此，中药的色谱分离可以实现正相和反相两种分离，实现多样化的色谱选择。同时采用预制薄层板，展开短距离的分离，将颗粒细小的吸附剂进行涂层，通过喷雾法制备进行重现。目前运用高效薄层色谱法检测中草药成分的例子不在少数，检测的时间短，效率高是该方法最大的特点。而且测定中药成分具有很多的优势，例如稳定性良好、重现性良好、分离效率高等，可以广泛应用于中草药的质量控制研究中。杨小明等人在研究银杏的提取物时，运用高效薄层色谱法，对其中的聚戊烯醇同系物进行提取，成功分离出银杏中的几种成分[1]。

（三）假相薄层色谱法

假相薄层色谱法主要使用的流动相是低浓度的表面活性剂，还有环糊精水溶液，固定相一般为聚酰胺薄膜，在假相薄层色谱法中，表面活性剂和其他溶剂可以共同组成塑胶溶液，对中药材进行选择性的溶解。通过梯度洗脱光学检测进行流动相的检测，假相薄层色谱法具有流动简单、价格低廉、处理方便的优势，既可以使一些不溶于水的中草药材进行较好的分离，还可以对中药材中的微量杂质进行限量检查，或者对患者体内的中药成分进行分析和测定。假相薄层色谱法不仅可以用于中草药的检查，还可以在临床实践中展开测验。在中草药的检测和分离中，戈早川成功通过假相薄层色谱法分离出黄连和制剂的组分，按照九比一的比例配制醋酸乙酯，并采用聚酰胺薄膜建立薄层扫描法，同时测定中草药中含有的四种成分，这也就说明假相薄层色谱法的检测效率和检测质量比较优良[2]。

（四）反相薄层色谱

反相薄层色谱法就是运用化学键和相，完成药物的检测和分离。在反相薄层色谱法中，流动性一般大于固定相的极性，这种方法具备扩散面积小的特点，但由于制备比较复杂，因此可以运用于复合性的中草药物的分离，对混合物进行分离测验[3]。反相薄层色谱法中的化合键和相的硅胶一般选择硅烷程度较高的材料，反相色谱法可以为分离提供更多的可能性和选择性，根据具体的固定材料，选用水、甲醇等溶剂，或者采用两种以上的溶剂进行混合制作成展开剂，根据中草药的性能挑选合适的展开剂进行测定。在中草药的含量测定和质量控制中，反向薄层色谱法一般可以采用甲醇与水进行比例性的配合，制作成展开剂对中草药的有效成分进行检测，分离其中所包括的具体化学成分和植物成分，对每一种成分进行技术鉴定。

（五）微乳薄层色谱法

微乳薄层色谱法是运用有机溶剂作为展开剂的一种方法，其属于经典的薄层色谱法，主要所用的工具是乳化剂和水性以及油相，这些成分可以帮助中药材构成光学同性微乳薄层色谱，通过合理搭配不同的稳定体系和展开剂，使稳定体系呈现均匀透明的状态，或者形成稳定的微呈乳光的体系。这种方法由于需要按照既定量制成微乳，因此，检测工艺比较复杂，而且容易受多种因素的干扰，但由于对药材的检测具有灵敏度，因此也可以对中成药的成分进行分离测定，大众熟知的双黄连口服药就是通过这种方式进行成分鉴定和分离测定的。

二、薄层色谱新技术的应用发展

（一）薄层色谱技术的仪器与材料支持

薄层色谱技术的仪器与材料主要有三种不同的类型，第一种是支持物与固定相，支持物主要包括玻璃板、塑料板、铝板等，固定相主要包括硅胶、氧化铝、聚酰胺等物质。第二种是点样器与展开容器，点样器主要包括微升毛细管，点样器可以是手动的，也可以是半自动或自动；展开容器主要有平底展开缸和双槽展开缸，根据中草药检测的实际情况，在一般情况下会选用双槽展开缸进行实验[3]。第三部分是显色与检视，一般显色器具有玻璃喷雾和空气压缩机，而检视器是暗箱和摄影设备。薄层色谱技术可以以直观的彩色图像表达中草药的成分更方便判断中药中的中草药成分和中草药元素，而且薄层色谱技术各单元的操作相对独立，互不干涉、互不影响，因此扫描比较可信，可以根据具体的中成药检测方式进行灵活的调整。色谱的生成根据选择技术的不同有不同的时间，但一般来讲，同一中草药成分可以在同时产生18 个左右的样品色谱。

（二）薄层色谱检测的操作要点以及常见问题

薄层色谱检测的主要步骤是标准物质的选择，中草药检测品的制备，薄层板的选择。在基础物品到位之后进行点、展开、显色，而具体来说，标准物质的选择需要有对照品和对照药材，由于有一些中草药的共存植物比较多，没有专属性的物质，因此，单纯利用对照品进行分离纯化的成本比较高。要加入对照药材，与对照药材进行分析和鉴定，在选择供试品时，一般可以采用溶剂提取法，也就是选择合适的提取溶剂对多种药材或者处方药进行提取。有一些成分复杂的药材有多味中成药，需要利用多种提取方法联合。薄层板的选择中，硅胶的运用范围最广，但由于不同中草药检测品的酸碱性不同，因此还需要适当考虑氧化铝和聚酰胺这两种物质[4]。在点样时需要注意样品要根据半自动或自动的点样机进行定量，在展开时，根据具体中药成分的鉴定选择不同样式的展开缸，针对不同测定成分的性质，在操作时需要选择适合的显色方式，诸如某些含有颜色成分的药材，黄酮类、苯丙素类成分的药材，或者大青叶、红花这类颜色成分比较浓烈的药材在紫外线下有荧光，因此，选择显色方式是需要根据测定的成分进行具体的选择。在测定中药成分时，需要注意各种影响因素如温度、湿度、用量等，有效控制外界因素和内生因素，保证色谱检测的准确性。

结束语：总之，薄层色谱技术本身就是对中药进行分析的一种方法，随着高科技产业的兴起，薄层色谱新技术的研发力度会逐渐加大，技术要领会更加规范，更具有针对性。因此，在未来，薄层色谱新技术的操作会更加简单快捷，在未来，随着中药检测技术的不断成熟，相关设备的不断改进，薄层扫描法可以广泛应用于中药和中药材的含量鉴定中，根据鉴别的含量测定，对某些中药材和其同属近缘的植物进行指纹图谱的鉴定。