5 049份尿液微生物培养鉴定结果及耐药性分析

吴 亚，赵红丽

(1.河北省中医院 检验科;2.武警医院 检验科,河北 石家庄050000)

尿路感染是临床常见的泌尿系感染性疾病,随着抗菌药物和侵入性操作的广泛应用，尿路感染病原菌的种类和耐药情况在不断地变化。尿培养是诊断尿路感染、指导临床医生合理使用抗菌药物的重要依据。为了解医院尿路感染的病原菌分布及耐药情况，对2017-2018年医院的尿标本培养结果进行回顾性分析，对导致尿路感染的病原菌种类和耐药情况进行了统计，为临床合理使用抗菌药物和规范化治疗提供理论依据。

1 材料与方法

1.1 标本来源医院2017-2018年门诊和住院患者送检的中段尿标本。

1.2 仪器和试剂法国梅里埃VITEK-2Compact全自动细菌鉴定药敏仪及配套的细菌鉴定条和药敏条；法国梅里埃ATB Express半自动细菌鉴定药敏仪及配套的真菌鉴定条ID 32C和真菌药敏条 ATB FUNGUS3；郑州安图血琼脂平板、麦康凯平板和罗氏培养基；上海科玛嘉假丝酵母菌显色培养基。质控菌株大肠埃希菌ATCC25922、金黄色葡萄球菌ATCC29213、铜绿假单胞菌ATCC27853、粪肠球菌ATCC29212、白假丝酵母菌 ATCC 900603均购自河北省临床检验中心。

1.3 菌种鉴定与药敏将送检尿液接种于血琼脂平板、麦康凯平板及罗氏培养基上，放在37℃培养箱中培养24-48 h，取分离细菌的纯培养物于VITEK-2 Compact型全自动细菌分析系统进行鉴定和药敏,药敏结果根据CLSI2017版标准进行判读；取罗氏培养基上的真菌纯培养菌落转种到科玛嘉假丝酵母菌显色培养基上，根据其菌落的不同颜色判断菌种，白假丝酵母菌为绿色，热带假丝酵母菌为深蓝色，光滑假丝酵母菌为紫红色，有不明确的菌种用真菌鉴定条ID 32C确定,同时用真菌药敏条 ATB FUNGUS3做真菌药敏试验。按美国临床实验室标准化委员会(NCCLS)标准判断尿路感染：尿液细菌培养菌落计数，革兰阴性杆菌计数≥105cfu/ml，革兰阳性球菌或假丝酵母菌计数≥104cfu/ml 为阳性标本。

1.4 统计分析采用世界卫生组织提供的WHONET5.6软件进行统计分析。

2 结果

2.1 尿标本分离病原菌构成比5 049份尿标本中共分离出1 439株细菌和假丝酵母菌，总分离率为28.50%。其中以革兰阴性杆菌为主，占60.25%，假丝酵母菌占20.71%，革兰阳性球菌占19.04%。分离前3位菌株分别为大肠埃希菌(45.45%)、屎肠球菌(12.51%)、白假丝酵母菌(9.52%)，见表1。

表1 尿标本中细菌和假丝酵母菌分离株数及构成比

2.2 尿标本分离菌的耐药情况大肠埃希菌占分离革兰阴性杆菌的75.43%，占绝对优势，其次为肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌、铜绿假单胞菌和阴沟肠杆菌。以上这5种细菌占分离革兰阴性杆菌的95.50%，其耐药性情况见表2。分离的革兰阳性球菌以屎肠球菌为主，占分离革兰阳性球菌的65.69%，其次为粪肠球菌(13.87%)和凝固酶阴性葡萄球菌(10.95%)。分离的革兰阳性球菌的耐药性情况见表3。尿中分离的假丝酵母菌以白假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌为主，其药敏结果见表4。

表2 尿标本分离主要革兰阴性杆菌的耐药率(%)

表3 尿标本分离主要革兰阳性球菌的耐药率(%)

表4 尿标本分离假丝酵母菌的耐药率(%)

3 讨论

尿路感染是常见的感染性疾病。本研究结果显示尿液标本总分离率为28.5%，病原菌主要以革兰阴性杆菌(60.25%)为主，与方欢英等[1]报道基本一致。在分离的革兰阴性杆菌中，以大肠埃希菌(75.43%)最为常见，与周晓燕[2]等报道的检出率一致，其次为肺炎克雷伯菌、奇异变形杆菌。这3种菌对哌拉西林/他唑巴坦、碳青霉烯类、阿米卡星的耐药性较低(均<20%)，对氨苄西林、氨苄西林/舒巴坦、哌拉西林、一～三代头孢菌素类(头孢他啶除外)、庆大霉素、喹诺酮类药物、复方新诺明的耐药性较高。提示临床医生在诊疗过程中，应参考微生物室提供的细菌培养鉴定及药敏报告为患者选择治疗方案。凭经验用药有可能治疗无效，并易导致耐药菌株的产生。

尿标本分离的革兰阳性球菌中，以肠球菌最多，分离率仅次于大肠埃希氏菌[3]，且屎肠球菌率高于粪肠球菌。屎肠球菌耐药性明显高于粪肠球菌，仅对万古霉素和利奈唑胺的敏感性高，但也检测到了3株耐万古霉素屎肠球菌。朱冬菊等[4]研究认为利奈唑胺和万古霉素均能有效治疗肠球菌尿路感染，但利奈唑胺的临床安全性较高，可替代万古霉素成为治疗肠球菌尿路感染的首选抗菌药物，从而防止万古霉素过度使用，预防耐万古霉素肠球菌(VRE)的产生。粪肠球菌对呋喃妥因的敏感性高于屎肠球菌，这与一些研究[5]相符。凝固酶阴性葡萄球菌中90%为耐甲氧西林株,只对万古霉素、利奈唑胺、呋喃妥因保持高度敏感。在粪肠球菌、凝固酶阴性葡萄球菌和部分屎肠球菌引起的尿路感染中，呋喃妥因是首选药物之一。

回顾分析显示假丝酵母菌的分离率高达20.71%，比刘代华等[6]报道的分离率(15.88%)略高，明显高于李美红等[7]报道的6.4%，但比陆明钢等[8]报道的33.8%要低。真菌分离率较高，可能与多种抗菌药物长期大量联合使用、免疫抑制剂以及各种导管的使用有关。在检出的假丝酵母菌中以白假丝酵母菌和光滑假丝酵母菌最多，除光滑假丝酵母菌对两性霉素B耐药性为13.21%，其余皆对两性霉素B高度敏感。热带假丝酵母菌的检出率虽低于前两者，但其对常用唑类药物的耐药性明显高于前两者，应引起临床高度重视。当前假丝酵母菌感染的发生率逐渐升高，医院获得性假丝酵母菌已成为常见尿路感染病原菌之一，假丝酵母菌尿易发生侵袭性假丝酵母菌病，在危重病患者假丝酵母菌尿具有真菌感染发生的提示作用，甚至可能是患者因真菌感染而危及到生命的早期和唯一征兆[9]。

总之，尿路感染病原菌的菌群分布在不断变化，在抗生素的选择压力下，耐药菌株逐渐增多，治疗尿路感染应参考尿培养结果，合理使用抗菌药物，是抑制细菌耐药性传播和感染的有效途径。