食品中沙门氏菌使用不同分离培养基检测的效果比较

高珮（天津市河西区疾病预防控制中心,天津 300211）

沙门氏菌属于常见的肠道致病菌群，可寄生于人类和动物的肠道中，是引发食源性疾病的主要致病菌之一。有研究表明[1]，沙门氏菌引发的食物中毒事件数量位于世界食物中毒前列，沙门氏菌引发的食物中毒事件占我国食物中毒事件发生数量的70%-80%。沙门氏菌的主要传播媒介是食品和饮用水，误食含有沙门氏菌的食品和水源，会引发患者产生食物中毒症状，并发伤寒、胃肠炎、肠热症、败血症等疾病，若使用量较大，治疗不及时，会危及患者生命安全[2-3]。鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌是三种食物中毒发病率较高的沙门氏菌。此次研究主要为观察食品中沙门氏菌使用不同分离培养基检测的效果，现报告如下。

1 材料和方法

1.1 实验菌株来源 鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌三种沙门氏菌均由上海质量监督检验技术研究院食化所微生物实验室提供。

1.2 培养基和试剂 沙门氏菌显色培养基（CAS）（法国科玛嘉公司）；木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD）、亚硫酸铋琼脂（BS）、酚红煌绿琼脂（BGA）、HE琼脂（HE）（OXOID公司）。试剂均经有效性验证合格。

1.3 实验方法

1.3.1 沙门氏菌的复苏 分别从鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌、甲型副伤寒沙门氏菌菌株管中挑取小的环状菌苔，接种到5ml营养肉汤中，置于37℃培养箱中培养20h。

1.3.2 沙门氏菌的接种 复苏后的沙门氏菌菌株划线，取出沙门氏菌显色培养基（CAS）、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD）、亚硫酸铋琼脂（BS）、酚红煌绿琼脂（BGA）、HE琼脂（HE）五种培养基，将沙门氏菌分别接种到五种分离培养基和显色培养板上，置于37℃培养箱中培养48h。

1.3.3 生化实验 挑取沙门氏菌菌落，取出三糖铁琼脂（TSI）、尿素酶琼脂（URE）、赖氨酸脱羧酶琼脂（LIA）、蛋白胨水培养基（SAA）生化管，将沙门氏菌分别接种到四种生化管中，置于37℃培养箱中培养24h。

1.4 生化实验结果判定 ①H2S：三糖铁琼脂（TSI）生化管变黑为“+”，不变黑为“-”；②尿素酶琼脂（URE）：培养基变红为“+”，变黄为“-”；③赖氨酸脱羧酶琼脂（LIA）：生化管变紫色为“+”，变黄色为“-”；④蛋白胨水培养基（SAA）：加入靛基质，生化管内有红环产生为“+”，无红环产生为“-”。

1.5 统计学方法 采用SPSS22.0软件进行数据统计分析，计数资料以率（%）表示，采用χ2检验，计量单位用（±s），P＜0.05显示差异具有统计学意义。

2 结果

2.1 三种沙门氏菌在不同分离培养基上的生长情况及显色情况比较 三种沙门氏菌分别在沙门氏菌显色培养基（CAS）、木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD）、亚硫酸铋琼脂（BS）、酚红煌绿琼脂（BGA）、HE琼脂（HE）五种不同的分离培养基上生长，经过24-48h后，观察其生长情况发现，鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌在五种分离培养基的生长菌落大致相同。其中，木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD）、亚硫酸铋琼脂（BS）、HE琼脂（HE）分离培养基上的菌落中心均有黑色菌落出现，即H2S产生；沙门氏菌显色培养基（CAS）、酚红煌绿琼脂（BGA）分离培养基上均无黑色菌落出现。甲型副伤寒沙门氏菌在培养24h后，菌落生长情况良好，但菌落中心没有黑色菌落出现；培养48h后，在木糖赖氨酸脱氧胆盐琼脂（XLD）、HE琼脂（HE）分离培养基上的菌落中心均有黑色菌落出现，即H2S产生；沙门氏菌显色培养基（CAS）、亚硫酸铋琼脂（BS）、酚红煌绿琼脂（BGA）分离培养基上均无黑色菌落出现。结果表明，甲型副伤寒沙门氏菌具有延迟产生H2S的特性。同时，三种沙门氏菌在沙门氏菌显色培养基（CAS）上的菌落均为紫红色菌落，均无黑色菌落出现，详见表1。

表1 三种沙门氏菌在不同分离培养基上的生长情况及显色情况对比

2.2 三种沙门氏菌的生化试验结果比较 三种沙门氏菌分别在三糖铁琼脂（TSI）、尿素酶琼脂（URE）、赖氨酸脱羧酶琼脂（LIA）、蛋白胨水培养基（SAA）四种不同的生化管中生长，经过24-48h后，观察其生长情况发现，甲型副伤寒沙门氏菌具有延迟产生H2S的现象，详见表2。

表2 三种沙门氏菌的生化试验结果对比

3 讨论

沙门氏菌属于常见的肠道致病菌群，是引发食源性疾病的主要致病菌之一。沙门氏菌感染患者产生食物中毒症状，并发伤寒、胃肠炎、肠热症、败血症等疾病，严重者会危及患者生命安全。沙门氏菌属于人畜共患疾病，尤其是生鲜食品中容易检测到沙门氏菌[4-6]；虽然经过热加工后的熟制食品含量较低，但在包装、运输过程中，很有可能受到沙门氏菌的污染[7-8]。因此，提高沙门氏菌检测的精确度，是保障食品安全的关键。

本次实验结果表明：鼠伤寒沙门氏菌、猪霍乱沙门氏菌在XLD、BS、HE分离培养基上的菌落中心均有黑色菌落出现，即H2S产生；CAS、BGA分离培养基上均无黑色菌落出现。甲型副伤寒沙门氏菌在培养24h后，菌落生长情况良好，但菌落中心没有黑色菌落出现；培养48h后，在XLD、HE分离培养基上的菌落中心均有黑色菌落出现，即H2S产生；CAS、BS、BGA分离培养基上均无黑色菌落出现。结果表明，甲型副伤寒沙门氏菌具有延迟产生H2S的特性。同时，三种沙门氏菌在CAS上的菌落均为紫红色菌落，均无黑色菌落出现。三种沙门氏菌分别在TSI、URE、LIA、SAA四种不同的生化管中生长，经过24-48h后，观察其生长情况发现，甲型副伤寒沙门氏菌具有延迟产生H2S的现象。证明了沙门氏菌显色培养基（CAS）能够有效检测出食品中的沙门氏菌，避免了单纯检测H2S产生的误差。分析其原因为：产生H2S是沙门氏菌的典型特性，但甲型副伤寒沙门氏菌具有延迟产生H2S的现象，因此，并不能以检测H2S作为检测沙门氏菌的唯一手段。沙门氏菌显色培养基（CAS）能够有效检测出甲型副伤寒沙门氏菌，大大提高了检测准确率，降低了假阴性的发生。

综上所述，沙门氏菌显色培养基（CAS）对食品中沙门氏菌的分离检测效果最好，可以有效提高检测精度和检测效率，值得推广应用。