血小板减少原因分析及解决方案

谢梅 周敏 何婷

【摘要】目的：探讨血小板减少的原因，为不同原因导致的血小板减少寻找适合本实验室的解决方案。方法：对我院2018年11月至2020年11月的34500例住院病人的血常规标本分别进行仪器复检、手工计数、涂片复检，分析不同原因的血小板减少的复检方法与手工计数的相符率。结果：仪器复检与手工计数的相符率仅为87.29%，有129例结果与手工计数结果不相符。而涂片估算复检与手工计数的相符率为99.51%，仅5例不相符。枸橼酸钠管复检主要是针对EDTA -PTCP的标本，与手工计数的结果相符率为100%。结论：对于血小板真性减少的情况，我们可以直接仪器复查，但为了结果的准确性，笔者认为应该手工计数。而对于仪器有报警的标本建议同时进行手工计数和涂片染色镜检，而对于E D T A -PT C P的标本，应重新采集EDTA抗凝管、枸橼酸钠抗凝管和指尖血一份，结合仪器检测、手工计数和涂片镜检的估计数综合出结果。

【关键词】血小板;复检;EDTA-PTCP;手工计数

【中图分类号】R558.2 【文献标识码】A 【DOI】10.12332/j.issn.2095-6525.2021.11.003

【Abstract】Objective：To explore the causes of thrombocytopenia and to find a suitable solution for different causes of thrombocytopenia. Methods： in our hospital between Novemberl 2018 and November 2020 and routine blood specimens of 34500 cases of hospitalized patients， Instrumental review、manual counting and smear recheck， analysis of the different reasons of thrombocytopenia re-inspection method is consistent with manual counting rate. Results： The coincidence rate between instrument recheck and manual counting was only 87.29%， and there were 129 cases whose results were not consistent with manual counting. The coincidence rate between retest and manual counting was 99.51% in 5 cases. The reexamination of sodium citrate tube was mainly for edta-ptcp specimens， and the coincidence rate was 100% with the result of manual counting. Conclusion： in the case of thrombocytopenia， we can directly review with the instrument， but for the accuracy of the results， the author believes that manual counting should be performed. For the alarm specimens ，the author Suggests that use instrument manually count and smear staining microscopy ， for the EDTA - PTCP specimens， should be to collect EDTA anticoagulant pipe， sodium citrate anticoagulation and finger tip blood ， We should integrate the instrument testing， manual counting and comprehensive estimate the result of smear microscopy，and get a better report.

【Key words】platelet;reexamination;EDTA-PTCP;manual count

血小板檢测是临床最为常用的检测项目之一，随着全自动血球分析仪的普及，大大的提高了检验速度，然而，引起血小板减少的原因很多，仪器对于血小板真性减少和血小板假性减少无法识别，需要检验科人员制定合适的复检方法。众所周知，目前检测血常规最为广泛的抗凝剂是由国际血液学标准化委员会（ICSH）认定的乙二胺四乙酸（EDTA）盐。但是，由于血小板易聚集、黏附、破坏等特点及血球仪自身原理的限制，测定血小板常会出现假性减少现象，即EDTA依赖性假性血小板减少症（EDTA-PTCP），近几年的报道也日趋增多[1-3]。研 究 报道EDTA —PTCP 患者的发生率为0.07% ～ 0.2%[4-6]。 而在恶性肿瘤、慢性肝病、孕妇、自身免疫 病及心血管疾病的患者中发生率较健康者高[7]。下面我将就我科室近两年的血小板复检情况做分析，找出针对不同原因导致的血小板减少适合的复检方案。

1  材料和方法

1.1 标本来源

我院2018年11月至2020年11月的34500例住院病人的EDTA抗凝血常规标本2ml（排除肉眼可见凝集和采血不畅的标本）。其中，32例镜下凝集（排除冷凝集和其它原因导致的不可见凝集）标本重新采集EDTA-K2抗凝管、枸橼酸钠（1：9）抗凝标本和指尖血20ul。

1.2 试剂及仪器

日本sysmex XE1000i全自动血细胞分析仪，及其原装配套的质控品和试剂，草酸铵血小板稀释液，参照全国临床检验操作规程（第4版），olympus显微镜，Baso公司的吉姆萨-瑞氏染液，力因公司的真空采血管。

1.3 方法

对来自我院2018年11月至2020年11月的34500例住院病人的血常规标本进行检测，以下全程严格按实验室标准操作规程进行。

对触发我科室血小板复检规则的标本1015例，对1015例标本进行仪器复检、手工计数复检和涂片复检。其中，32例镜下凝集（排除冷凝集和其它原因导致的不可见凝集）标本重新采集EDTA-K2抗凝标本、枸橼酸钠（1：9）抗凝标本和指尖血20ul。对重新采集的EDTA-K2抗凝标本和枸橼酸钠（1：9）抗凝标本用仪器发检测（枸橼酸钠（1：9）抗凝标本需在10min内检测），20ul指尖血用血小板稀释液进行手工计数。

血小板数量以手工计数的结果为参考。

1.4 数据处理

相符例是采用统计学以x±s表示，涂片估算=一个油镜视野中血小板平均个数*15*109/L[8]。

2  结果

分析不同原因的血小板减少的复检方法与手工计数法的相符率如下：

由上表可知，用仪器复检有129例与手工计数不相符，其中，有32例为E D T A -PT C P（排除冷凝集和其它原因导致的不可见凝集），97例为其他原因的不符。仪器复检与手工计数的相符率仅为87.29%，有129例结果与手工计数结果不相符。而涂片估算复检与手工计数的相符率为99.51%，仅5例不相符。枸橼酸钠管复检主要是针对EDTA -PTCP的标本，与手工计数的结果相符率为100%。

3  讨论

血小板减少大致分两种 ： 一是血小板真性减少，即患者由于自身疾病导致的血小板减少 ，如特发性血小板减少性紫癜 （IT P ） 、白血病、肝、肾疾病、药物反应等。一是患者血小板正常而结果显示减少的假性减少，如血小板聚集（E D T A 抗凝剂依赖） 、大血小板的存在、采血不顺等，这种情况仪器会发出报警，如 ：血小板聚集，或直方图 、散点图显示异常，这时就需要人工辨别减少的真伪[9]。

我们发现仪器复检相符的标本，大多没有报警血小板聚集，血小板直方图和红细胞直方图也未见异常，查看其病例大多数有导致血小板减少的基础疾病，体征少数有淤血瘀斑等出血表现，此类血小板的减少多为血小板真性减少。所以，对于血小板真性减少的标本，为减少检验时间，我们可用仪器复查，但要判断是否为真性血小板减少，需要结合病人病史，体征，仪器散点图和直方图综合判断，但不典型或判断困难者应直接手工计数，以结果的准确性为重。

那么，对于不相符的129例标本，我们发现这129例标本都有不同程度的散点图和直方图有异常，有些标本仪器报警聚集。对非聚集的标本应手工计数血小板，排除红细胞碎片，小红细胞和大血小板的造成的计数不准确，涂片染色镜检，观察有无大血小板，红细胞碎片和小红细胞等影响血小板数量假性增多或减少的因素。仪器报警血小板聚集的标本，为32例EDTA –PTCP的标本。红细胞碎片和小红细胞易被当成血小板，而使得结果高于真实值，当真实的血小板数量低于20*109/L时，患者极易出现内脏甚至颅内出血，造成严重后果。而大血小板又易被当做红细胞导致血小板计数结果比真实值低，为医生提供了错误结果导致医生误诊。

造成血小板聚集的原因很多，如：采血不畅、混合不均匀、抗凝管过期或不达标、冷凝集等，这些常见的情况不过多讨论检验人员都已熟知应对方案。而对32例EDTA –PTCP的标本（已排除上述因素），却是比较少见的。但是现在越来越多EDTA -PTCP的报道，目前认为 E D T A 引起血小板聚集的原因是存在能够识别血小板细胞膜糖蛋白Ⅱb/1]Ia（GP1Ib/1]Ia） 受体的EDTA依赖性自身抗体。正常情况下抗原抗体结合位点隐藏在复合物内部，当遇到EDTA 时，其位点发生改变，血小板被激活，导致聚集发生[10]。仪器报警血小板聚集的标本，对EDTA -PTCP的标本，应重新同时抽取EDTA抗凝管、枸橼酸钠抗凝管和指尖血一份，抗凝血上机检测，枸橼酸钠抗凝管一定要在10min内检测，有报道认为，该抗凝剂的血标本，10min后血小板数量将渐渐降低，检测结果不再准确。另外，涂片复检，看镜下有无血小板聚集，观察血小板形态，估算血小板数量，最后用指尖血手工计数，综合枸橼酸钠抗凝管、手工计数、涂片估算的结果出报告。对于E D T A -PT C P的标本，虽然处理起来很繁琐，但这毕竟是很少数的情况，为了结果的准确性，笔者认为这是最好的方法。

涂片估算计数与手工计数相符率为99.51%，仅5例不相符，分析其原因，可能是因为估算计数仅仅是一个估算的方法，影响因素多，比如推片的厚薄、选择估算的视野等等。

总结血小板减少的各种原因，制定条例清晰的复检方案，很大程度上节约了检验时间，提供更真实有效的实验数据，减少误诊率，也为病人减轻负担。

参考文献：

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