支气管镜刷检标本液基细胞学联合细胞块技术对肺癌诊断及分型的价值分析

聂 进，周 亮，兰远波，张建勇

遵义医科大学附属医院呼吸与危重症医学科呼吸二病区，贵州遵义 563000

肺癌是发病率、病死率均较高的恶性肿瘤之一。临床发现肺癌早期患者多无症状或典型症状不明显，确诊时大多已发展至中、晚期，临床治疗相对较困难。因此，肺癌的早期诊断显得尤为重要。支气管镜下刷取脱落细胞检查是临床诊断肺癌的重要手段之一，主要包括传统细胞学涂片和液基细胞学检查[1]。其中液基细胞学检查能清晰显示三维立体结构，且染色质量高，已逐渐取代传统细胞学涂片，在肺癌诊断中具有重要意义[2]。但由于部分患者细胞分化差，仅通过液基细胞学形态可能不能进行准确的病理分型，尚需联合其他方法辅助诊断[3]。而细胞块技术简便，离心后石蜡包埋制成的切片，可清晰展现细胞内部的细微结构，诊断准确性较高，且有利于病理分型[4]。但单独应用支气管镜下刷检标本液基细胞学、细胞块技术诊断肺癌可能造成漏诊或误诊[5]。因此，本研究联合使用支气管镜刷检标本液基细胞学和细胞块技术进行肺癌诊断及分型，为肺癌的早期诊疗提供依据。

1 资料与方法

1.1一般资料 选取2017年6月至2019年11月本院收治的可疑肺癌患者185例作为研究对象，其中男133例，女52例；年龄35～76岁，中位年龄62岁。纳入标准：(1)均经胸部CT等影像学检查为可疑肺癌；(2)均接受组织病理学检查；(3)加入本研究前均未行放、化疗。排除标准：(1)临床资料缺失患者；(2)合并其他恶性肿瘤；(3)拒绝支气管镜检查者；(4)有支气管镜检查禁忌证；(5)留取标本过少无法检测。本研究经本院医学伦理委员会批准，且患者及其家属均知情同意，并签署同意书。

1.2方法

1.2.1支气管镜下液基细胞学检查 所有患者可疑病变部位均在支气管镜下刷取标本，并及时洗入液基保存液中，室温静置10 min，经全自动液基薄层细胞制片仪(ThinPrep 5000 Processor)进行制片，每例患者3张。制成的液基薄片应以95%乙醇固定15 min，再行巴氏染色。液基保存液及巴氏染色液均购自麦克奥迪医疗诊断系统有限公司。

1.2.2细胞块技术 将液基保存液中剩余的标本倒入离心管中，2 500 r/min离心10 min，离心后弃上清液。加入10%中性甲醛固定液，2 500 r/min再次离心5 min，固定至少3 h。待试管底部沉渣质地变硬，用小棉棒将沉淀物取出，并小心置于包埋盒中，经脱水、石蜡包埋制成细胞块切片，厚约4 μm，采用苏木精-伊红(HE)染色。HE染色液购自金华力升实验器材有限公司。

1.3统计学处理 运用统计学软件SPSS 20.0处理数据。计数资料采用例数或百分率进行描述，组间数据比较行χ2检验，以P<0.05为差异有统计学意义。

2 结 果

2.1液基细胞学及细胞块技术对肺癌的诊断价值 185例可疑肺癌患者经组织病理学诊断为肺癌157例，良性病变28例。液基细胞学联合细胞块技术诊断肺癌的灵敏度、特异度及准确率均明显高于液基细胞学、细胞块技术单项检测(P<0.05)。见表1、2。

表1 液基细胞学及细胞块技术对肺癌的检测结果(n)

表2 液基细胞学及细胞块技术对肺癌的诊断价值(%)

2.2液基细胞学形态和细胞块切片分析 液基细胞学形态特征：鳞癌细胞多散在分布，细胞核大、深染，胞质角化；腺癌细胞成群排列，细胞核大、深染，可见腺腔样结构，且立体感突出；小细胞癌细胞拥挤成群，呈镶嵌状或桑葚状结构，核深染、染色质细腻，近似裸核。见图1。

细胞块切片形态特征：鳞癌细胞呈多角形或卵圆形；腺癌细胞形状不一，大小不等，多呈乳头状或腺样结构；小细胞癌细胞片状分布，细胞间易受挤压，细胞质少，呈卵圆形、圆形或燕麦型。见图2。

注： A为鳞癌细胞(巴氏染色，×400)；B为腺癌细胞(巴氏染色，×400)；C为小细胞癌细胞(巴氏染色，×400)。

注：A为鳞癌细胞(HE染色，×400)；B为腺癌细胞(HE染色，×400)；C为小细胞癌细胞(HE染色，×400)。

2.3液基细胞学及细胞块技术对肺癌分型的诊断价值 组织病理学诊断腺癌70例、鳞癌56例、小细胞癌31例。以组织病理学诊断为金标准，液基细胞学联合细胞块技术诊断腺癌的准确率为97.45%，明显高于两者单独检测(χ2=39.348、31.774，P<0.001)；诊断鳞癌的准确率为91.72%，明显高于两者单独检测(χ2=26.046、8.564，P<0.001)；诊断小细胞癌的准确率为90.45%，明显高于两者单独检测(χ2=14.692、11.155，P<0.001)。见表3、4。

表3 液基细胞学及细胞块技术对肺癌分型的检测结果(n)

续表3 液基细胞学及细胞块技术对肺癌分型的检测结果(n)

表4 液基细胞学及细胞块技术对肺癌分型的诊断价值(%)

3 讨 论

近年来，随着临床肿瘤诊疗技术的快速发展，肺癌的治疗越来越规范化和精细化，因此肺癌确诊后明确病理分型至关重要。有研究报道，因在支气管镜检查黏膜容易出血或见不到肿物等原因而无法刮取活检组织的患者，支气管镜下刷检细胞学检查可取代活检用于诊断肺癌，且与其他检查方法联合，对判断肺癌的病理分型具有很大帮助[6-7]。

支气管镜下液基细胞学制片技术是广泛应用于细胞学诊断的一项新技术，临床应用具有如下优势：(1)可直接窥见病灶，取的材料大多可制片观察；(2)细胞形态保存完好，细胞分布均匀且背景干净，细胞结构清晰、立体，能够有效剔除异常细胞；(3)制片过程中可除去过多的血液和黏液，使涂片细胞单层平铺，避免细胞重叠，便于观察细胞形态；(4)涂片范围小，可明显缩短细胞学医师阅片时间；(5)剩余标本可继续保存，用于免疫组化等其他生化检查[8-11]。林静等[12]在肺肿瘤诊断研究中发现，纤支镜下液基细胞学检测在肺肿瘤中的诊断价值高于传统涂片检测。而王学敏等[13]研究发现，纤支镜下刷检标本液基细胞学检查在肺癌诊断及其病理分型中的特异度相对较高，具有一定临床应用价值。赵琳琳等[14]研究报道，细胞形态学检查可用于肺癌病理分型诊断，包括鳞癌、腺癌和小细胞癌，但分型诊断符合率低于细胞形态学联合免疫细胞化学诊断。本研究中，支气管镜刷检标本液基细胞学诊断肺癌的准确率为82.16%，诊断肺癌分型腺癌、鳞癌、小细胞癌的准确率分别为71.97%、68.79%、73.89%，灵敏度、特异度均不高。考虑原因可能是腺癌、鳞癌、小细胞肺癌部分细胞均出现细胞核型不规则、排列平铺等现象，在细胞形态学上难以区分。因此，临床应用支气管镜下刷检液基细胞学判断肺癌分型时应联合其他检测技术。

近年来，细胞块技术诊断肺癌及其分型的符合率明显提高，已得到广泛认可，更重要的是可进一步使用细胞块切片进行免疫细胞化学染色，在肺癌诊断及评估中具有重要意义[15]。细胞蜡块切片经HE染色后，核质结构更加清晰，可有效识别异型细胞[16]。陈一峰等[17]研究发现，胸腔积液细胞蜡块可有助于明确诊断肿瘤的类型，且在肺癌EGFR基因突变检测中发挥重要作用。赵业等[18]研究报道，细胞块切片诊断恶性肿瘤的符合率明显高于常规细胞学涂片，且可用于诊断肿瘤的具体类型。本研究结果发现，细胞块技术诊断肺癌的准确率为85.95%，诊断肺癌分型腺癌、鳞癌、小细胞癌的准确率分别为75.80%、80.25%、76.43%，在肺癌及其分型中具有一定诊断价值，但诊断灵敏度较低，临床应用易导致漏诊。因此，本研究将液基细胞学和细胞块技术联合用于诊断肺癌及其分型，结果发现诊断肺癌的准确率高达97.30%，诊断腺癌、鳞癌、小细胞癌的准确率分别为97.45%、91.72%、90.45%，两者联合诊断肺癌及其分型腺癌、鳞癌、小细胞癌的准确率均明显高于两者单独诊断，临床应用价值可能更高。

综上所述，支气管镜下刷检标本液基细胞学联合细胞块技术能明显提高肺癌的诊断准确率，且有较高的分型准确率，可能为肺癌及其分型提供更加客观的诊断结果。但本研究样本量相对较少，且未在细胞块技术基础上加做免疫组织化学检测，下一步应扩大样本量进行更深入的研究。