药典炮制与传统炮制方法对清半夏质量的影响

董全星

河南省焦作市中医院，河南 焦作 454000

半夏是临床常用的中药，来源于天南星科半夏属植物。生半夏毒性较大，多外用，功效为消肿散结、燥湿化痰、降逆止呕[1]。半夏植物广泛分布于我国长江流域、东北、华北等地区。该植物喜潮湿阴凉，多生于草坡、疏林下。半夏入药部位为其干燥块茎，在诸多医学典籍中，均有半夏入药的记载，其药效已达成共识[2]。半夏成分包含氨基酸、挥发油脂肪及胆碱等，还存在烟碱、毒芹碱等成分。半夏具有显著的功效，但是含有有毒成分，生食少量半夏，出现口舌麻木，大量食用生半夏，可出现咽喉疼痛、呕吐、声音嘶哑及呼吸困难等中毒症状，甚至死亡。实验研究显示，半夏有毒成分为草酸钙针晶，可产生刺激毒性。生半夏不能内服，内服制剂需要炮制，炮制后半夏毒性降低，根据炮制的方法不同，临床上常用的有法半夏、姜半夏及清半夏[3]。药理学研究显示，炮制后的半夏毒性在用药安全范围。药物研究[4]显示，草酸钙针晶难于溶于水，需要反复加热，才能破坏其结构，常规采用姜制并不能完全消除其毒性；经过白矾炮制的半夏，毒性较小。《中国药典》(2020版)记载，白矾功效有止血止泻、解毒杀虫，可用于炮制半夏，制约半夏毒性成分。白矾为铝的复合物，水解为氢氧化铝，在水溶液中，白矾呈凝胶状态，可以吸附半夏有毒成分。恰当的炮制方法既要保证半夏的功效，又要降低半夏的毒性，还需要控制白矾的含量。本试验采用不同的方法对半夏进行炮制，比较不同方法对半夏安全性和有效性的影响。

1 仪器与材料

1.1 仪器 高效液相色谱仪(生产厂家：安捷伦科技有限公司，Agilent 1260)、热电色谱柱(生产厂家：赛默飞世尔科技公司，HYPERSIL C18)、天平(生产厂家：德国赛多利斯集团，BSA124S)。

1.2 材料 生半夏来源于焦作市中医院药学部采购半夏干燥块茎。白矾(徐州医药股份有限公司)。乙醇、HCL溶液、草酸基试剂、氢氧化钠滴定液、二甲酚橙指示液、醋酸-醋酸铵缓冲液、氨试液等。

2 实验方法

2.1 样本制备 A组清半夏传统炮制方法，称取100 g生半夏饮片，放入不锈钢锅内，加入纯净水300 mL浸泡，每日换水2次，直至半夏内无干心，60 ℃下进行干燥处理，备用。B组清半夏药典炮制方法：称取生半夏100 g，放入不锈钢锅内，加入8%的白矾(20 g)，加纯净水300 mL浸泡，至半夏内无干心，品尝舌头稍有麻木感，60 ℃下进行干燥处理，备用。

2.2 草酸钙针晶含量测定

2.2.1 色谱条件 流动相：0.5 mmol/L叔丁醇水溶液，0.5% KH2PO4，采用磷酸调节pH值，柱温：32.0 ℃，流速：1.0 mL/min。

2.2.2 制备对照品溶液 取10 mg标准品 H2C2O4·2H2O 放入100 mL容量瓶内，蒸馏水进行定容，将浓度调整至0.2 mg/ mL，备用。

2.2.3 制备供试溶液 将半夏粉碎筛选，称取100 mg药粉，放于锥形瓶内，加入5 mL蒸馏水，充分震荡，搅拌混合均匀，在60 ℃水浴加热，以3500 r/min离心速度离心5 min，取离心残渣，加入2 mL蒸馏水，再次洗涤、离心，重复2次，收集残渣，加入3.0 mL蒸馏水和0.2 mLHCL溶液混合均匀，60 ℃水浴加热，再次搅拌离心，反复处理2次，离心取上清液2 mL，放置于容量瓶中，定容至10 mL，备用。

2.2.4 方法学检验 取备用溶液，每次吸取10 mL，连续5次。检测峰面积RSD为0.15%，表示测量仪器精密度较好。吸取供试品溶液10 mL，分别在0、4、8、12 h内测定样本，检测峰面积RSD为1.35%，显示样本稳定性良好。重复性试验：检测RSD为1.18%，加样回收率检测，检测其峰面积的RSD为1.16%。见表1、图1。结果显示符合测定要求。

图1 清半夏HPLC特征图谱

表1 样本回收率检测

2.2.5 样本成分测定 将两组样品分别称取 0.1 mg，按照上述方法，分别制备供试品溶液，分别取供试品溶液10 mg，注入液相色谱仪，测定草酸峰面积，根据标准曲线来计算样本草酸含量。草酸分子量为126，草酸钙针晶分子量为146，草酸钙针晶含量计算公式：草酸含量(%)×146/126,计算草酸钙针晶含量。见表2。

2.3 琥珀酸含量测定 精密称取5 g清半夏粉末，放于锥形瓶中，加入乙醇溶液，持续加热回流1 h，重复提取2次，将处理后的溶液冷却、过滤、合并，蒸干收集残渣，加氢氧化钠滴定液，超声处理30 min，将溶液置入50 mL容量瓶中，搅拌均匀，备用；取供试品溶液20 mL，检测溶液总游离有机酸含量，采用电位滴定法，盐酸滴定液滴定。1个样品平行3份。记录消耗盐酸滴定液体积和电位值，绘制滴定曲线图，显示滴定终点明显。检测结果见表2。

表2 清半夏两种炮制方法所含成分的比较

2.4 白矾含量测定 称取样品5 g，至于坩埚内，加热至碳化，将温度调至500 ℃，持续灰化4 h，冷却后，加入盐酸溶液10 mL，密封后，在60 ℃水浴中加热，持续10 min；纯水洗涤坩埚、滤渣，收集洗液和滤液，加入甲基红乙醇溶液调整溶液颜色。加入醋酸-醋酸铵缓冲液，加入二甲酚橙指示液、锌滴定液等。记录消耗滴定液体积和电位值，并以此为坐标，绘制滴定曲线图，显示滴定终点明显。白矾测定结果见于表2。

3 讨论

3.1 半夏的现代研究 半夏是临床上常用的中药材，功效有消肿散结、镇咳止呕。用于治疗呼吸系统、消化系统疾病，还具有抗病毒、抗炎作用[5]。诸多医学典籍中，均有半夏入药的记录，在中医经典著作《黄帝内经》中记载“半夏汤”治疗不卧、不暝等疾病，并且记载半夏的用法，但是对于半夏的炮制和毒性未见记载[6]。误食半夏可导致中毒，表现为口腔、舌头、咽喉部麻辣感，严重者，可出现恶心、呕吐、腹痛及胸前区压迫感等症状[7]。少量生半夏，即可引起中毒症状。

3.2 炮制对有毒成分的影响 半夏炮制的目的是为了降低或消除毒性，保证安全用药，其炮制方法除了水洗外，还常用到白矾、石灰、生姜等辅料，经过适宜的辅料处理，达到解除半夏毒性的目的[8]。随着中医药的快速发展，半夏的炮制方法借助现代科学技术也多种多样，根据炮制辅料的不同，可分为清半夏、姜半夏、法半夏及相关中药颗粒剂型[9]。临床中药学十分重视对半夏的炮制工艺和毒性研究，其炮制方法也一直在完善。半夏有效成分复杂，包括氨基酸、鸟苷、挥发油脂肪及生物碱等。半夏所含有的草酸钙针晶属于有毒成分，草酸钙针晶多以单一形态存在。半夏生品中含有大量草酸钙针晶，服用后，刺激口腔、胃肠道黏膜，中毒后，表现为针刺样疼痛、黏膜红肿。严重者可导致腹泻、失音等后果。炮制后半夏入药，减少草酸钙针晶含量，降低了半夏的毒性，但是不同的炮制方法影响半夏的质量。选择最大限度的保留有效成分，减少毒性成分的炮制方法。经过长期的药材炮制实践，采用白矾溶液吸附半夏的草酸钙针晶等有毒成分，降低其毒性，该炮制方法得到广泛应用[10]。

中药材质量是中医药发展的基础，中药从业者一直致力于优选制备优质的中药材，该工作也是临床中药研究的重点。实验室做了很多半夏成分和毒性研究，但是各成分含量较低，并且存在诸多不稳定性。不同炮制方法的半夏成分含量缺乏精准性，这也是我国中药饮片难以进入国际市场的主要难题。实验研究显示，半夏所含草酸钙针晶与其毒性呈正相关，不同半夏炮制方法可以影响其含量[11]。

3.3 白矾对清半夏质量的影响 白矾作为辅料降低半夏的毒性，国内学者做了诸多深入细致的研究，本试验选择传统清半夏炮制方法和《药典》炮制规范进行对比，检测发现，两种炮制方法其游离酸和草酸钙针晶存在差异，结果显示，两种炮制方法的有效成分均达到标准，其中《药典》(2020版)中的炮制方法炮制的清半夏游离酸含量较高，而草酸钙针晶含量较低，结果优于传统炮制方法，符合清半夏的安全和药用标准。临床研究[12]显示，炮制后清半夏毒性降低，化痰止咳作用增强，但是常存在铝金属残留，而控制白矾含是炮制的重要环节。铝金属含量超标，适得其反，反而危害生命健康，因此，在清半夏炮制过程中，要严格控制白矾含量，同时严格遵循相关质量标准。