平顶山市无偿献血人群隐匿性乙肝血清学特征分析

陈 丹

平顶山市红十字中心血站(河南 平顶山 467000)

隐匿性乙型肝炎感染(occult hepatitis B virus infection,OBI)特指血清转换前的窗口期,机体存在乙肝病毒DNA,但仍无法对乙肝病毒表面抗原(HBsAg)进行有效测定,乙肝核心抗体(抗-HBc)可能为阳性的一段特殊时期[1]。OBI在不同地区的流行状况存在一定差异[2],据相关研究统计,2017年,平顶山市的乙型肝炎(HBV)发病率在38.51/10万,平顶山市的HBV发病率逐年下降,但缺乏近年来的数据观察[3]。乙肝属于血液传播疾病,基于OBI患者由于处于窗口期外,难以通过HBsAg检测确诊为乙肝患者,继而造成乙肝输血及感染风险[4]。因此,有必要就平顶山市无偿献血人群OBI的血清学特征进一步分析,为平顶山市无偿献血机构血液制品采集及筛检提供数据支持。

1 资料与方法

1.1检测对象及样本采集 选取平顶山市中心血站2019年1～12月检测的51689例无偿献血者的血液标本,献血者年龄18～55岁,其中初次献血者20125人,重复献血者31564人,血液样本均采集自经胶体金试纸测定HbsAg初筛合格,然后在采血时在血袋样本留取口留取三个5ml试管样本,分别为抗凝管、促凝管和带有分离胶的抗凝管。并留取血袋样辫保存备查。

1.2设备及试剂 设备选用全自动样本处理系统(型号TECAN-EVO)、全自动酶免处理系统(型号为BEPIII和FAME)、全自动核酸汇集提取仪、PCR扩增仪。试剂选择HBV-HCV-HIV(1+2型)荧光PCR联合检测试剂,试剂由苏州华益美生物科技有限公司及上海浩源生物科技有限公司提供。HBsAg及二对半试剂盒由厦门新创生物工程股份有限公司和法国伯乐生产。

1.3检测方法 采用酶联免疫吸附法对血液样品进行测定,采用平行联检对HBsAg、抗-HCV、抗-HIV、梅毒血清学指标进行测定。乙肝二对半操作方式严格参照各种试剂及仪器说明书进行操作。上述指标测试结束后进行核酸定性检测,HBV-DNA核酸定性检测为阳性者,确定最终OBI标本。

1.4观察指标 采集献血者的性别、年龄及HBsAg、HBV-DNA测定结果。当HBsAg测试为阴性(-)且HBV DNA(+)者经跟踪测试HBsAb、HBeAg、HBeAb、HBcAb、经分析后视为OBI患者。

1.5统计学方法 采用STATA 11.0软件进行数据处理,分类变量应用卡方检验,连续变量采用t检验,检验水准α=0.05。

2 结果

2.1OBI感染者性别、年龄情况 经检验筛查确定,平顶山市无偿献血人群中隐匿性乙肝患者仅45例,统计年OBI发病率为0.87%。OBI与非OBI患者相比,男性、35岁以上人群、血清学指标HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性例数高于非OBI者,有统计学意义(P<0.05)(见表1)。

表1 OBI感染者性别、年龄情况

2.2OBI的血清学标志物分布模式 比较OBI患者的HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性率,有统计学意义,以HBcAb阳性率最高,达100%,HBeAb阳性率次之,为53.33%(P<0.05)(见表2)。

表2 OBI的血清学标志物分布模式(n=45)

3 讨论

乙型肝炎(HBV)是世界范围内的流行病之一,我国约有1亿以上的HBV感染者[5]。由于HBV起病隐匿,且成人HBV感染者常无自感症状。调查显示,深圳市无偿献血人群中OBI感染率在0.04%[6]。与深圳市相比,本研究就平顶山市2019年的无偿献血者中的OBI感染率在0.09%(45/51689),相比较而言,平顶山市的OBI感染率更高,但与江苏地区的OBI感染率0.08%接近[7]。

本研究同时比较OBI和非OBI者的性别、年龄段及血清学指标发现,45例OBI患者中多数为男性、年龄>35岁,且HBsAb、HBeAb、HBcAb筛查的阳性率更高。在性别方面,这一结果与深圳市及庆阳市相同[8],考虑主要是男性的生活方式密切相关[9]。而<35岁人群的OBI感染率更低,主要以新生儿接种乙肝疫苗及青年人的免疫功能更强有关,而≥35岁人群会存在免疫功能逐渐衰退,步入50岁以上生活节奏减慢,感染乙肝风险有所降低[10]。

HBV感染受病毒DNA载量及免疫状态影响,OBI属于HBV感染的特殊阶段,血液的血清中携带的病毒DNA载量较低,对受血者而言,需要免疫状态严重下降才能造成输血感染风险[11]。本研究同时针对血清学指标进行观察,发现OBI患者HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性率更高。因此,对于初筛存在HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性患者应进一步确定HBV DNA载量,以保证血液制品的安全性[12]。进一步分析,OBI患者的HBsAb、HBeAb、HBcAb阳性率有统计学意义,以HBcAb阳性率最高,达100%,HBeAb阳性率次之,为53.33%(P<0.05)。这一结果与张毓等研究结果相似[13]。多数OBI患者存在HBsAb、HBeAb、HBcAb中两种或三种阳性情况,也存在少部分患者单一HBcAb阳性者。研究认为,HBcAb阳性属于较为稳定的指标,OBI患者通常处于感染或恢复期,而此类OBI患者的HBsAb属于阴性状态,无法对受血者产生保护能力,输注后会增加感染风险[14-15]。同理,虽然没有HBeAb单独阳性者,但仍存在部分患者缺乏HBsAb抗体保护,输注后仍会存在受体感染风险。因此,对于HBeAb、HBcAb阳性者需进一步测定病毒载量,明确受血症感染风险。

国内外对隐匿性感染者是否可参与献血仍存在争议。部分学者认为,隐匿性感染献血者血液传播能力差,病毒载量低,且开展全面核酸检测费用过高,增加用血成本,部分省市的隐匿性感染者的献血者仍会作为合格供血者[16]。反对者认为,当隐匿性感染着的血液被制成体积大的200ml的新鲜冰冻血浆或20ml的血浆红细胞后,足以感染给被输血者[17]。因此,国际上通常认为,应将HBV的最低传染量下调至3.0IU/ml。当献血者的核酸DNA为阴性时可作为合格供血者。

综上所述,平顶山市无偿献血人群中隐匿性乙肝发病率为0.87%,核酸检测是降低单纯乙肝病毒抗原抗体筛查所漏诊的OBI的输血感染风险的有效方式,尤其对于存在HBeAb、HBcAb阳性结果患者应进一步进行核酸测定,避免造成输血传播乙肝风险。